基于MITF与PI3K/AKT信号通路探讨多种单味中药对黄褐斑的作用机制研究

目的：基于小眼畸形相关转录因子(MITF)与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究多种单味中药对黄褐斑的作用机制。方法：水煎法制备甘草、当归、赤芍药液。黑素细胞分为0 μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml、500 μg/ml、1000 μg/ml、1000 μg/ml+LY294002组,培养基中加入相应浓度的中药药液与25 nM LY294002,MTT法检测不同剂量药物细胞毒性,测定酪氨酸酶活性与黑色素含量,WB检测MITF、PI3K/Akt信号通路相关分子水平。30只豚鼠随机分为对照组、模型组、甘草组、当归组、赤芍组,每组6只。中波紫外线(UVB)照射建立黄褐斑模型,甘草组、当归组、赤芍组分别接受0.3 mg/kg甘草、当归、赤芍药液灌胃,对照组、模型组接受等体积生理盐水灌胃,持续4周。切取豚鼠背部造模处皮肤,测定黑色素含量,HE、Fontana-Masson染色观察皮肤组织形态,WB、免疫组化检测MITF、PI3K/Akt信号通路相关分子水平。结果：与各组0 μg/ml组相比,甘草、当归、赤芍500、1000 μg/ml组细胞活力降低(P＜0.05);甘草500、1000 μg/ml组、当归100、500、1000 μg/ml组、赤芍1000 μg/ml组酪氨酸酶活性降低(P＜0.05);甘草500、1000 μg/ml组、当归50、100、500、1000 μg/ml组、赤芍100、500、1000 μg/ml组黑色素含量降低(P＜0.05)。WB检测结果显示,与各组0 μg/ml组相比,1000 μg/ml组MITF表达水平降低(P＜0.05),p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高(P＜0.05)。与对照组相比,模型组、甘草组、当归组、赤芍组背部皮肤黑色素含量升高(P＜0.05),皮肤组织结构紊乱,黑色素沉积明显增多;与模型组相比,甘草组、当归组、赤芍组背部皮肤黑色素含量降低(P＜0.05),皮肤组织结构较为完整,黑色素沉积减少。WB、免疫组化检测结果显示,与对照组相比,模型组MITF表达水平升高(P＜0.05),p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平降低(P＜0.05),甘草组、当归组、赤芍组MITF、p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高(P＜0.05);与模型组相比,甘草组、当归组、赤芍组MITF表达水平降低(P＜0.05)。结论：甘草、当归、赤芍可通过激活PI3K/AKT信号通路,抑制MITF表达,减少皮肤黑色素沉积,进而缓解黄褐斑症状。     

基于MITF与PI3K/AKT信号通路探讨多种单味中药对黄褐斑的作用机制

目的 基于小眼畸形相关转录因子（MITF）与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究多种单味中药对黄褐斑的作用机制。方法 水煎法制备甘草、当归、赤芍药液。黑素细胞分为0、50、100、500、1000μg/mL及1000μg/mL+LY294002组,培养基中加入相应浓度的中药药液与25 nmol LY294002,MTT法检测不同剂量药物细胞毒性,测定酪氨酸酶活性与黑色素含量,Western blot检测MITF、PI3K/AKT信号通路相关分子水平。30只5周龄豚鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、甘草组、当归组、赤芍组,每组6只。中波紫外线照射建立黄褐斑模型,甘草组、当归组、赤芍组分别接受0.3 mg/kg甘草、当归、赤芍药液灌胃,对照组、模型组接受等体积生理盐水灌胃,持续4周。切取豚鼠背部造模处皮肤,测定黑色素含量,HE、Fontana-Masson染色观察皮肤组织形态,Western blot、免疫组化检测MITF、PI3K/AKT信号通路相关分子水平。结果 与各0μg/mL组比较,甘草、当归、赤芍1000μg/mL组细胞活力、酪氨酸酶活性、黑色素含量均...