gp130胞外区近膜端缺失的突变体介导IL-6信号的研究

目的研究ｇｐ１３０胞外区远膜端和近膜端在ＩＬ－６信号转导中的作用。方法用分子克隆手段构建全长的膜结合型ｇｐ１３０分子和胞外区第３０１～５８２位氨基酸残基缺失的突变体分子，并通过阻滞电泳方法比较突变体与野生型分子在传导信号方面的差异。结果通过酶切鉴定、序列分析和表达检测，证明野生型和突变体ｃＤＮＡ表达载体构建正确，并有效表达；阻滞电泳结果表明，在ＳＫＯ－００７细胞和Ｍｏｌｔ－４细胞中，突变体分子与野生型ｇｐ１３０都能介导ＩＬ－６信号。结论ｇｐ１３０分子胞外区远膜端在ＩＬ－６信号转导中发挥重要作用；而近膜端并非ＩＬ－６信号转导所必需。     

可溶性gp130和gp130反义核酸对IL-6诱导的靶基因启动子活性的影响

ｇｐ１３０是ＩＬ－６信号转导子，ＩＬ－６介导的信号转导起始于ｇｐ１３０与ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒα形成的复合物。为了研究ｇｐ１３０胞外区的结构与功能，在肝癌细胞ＨｅｐＧ２中建立了检测ＩＬ－６诱导基因表达强弱的方法，并观察了含胞外区全长（５９７个氨基酸）及氨基端３０４个氨基酸残基的ｇｐ１３０突变体，以及ｇｐ１３０反义核酸对ＩＬ－６生物学效应的影响。证明两个突变体和反义核酸均拮抗ＩＬ－６信号，为进一步研究ＩＬ－６受体拮抗剂奠定了基础。     

c－fos与神经生长因子基因表达的相关性

ｃ－ｆｏｓ与神经生长因子基因表达的相关性倪长源，李玉书，余云开，汪家政，范明（军事医学科学院基础医学研究所，北京１００８５０）神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）是神经系统最重要的生物活性分子之一。了解ＮＧＦ的表达机理对于指导神...     

可溶性白细胞介素6受体β亚基在重组痘苗病毒中的表达及其对动物的免疫效果

目的 :构建可溶性白细胞介素 6受体 ( IL- 6R) β亚基 ( sgp130 )重组痘苗病毒 ,感染动物细胞使其表达 sgp130 ,用重组病毒免疫动物产生特异性抗 sgp130抗体。　 方法 :将 sgp130基因导入痘苗病毒载体 p JSA1175,用脂质体转染法将重组载体与野生型痘苗病毒在 TK-143细胞中发生同源重组 ,用 Bud R和 X- gal双重选择 ,得到带有人 sgp130的重组病毒 ( Vsgp130 )。　 结果 :采用 IDA和 Western Blotting法证实 ,感染 Vsgp130的 TK-143细胞上清中有较强的 sgp130表达 ,表达产物分子量为 10 0 0 0 0左右。用重组病毒免疫家兔和 Balb/c小鼠 ,可刺激抗体产生。　 结论 :sgp130在痘苗病毒载体系统中的表达成功及抗 sgp130多克隆抗体的产生为进一步研究 IL- 6等细胞因子信号传导机理及研制抗 sgp130单克隆抗体奠定了基础     

多发性骨髓瘤和白血病细胞中白细胞介素—6激活的核因子 …

用阻滞电泳方法检测ＩＬ－６激活的核因子,以比较在多发性骨髓瘤细胞系ＳＫＯ－００７和转染ＩＬ－６受体基因的Ｔ淋巴母细胞白血病细胞系Ｍｏｌｔ－４中ＩＬ－６信号转导的差异。结果表明,在ＳＫＯ－００７细胞中,核因子可与双链探针ＡＰＲＥ,ＳＩＥ（ｍ６７）和ＮＦ－ＩＬ－６ＲＦ结合,被激活的核因子的量与ＩＬ－６受体的水平正相关;而在转染ＩＬ－６受体基因的Ｍｏｌｔ－４细胞中,核因子只与ＡＰＲＥ和ＮＦ－ＩＬ－６ＲＥ     

可溶性白细胞介素6受体β亚基拮抗IL—6信号的研究

ｇｐ１３０是白细胞介素６（ＩＬ－６）受体的β亚基和信号转导子。ＩＬ－６介导的信号转导起始于ｇｐ１３０与ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒα形成的复合体。为了研究ｇｐ１３０胞外区的结构与功能，我们克隆并表达了其胞外区全长及氨基端３０４个氨基酸残基的片段，并在白血病Ｒ２细胞、杂交瘤细胞和肝癌细胞中观察其生物学效应。结果发现，两个片段均拮抗ＩＬ－６信号，从而，证明了含细胞因子结合区的可溶性小片段和大片段都能与膜结合型     

GP130与IL-6信号途径

IL-6受体两个亚基IL-6Rα和gp130组成。IL-6与之形成三元复合体,然后激活与gp130相偶联的Jak家族的酪氨酸激酶,诱发系列的磷酸化事件,激活Ras途径及新发现的不依赖Ras的途径,即直接激活STAT家族成员APRF等,然后,诱导靶基因表达。     

可溶性IL—6Rβ亚基突变体在CHO细胞中的表达及 …

目的 弄清只含白细胞介素６（ＩＬ－６）受体β亚基（ｇｐ１３０）胞外第二、三个ＦＮⅢ区的可溶性突变体是否能结抗ＩＬ－６的生物学效应。方法 首先用重叠延伸ＰＣＲ方法扩增出ｇｐ１３０突变体ｅＤＮＡ；接着将其克隆到真核表达载体ｐＳＶＬ中；用脂质体转染法将此表达载体导入ＣＨＯ细胞中，通过点杂交和反转录ＰＣＲ证明其得到有效表达；用ＭＩＴ法在杂交瘤细胞和白血病细胞中观察了此突变体对ＩＬ－６生物学效应影响。结果     

多发性骨髓瘤和白血病细胞中白细胞介素-6激活的核因子活性比较

用阻滞电泳方法检测IL6激活的核因子,以比较在多发性骨髓瘤细胞系SKO007和转染IL6受体基因的T淋巴母细胞白血病细胞系Molt4中IL6信号转导的差异。结果表明,在SKO007细胞中,核因子可与双链探针APRE,SIE(m67)和NFIL6RE结合,被激活的核因子的量与IL6受体的水平正相关;而在转染IL6受体基因的Molt4细胞中,核因子只与APRE和NFIL6RE结合,而不与SIE(m67)结合。可见,IL6在SKO007和Molt4细胞中的信号转导途径是有差异的。