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目的改良毕赤酵母发酵条件,提高人源多肽抗生素LL-37表达量。方法用无油气体压缩机供氧,电脑输液泵控速给养料的方法,对毕赤酵母发酵进行改良。结果改良方法提高了毕赤酵母表达量约1.65倍。结论无油气体压缩机对发酵中氧气的供给、电脑输液泵控速给养料的改良方法,提高了LL-37的表达量。 相似文献
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倪晓蓉 《中国交通医学杂志》1997,11(1):4-4
<正>肝纤维化是肝硬化的早期阶段。目前,临床上对肝纤维化或肝硬化的确诊仍以肝穿活检为主,如何寻找一种非损伤性诊断途径是近年来肝病研究的热点。近年对一种新的基底膜胶原成分一血清Ⅳ型胶原(CⅣ)引起人们的关注。CⅣ测定可灵敏地反映肝硬化程度。本文旨在对CⅣ在肝纤维化中的诊断价值作一探讨,并与国内外公认的肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)进行比较。 1.材料和方法 病例:肝病组,肝硬化(LC)26例,代偿性7例,失代偿性19例,平均年龄42.8±21.4岁;慢性活动性肝炎(CAH)33例,平均年龄32.7±13.9岁;慢性迁延性肝炎(CPH)27例,平均年龄35.8±20.9岁;急性黄疸型肝炎(AH)49例,平均年龄30.8±17.4岁,其中部分病例经病理学证实,诊断符合1990年上海肝炎会议修改的诊断标准,正常对照组(NC)无肝炎史,体检合格者30例。 相似文献
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本文对 81例乙肝患者的PCR产物分别采用微孔板杂交和凝胶电泳进行检测 ,同时对微孔板杂交在HBVDNA定量方面的价值进行论证。结果 :微孔板杂交和凝胶电泳的阳性率分别为 70 .4% (5 7/ 81)、5 1.8% (42 / 81) ;PCR产物与微孔板杂交后光密度 (OD)呈正相关 ,血清HBVDNA量与OD值不呈线性关系。提示 :聚合酶链反应产物微孔板杂交技术可替代凝胶电泳 ,但不可以用于血清HBVDNA定量检测 相似文献
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目的探讨肝硬化腹水并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)的危险因素。方法选择40例肝硬化腹水并发SBP和28例未并发SBP的肝硬化腹水患者作为研究对象,采取回顾性研究的方法对相关临床资料进行分析。结果肝硬化腹水并发SBP者在并发休克、肝肾综合征、原发性肝癌、上消化道出血以及年龄区间、多次住院、既往是否发生腹水等方面与不合并SBP患者差异具有统计学意义(P均〈0.05);两组患者的外周血TBil、ALB、PT、CR、UA以及血钠表达水平差异具有统计学意义(P均〈0.05)。患者年龄、TBil、ALB、PT、血钠和CR作为可作为单因素预测肝硬化腹水并发SBP发生(P均〈0.05)。多因素Logistic回归分析结果发现,TBil、ALB以及是否合并原发性肝癌两组间差异具有统计学意义(P均〈0.05)。结论高胆红素血症、低蛋白血症以及合并原发性肝癌为肝硬化腹水患者并发SBP的危险因素,对这类患者应及时预防性使用抗菌药物。 相似文献
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目的了解南通地区乙型肝炎病人中低水平血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人群分布及其相关乙肝病毒血清标志物(HBVM)模式特征.方法采用微粒子酶免疫分析技术(microparticle en-zyme immunoassay,MEIA)对668例乙肝患者进行HBVM定量测定同时采用PCR-ELISA方法进行HBV-DNA定量测定.结果南通地区HBV感染者中部分血清HBsAg呈低水平存在(5.5%),HBVM模式以HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)为主,其次为HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+).在668例中有4例HBsAg单独阳性,含量均小于1ng/ml.结论南通地区作为肝炎高发地区,低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg的检测灵敏度有重要意义. 相似文献
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目的:探讨5'-非转录区(5'-UTR)序列改建对毕赤酵母表达外源蛋白LL-37的影响.方法:去除毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9 5'-UTR内GGATCCAA序列,转化E.coli DH5α,构建改良的毕赤酵母分泌表达载体pPIC9-EDIT;PCR鉴定及测序确认后与酵母偏爱密码子编码的LL-37基因片段连接,构建改良的重组表达载体pPIC9-EDIT-LL-37;原生质球法转化毕赤酵母GS115,PCR扩增鉴定后诱导LL-37表达,筛选最佳表达条件,对表达产物进行凝胶电泳和Western印迹分析;比较转入pPIC9-EDIT-LL-37及pPIC9-LL-37后毕赤酵母表达产物的抑菌活性,间接测定改建前后LL-37蛋白表达量的变化.结果:PCR鉴定及测序证实pPIC9-EDIT改建成功,成功构建重组载体pPIC9-EDIT-LL-37;转化毕赤酵母后表达产物PCR鉴定出LL-37基因,最佳诱导甲醇浓度为0.5%,最佳诱导表达时间为72 h,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37;改建后LL-37蛋白表达量提高了约35倍.结论:pPIC9 5'-UTR序列的改建能明显提高毕赤酵母表达LL-37蛋白,值得进一步研究以应用于其他外源蛋白表达. 相似文献
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目的:构建人源抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,将其转化毕赤酵母GS115,诱导LL-37表达.方法:根据抗菌肽LL-37氨基酸序列及毕赤酵母偏爱密码子,应用互补延伸PCR技术扩增抗菌肽LL-37基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化E.coli DH5α,构建重组分泌型酵母表达载体pPIC9-LL-37,PCR鉴定并测序;原生质球法转化毕赤酵母GS115,PCR扩增鉴定;甲醇诱导LL-37表达,筛选最高表达株,检测表达产物对大肠杆菌的抑菌活性,并对其进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹分析.结果: pPIC9-LL-37载体构建成功;转化毕赤酵母后PCR鉴定出LL-37基因;0.5%甲醇能诱导LL-37高表达,筛选出最高表达株,发酵上清约含LL-37 0.5 μg/ml,对E.coli具有较强的抑菌活性,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37.结论:成功构建pPIC9-LL-37载体,转化毕赤酵母后,经甲醇诱导能高表达分泌LL-37,表达的LL-37蛋白具有较强的抑菌活性. 相似文献
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倪晓蓉 《上海医学检验杂志》1997,12(1):26-26
据报道血清IV型胶原(CⅣ)测定可灵敏地反映肝硬化程度.本文对肝病患者进行了CⅣ测定,并与肝纤维化的另两种标志物Ⅱ型前胶原(PCⅢ)和透明质酸(HA)进行了比较。一、检测对象1.肝硬化(LC)26例,代偿性7例,失代偿性19例,平均42.8±21.4岁;2慢性活动性肝炎(CAH)33例,平均32.7±13.9岁13.慢性迁延性肝炎(CPH)27例,平均358±20.9岁;4急性黄疽型肝炎(AH)49例,平均30.8±17.4岁.以上诊断按1990年上海肝炎会议修改的诊断标准。5正常对照组(NC)30例,体格检查健康合格者,无肝炎史.二、检测方法CN采用上… 相似文献
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目的 了解南通地区乙型肝炎病人中低水平血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人群分布及其相关乙肝病毒血清标志物(HBVM)模式特征。方法 采用微粒子酶免疫分析技术(microparticle en-zyme immunoassay,MEIA)对668例乙肝患者进行HBVM定量测定同时采用PCR—ELISA方法进行HBV-DNA定量测定。结果 南通地区HBV感染者中部分血清HBsAg呈低水平存在(5.5%),HBVM模式以HBsAg( )、抗HBe( )、抗HBc( )为主,其次为HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( )。在668例中有4例HBsAg单独阳性,含量均小于1ng/ml。结论 南通地区作为肝炎高发地区,低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg的检测灵敏度有重要意义。 相似文献
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