自噬在张力诱导终板软骨细胞退变过程中的变化

 目的 探讨自噬在张力诱导终板软骨细胞退变过程中的变化及作用。方法 取10只清洁级SD大鼠腰椎终板软骨进行细胞培养。对P1代终板软骨细胞分别加载间歇循环张力（10%伸长率,0.5 Hz）0 h、3 h、12 h、24 h、48 h。以倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,实时PCR与蛋白印迹法检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、转录因子SOX-9及蛋白多糖转录因子、Beclin-1和LC3基因表达的变化,以单丹磺酰戊二胺染色观察自噬小体。MTT（3-2,5-二苯基四氮唑溴盐染色）法检测3-甲基腺嘌呤（自噬抑制剂）刺激前后的细胞存活率。结果 间歇循环张力诱导后0 h组与3 h组为正常终板软骨细胞形态,呈多角形;12 h组略呈不规则形;24 h组和48 h组呈梭形改变。实时PCR显示24 h组和48 h组中Ⅱ型胶原、转录因子SOX-9及蛋白多糖的表达量降低;自噬相关基因LC3和Beclin-1表达量呈时间依赖性增加。单丹磺酰戊二胺染色显示24 h组和48 h组自噬发生率呈时间依赖性增加。MTT结果显示细胞存活率呈降低趋势;添加3-甲基腺嘌呤刺激后细胞活性减弱、存活率降低。结论 间歇循环张力刺激下终板软骨细胞表型逐渐丧失;自噬相关基因LC3与Beclin-1表达明显上调,但细胞活性降低;抑制自噬水平可降低细胞存活率,提示自噬参与了间歇循环张力诱导的终板软骨细胞退变过程。     

短时间机械循环压力对3D培养脊柱终板软骨细胞的影响

目的:探究短时间的机械循环压力对终板软骨细胞的影响,并探讨其机制。方法:大鼠终板软骨细胞的分离制备大鼠终板软骨细胞琼脂糖模板进行培养,然后通过FX-5000T对大鼠终板软骨细胞琼脂糖模板加载短时间的机械循环压力。通过活死染色对细胞进行活死分析,通过RT-PCR和Western blotting检测ANK基因表达。通过RT-PCR和ELISA检测TGF-β1的表达。结果:大鼠终板软骨细胞加载短时间的机械循环压力后ANK基因和TGF-β1表达量增加,加载短时间的机械循环压力的实验组跟实验对照组活死染色没有显著改变。结论:短时间的压力刺激下终板软骨ANK基因和TGF-β1表达量上调抑制终板软骨的退变,短时间的压力刺激并不影响终板软件细胞的活死。这个实验结果可能在椎间盘退变的防治中提供一种新的方法。     

补气活血通络汤联合低分子肝素对气虚血瘀型老年髋部骨折患者血栓前状态的疗效观察

目的 观察补气活血通络汤联合低分子肝素对气虚血瘀型老年髋部骨折患者血栓前状态的疗效及其安全性.方法 收集2018年8月至2019年8月在我科住院治疗的气虚血瘀型老年髋部骨折患者共60例,随机分为对照组和治疗1组、治疗2组各20例,对照组给予常规剂量低分子肝素治疗,治疗1组给予补气活血通络汤联合常规剂量低分子肝素治疗,治...     

力学刺激对软骨细胞影响研究进展

软骨细胞作为软骨内唯一的细胞类型,对软骨正常功能及形态维持具有重要作用,软骨缺损的修复也依赖于软骨细胞的增殖和分化.研究证明,力学刺激参与软骨细胞增殖、分化、迁移及凋亡等过程,并在维持软骨细胞功能和形态结构完整性方面起着至关重要的作用.研究表明,软骨细胞主要受来自周围的牵张力和压力作用,大量体外培养模型研究中不同类型力学刺激及不同强度、频率、作用时间和作用方式的力学刺激对软骨细胞损伤修复的作用各有不同.该文重点就不同类型力学刺激对体外培养的软骨细胞的影响作一综述.     

活血接骨方对骨髓间充质干细胞成骨分化中Wnt信号通路及Sclerostin基因的影响作者

目的 探究活血接骨方对骨髓间充质干细胞成骨分化中Wnt信号通路及Sclerostin基因的影响。方法 使用“续骨活血汤”含药血清和（或）BMP-4干预BMSCs并分为4组：对照组、中药组、BMP-4组和中药+BMP-4组。通过检测线粒体脱氢酶活性（CCK-8）及细胞DNA含量反应BMSCs细胞活性。采用ALP染色和茜素红染色检测成骨诱导28天后各组细胞ALP活性和矿化情况；采用荧光定量PCR和Western Blot法检测各组细胞中成骨相关基因（Col1A2、OC、OPN）和Sclerostin基因表达情况。使用（低浓度、中浓度、高浓度）活血接骨方含药血清体外干预BMSCs 7天后检测Sclerostin基因及Wnt信号通路相关分子（Wnt5a、GSK-3β）的表达情况。结果 与对照组相比，其他3组BMSCs出现明显矿化，且BMP-4组矿化程度高于中药组，而中药+BMP-4组矿化程度最高（P < 0.05）；成骨相关因子Col1A2、OC、OPN也呈现相同趋势的表达上调（P < 0.05），但Sclerostin基因呈现明显表达下调（P < 0.05）。与空白对照组相比，各浓度含药血清组BMSCs中Wnt5a的表达呈现浓度依赖性上调（P < 0.05），而Sclerostin、GSK-3β和P-GSK-3β的表达则呈现浓度依赖性下调（P < 0.05）。结论 活血接骨方具有促进BMSCs体外成骨分化作用，其机制可能与抑制Sclerostin基因表达，激活Wnt信号通路相关。     

老年性髋部骨折后静脉血栓形成的相关性凝血指标及其诊断价值

目的:探索与老年性髋部骨折后静脉血栓形成具有相关性的凝血指标,并评估其诊断价值。方法:选取2016年7月至2019年7月在本科住院治疗的老年性髋部骨折患者80例,所有患者均采用彩色多普勒超声检查明确静脉血栓形成情况,其中静脉血栓形成者23例,无静脉血栓形成者57例。建立二元Logistics回归方程对凝血指标与静脉血栓形成进行相关性分析,对相关性指标作ROC曲线,分析其诊断效能。结果:血栓组与非血栓组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05);二元Logistics回归方程结果显示,在凝血指标中FDP和D-D与老年性髋部骨折后静脉血栓形成具有相关性(P<0.05);ROC曲线分析显示,FDP及D-D曲线下面积分别为0.82和0.89,FDP诊断临界值为22.47μg/mL,敏感度为78.3%,特异度为66.7%;D-D诊断临界值为7.59mg/L,敏感度为95.7%,特异度为71.9%。结论:FDP及D-D是诊断老年性髋部骨折后静脉血栓形成的敏感指标,可作为老年髋部骨折后静脉血栓形成的早期预警及观察疗效的敏感指标。     

补气活血通络汤对老年髋部骨折血栓前状态的影响

目的 观察补气活血通络汤对气虚血瘀型老年髋部骨折围术期血栓前状态的影响.方法 选取气虚血瘀型老年髋部骨折患者共40例,随机分为对照组和中药组,每组20例,患者均给予基本预防措施和机械预防措施,对照组给予低分子肝素钙皮下注射治疗,中药组给予补气活血通络汤口服治疗,分别于入院后1d、术前1d、术后1w检测血栓前状态指标〔纤...     

刘氏正骨方对BMSCs成骨分化中Wnt信号通路及Sclerostin基因的影响

目的探究刘氏正骨方对骨髓间充质干细胞成骨分化中Wnt信号通路的影响。方法使用刘氏正骨方含药血清或BMP-2对骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行28 d成骨诱导后,检测BMSCs的细胞活性、ALP活性及细胞矿化情况;采用RT-PCR和Western blotting法检测细胞中Col 1A2、OCN、OPN和Sclerostin基因表达情况。使用含2.5%、5%、10%中药血清对BMSCs进行14 d体外干预,检测Wnt信号通路关键因子LRP5、Sclerostin及成骨关键转录因子Runx2的表达情况。结果1)中药组和BMP-2组中BMSCs中ALP活性及细胞矿化现象明显强于对照组,且中药组明显高于BMP-2组(P<0.05);Col1A2、OCN、OPN的表达也呈现相同趋势改变(P<0.05),但Sclerostin基因呈现明显表达下调(P<0.05)。2)高浓度中药血清可上调LRP5和Runx2表达(P<0.05),下调Sclerostin基因表达(P<0.05)。结论刘氏正骨方可以促进BMSCs体外成骨分化,其作用机制可能与下调Sclerostin基因表达、激活Wnt信号通路有关。     

中药外敷法治疗桡骨远端骨折的研究进展

桡骨远端骨折(DRF)是急诊常见的骨科疾病，易发于老年群体，且发病率呈逐年上升趋势，值得重视。老年群体手术风险较高，而中药外敷法是治疗DRF的常用中医特色非手术疗法，可明显改善临床症状，且对老年患者的长期结果与手术疗法相同。中药外敷法操作简便快捷、不良反应少，在临床治疗DRF发挥着越来越重要的作用。基于此，文章从历史探索、作用机制、疗效及常用中药分析、赋形剂对疗效的影响等方面对中药外敷法治疗DRF的研究进行归纳总结及展望，以期为中药外敷法治疗DRF的临床研究提供新思路。     

中药注射对比玻璃酸钠注射治疗膝关节炎的Meta分析

目的 系统评价中药注射液关节腔注射对比玻璃酸钠关节腔注射治疗膝关节炎有效性。方法 计算机检索知网、万方、维普、The Cochrane Library、PubMed等数据库系统中，对主题、篇名、文章摘要、关键词等部分，按Cochrane协作网推荐的简单评价办法，由2名评定员独立评价并交叉核对纳入研究工作的质量。同时，对同质调查结果使用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果 经遴选，最终选入了12篇RCTs,共818例膝关节炎患者(治疗组417例，对照组401例)。治疗组：中药注射液关节腔注射(鹿瓜多肽注射液，参麦注射液，正清风痛宁注射液);对照组：玻璃酸钠注射液、关节腔注射。经Meta分析，治疗组患者临床有效率高于对照组。中药注射液与玻璃酸钠注射液比较，两者对治疗膝关节炎的有效率差异具有统计学意义。结论 以中药注射液关节腔注射治疗膝关节炎临床上的效果优于玻璃酸钠关节腔注入。然而此研究纳入论文的质量及规模均受限，故仍需要更多更长时间随访且高效的RCTs试验结果来证明。