细胞粘附分子与肝脏移植排斥反应

同种移植排斥至今仍是器官移植后一个尚未完全解决的难题，也是移植失败的主要原因，。近年来，许多学者研究证实：细胞粘附分子在肝脏同种移植排斥反应中起到至关重要的作用。综述了细胞粘附分子的生物学特点，在肝脏移植排斥反应中的诱导和表达及其在诊断和治疗中的研究进展。     

小鼠肾移植模型的建立

目的建立小鼠肾移植模型,为利用转基因小鼠研究移植免疫奠定基础.方法采用雄性C57BL/6小鼠行120例血管化的异位异体肾移植,移植肾动、静脉分别与腹主动脉及下腔静脉行端侧吻合,尿道重建采用将供肾输尿管末端引入膀胱内加外固定的方法.分二期切除受体自身肾脏.结果手术成功率为87.5%,手术时间为(121±18)min,热缺血时间约为3～6s,冷缺血时间为(55±13)min.结论细致的显微手术、正确的吻合方式、尽可能缩短肾缺血时间及动静脉阻断时间,以及坚持微创手术原则是成功建立小鼠肾移植模型的关键.     

70例原位肝脏移植

目的总结肝脏移植治疗不同终末期肝病的经验,探讨肝移植在治疗肝细胞癌(HCC)和重症乙型肝炎(乙肝)的疗效,以及评价拉米夫定对预防乙肝复发的价值.方法回顾性分析了自1993年4月～2000年12月实施的70例肝移植患者的临床资料.肝移植的主要指征是原发性肝癌(26例)、肝硬化(21例)、重症乙型肝炎(12例)、硬化性胆管炎(4例)以及其它终末期肝病(7例).对12例重症乙型肝炎患者应用拉米夫定治疗.采用多元回归分析确定影响肝移植预后的危险因素.结果54例患者存活1个月以上,16例患者在移植术后30d内死亡,院内存活率为77.1%,肝功能属ChildA级和B级的患者院内存活率明显高于ChildC级患者(P＜0.05),小肝癌患者的疗效优于大肝癌患者.移植前APACEⅢ评分,腹水量以及血肌酐水平与肝移植预后有密切关系.在重症乙肝患者中,9例仍存活、存活时间为2～24个月,拉米夫定可有效地预防肝移植术后乙肝复发,且无明显的副作用.结论本研究结果表明原位肝移植可使部分HCC患者获得治愈,部分病例可获得良好的姑息疗效,病例选择对肝癌肝移植的预后极其重要;结果还提示肝移植是治疗各种终末期肝病的有效手段.同时认为拉米夫定是一种疗效肯定,副作用小的预防肝移植术后乙肝病毒复发的药物.     

外周血淋巴细胞LFA-1水平与肝移植急性排斥的关系

【目的】探讨大鼠原位肝脏移植(OLTx)后外周血淋巴细胞表面淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）与急性排斥的关系。【方法】实验动物分为两组,非排斥对照组供体、受体均为SD大鼠,各20只,排斥组供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各20只。受体大鼠分别于原位肝移植术前1天及术后第1、3、5、7天从尾静脉采血,经免疫荧光抗体-流式细胞术检测淋巴细胞表面LFA-1的表达。【结果】原位肝移植术后,受体大鼠外周血淋巴细胞LFA-1呈低水平表达,与术前相比差异具显著性意义（P<0.01）;受体大鼠发生急性排斥反应时,外周血淋巴细胞LFA-1水平显著增高,与对照组相比差异具显著性意义（P<0.01）。【结论】检测外周血淋巴细胞LFA-1表达水平有助于移植肝脏急性排斥的诊断。     

肝组织ICAM-1及LFA-1表达对急性排斥反应的诊断价值

目的 探讨大鼠移植肝组织内细胞间粘附分子-1（ICAM-1）和淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）和淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）与急性排斥反应的关系。方法 将SD大鼠、Listar大鼠随机分为正常对照组、同种同基因移植组、同种异基因移植组。分别对正常肝组织及移植后2，4，7d肝组织进行活检，用单克隆抗体免疫组化染色，然后进行图像半定量分析，以检测正常及移植肝组织中ICAM-1和LFA-1的表达水平。结果 同种异基因移植组大鼠肝组织ICAM-1和LFA-1分子表达水平显著高于同种同基因移植组及正常对照组，且其升高与移植术后的时间呈正相关。结论 移植肝组织中ICAM-1和LFA-1表达的检测对肝移植术后急性排斥反应的诊断具有参考价值。     

外周血淋巴细胞LFA—1水平与肝移植急性排斥的关系

[目的]探讨大鼠原位肝脏移植（OLTx）后外 因淋巴细胞表面淋巴细胞功能相关抗原－1（LFA－1）与急性排斥的关系。[方法]实验动物分为两组,非排斥对照组供体、受体均为SD大鼠,各20只,排斥组供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各20只,受体大鼠分别于原位肝知名人士移植术前1天及及后第1、3、5、7天从尾静脉采血,经免疫荧光抗体－流式细胞术检测淋巴细胞表面LFA－1的表达。[结果]原位肝移植术后,受体大鼠外周血淋巴细胞LFA－1呈低水平表达,与术前相比差异具显性意义（P＜0.01）;受体大鼠发生急性排斥反应时,外周血淋巴细胞LFA－1水平显提高,与对照组相比差异具显性意义（P＜0.01）。[结论]检测外周血淋巴细胞LAF－1表达水平有助于移植肝脏急性排斥的诊断。     

Apaf—1和凋亡

Apaf-1(apoptotic protease activating factor-1)即凋亡蛋白酶活化因子-1,是线虫CED-4的人类同源物,它在哺乳动物线粒体依赖性凋亡通路和胚胎发育中至关重要.Apaf-1作为一种直接的凋亡激活剂,已在小鼠基因敲除实验中得到证实.在凋亡发生过程中,许多蛋白质直接或间接的与Apaf-1发生相互作用,Apaf-1实质上是构成凋亡体(apoptosome)的核心成份.对Apaf-1在组织内的生化功能研究,将为肿瘤、神经变性等由于凋亡失调导致的疾病提供新的诊断和治疗依据.     

人端粒酶催化亚单位及其相关蛋白在骨肿瘤中的表达

目的：研究骨肿瘤中端粒酶相关基因中,人端粒酶催化亚单位（human elomerase catalytic subunit,hTERT)和人端粒酶相关蛋白（human telomerase associated protein,TP1)两个重要成分的表达及对评估肿瘤良、恶性的意义。方法：提取50例手术切除骨肿瘤组织、2种人成骨内瘤细胞系Saos－2、OS732和原代培养人成骨细胞的总RNA。用一步RT－PCR方法检测hTERT和TP1mRNA的表达。结果：所有骨肿瘤标本及细胞系均检测到TP1的表达。hTERT在17例良性骨肿瘤、33例骨肉瘤、2种人成骨肉瘤细胞系和人成骨细胞的表达率分别为64．7％、57．6％、0％和0％。良、恶性肌肿瘤间hTERT表达的差异不具有显著性（P＞0．05）,不同分化程度骨肉瘤间hTERT表达的差异也不具有显著性（P＞0．05）。结论：一步RT－PCR是检测端粒酶亚单位的有效方法。hTERT和TP1表达水平的上调在骨肿瘤恶性进展中可能不起主要作用,在骨肿瘤发展和维持中可能有替代性（ALT）机制导致细胞永生化。     

检测胆汁中sICAM-1诊断大鼠肝移植急性排斥反应

目的：探讨胆汁中可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1)表达水平与大鼠肝移植急性排斥反应的关系。方法：将大鼠分为单纯胆汁外引流组、同种同基因肝移植组和同种异基因肝移植组,后二组行原位肝移植加胆汁外引流,用ELISA法检测未移植时及移植后2、4、7d胆汁中sICAM-1表达水平。结果：同种异基因肝移植组大鼠胆汁中sICAM-1表达水平显著高于同种同基因肝移植组,且其水平升高与移植术后时间变化呈正相关。结论：检测移植肝组织中sICAM-1的表达水平升高,有助于肝移植急性排斥反应的诊断,并可动态监测其严重程度。