莱菔硫烷抑制鼻咽癌细胞CNE-2中MMP-9的活性和NF-κB的激活

目的探讨莱菔硫烷（sulforaphane,SFN）对鼻咽癌细胞CNE-2细胞基质金属蛋白酶-9（matrix metallo-proteinase,MMP-9）的活性及对核转录因子κB（nuclear factorκB,NF-κB）激活的影响。方法体外培养CNE-2细胞,用SFN预处理后,四氮唑盐酶还原法检测细胞的增殖情况,以及LDH的漏出率;明胶酶谱实验和实时逆转录PCR检测MMP-9的酶活性和mRNA表达水平;Western blot检测NF-κB p65亚基的转位情况。结果 0、20、40、50μMSFN处理24~72h后,均能抑制CNE-2的生长,LHD漏出率实验显示SFN对细胞无明显的毒性;SFN能明显抑制MMP-9的活性和mRNA的表达水平,同时能抑制细胞核内p65的水平。结论 SFN对CNE-2细胞生长以及MMP-9的活性具有抑制作用,它可能通过抑制NF-κB激活,从而发挥抗肿瘤作用。     

塞来昔布和洛伐他汀对鼻咽癌细胞Caveolin-1的表达及下游信号通路的影响

目的探讨塞来昔布和洛伐他汀对鼻咽癌细胞Caveolin-1表达及下游信号分子的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞CNE-2,经塞来昔布和洛伐他汀处理后,MTT检测其增殖情况。随后用IC50浓度的塞来昔布和洛伐他汀与CNE-2细胞孵育,Western blot检测Caveolin-1的表达以及Akt、ERK1/2和STAT3的磷酸化情况。结果 CNE-2细胞经洛伐他汀和塞来昔布处理24h后,IC50值分别为20μM和40μM;塞来昔布或洛伐他汀单独处理CNE-2细胞24h,能轻微下调Caveolin-1的表达,当两者联合使用时,能使Caveolin-1水平进一步降低,24h后几乎完全抑制Caveolin-1的表达;洛伐他汀、塞来昔布能抑制血管内皮生长因子诱导的Akt、ERK1/2和STAT3磷酸化,当两者共同处理CNE-2细胞时,能进一步抑制其磷酸化水平。结论塞来昔布能协同洛伐他汀下调鼻咽癌细胞Caveolin-1的表达,从而可能影响下游信号分子的激活。     

加味玉屏风汤治疗变应性鼻炎的临床研究

<正>变应性鼻炎(AR)是耳鼻咽喉科的常见病之一,近年来发病率有逐年上升的趋势。2006年1月至2010年6月,我科采用加味玉屏风汤口服治疗变应性鼻炎55例,取得了较好的疗效,现报告如下。1资料与方法1.1临床资料:①入选标准:参照中华耳鼻咽喉头颈外科     

EGCG协同塞来昔布抑制鼻咽癌细胞增殖和下调COX-2表达

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是否具有协同塞来昔布抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖及下调环氧化酶-2（COX-2）表达。方法体外培养CNE-2细胞,与EGCG或（和）塞来昔布孵育24~72 h,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期,Western blot检测COX-2的表达。结果 EGCG对塞来昔布抑制CNE-2细胞增殖具有协同作用,能协同增加G0~G1期细胞比例、降低S、G2~M期细胞数,促进细胞凋亡,且能协同协调COX-2的表达。结论 EGCG对COX-2抑制剂的协同效应可做为鼻咽癌化疗潜在的辅助用药。     

塞来昔布对喉癌Hep-2细胞COX-2和Caspase-3表达的影响

目的:探讨塞来昔布对喉癌细胞株Hep-2生长抑制及对环氧化酶-2(COX-2)和Caspase-3变化的影响。方法:将不同浓度塞来昔布作用于体外培养的人喉癌细胞株Hep-2,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测COX-2表达,分光光度法检测Caspase-3活性。结果:塞来昔布呈剂量依赖性显著抑制Hep-2细胞生长,阻滞细胞G0/G1期转化,且可明显降低COX-2蛋白水平,增加Caspase-3活性。结论:塞来昔布能抑制喉癌细胞的生长,其机制可能与下调COX-2表达、增强Caspase-3活性有关。     

莱菔硫烷对鼻咽癌RASSF1A基因甲基化及表达的影响

目的探讨莱菔硫烷（SFN）对鼻咽癌CNE-2细胞RASSF1A甲基化及蛋白表达水平的影响。方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,用0,5、10、30μM的SFN与其孵育24～96h,用MTT法检测细胞的增值情况;流式细胞术分析细胞周期的改变;采用甲基化特异性PCR检测RASSF1A基因启动子区域的甲基化改变情况;提取SFN处理后细胞的RNA,用逆转录PCR检测RASSF1A的表达水平,并用Western blot检测处理前后RASSF1A蛋白的表达。结果 SFN能以时间和剂量依赖性方式抑制CNE-2细胞增值,并能使细胞周期阻滞于S期和G2/M期。随着SNF浓度的增加,甲基化RASSF1A水平逐渐减弱,非甲基化RASSF1A水平逐渐增多。同时SFN能明显上调RASSF1A的mRNA和蛋白表达水平。结论 SFN能使RASSF1A基因去甲基化,并上调非甲基化基因的表达水平,从而抑制细胞的增值和分化而具有抗肿瘤的效应。     

辛芩颗粒联合氯雷他定治疗变应性鼻炎疗效观察

目的观察辛芩颗粒联合氯雷他定治疗变应性鼻炎的疗效。方法 101例变应性鼻炎患者,随机分为3组,治疗组35例予辛芩颗粒联合氯雷他定口服,对照A组32例给予氯雷他定口服,对照B组34例给予辛芩颗粒口服,疗程均为30 d。分别于疗程结束后第1天、第30天进行疗效评价。结果停药后第1天,治疗组总有效率94%,对照A组88%,对照B组85%,治疗组总有效率与其他组比较无显著性差异(P均>0.05);停药后第30天,治疗组症状改善总有效率91%,对照A组72%,对照B组68%,治疗组总有效率与其他组比较有显著性差异(P均<0.05)。结论辛芩颗粒联合氯雷他定对变化性鼻炎具有较好的临床疗效,临床上值得推广。     

亚砷酸对人喉癌Hep-2细胞RECK基因表达及去甲基化的影响

目的:探讨不同浓度亚砷酸对人喉癌Hep-2细胞中伴Kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)基因表达及去甲基化的影响。方法:分别将0.5、1.0、2.0、4.0μmoL/L的亚砷酸作用于体外培养的Hep-2细胞24～72 h,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期,并用甲基特异性PCR检测RECK基因甲基化情况。RT-PCR和W estern b lot分别检测RECK mRNA和蛋白表达水平。结果:0.5～4.0μmoL/L亚砷酸能抑制Hep-2细胞增殖,使Hep-2细胞阻滞于S期和G2/M期;RECK基因甲基化水平随亚砷酸浓度增高而降低,非甲基化水平则逐渐增高;亚砷酸能增加RECK mRNA和蛋白表达。结论:亚砷酸能促进Hep-2细胞中RECK基因去甲基化并提高其表达水平,从而发挥抑制细胞增殖。     

EGCG增强人鼻咽癌细胞对化疗药物的敏感性分析

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对鼻咽癌细胞耐药的逆转作用。方法采用浓度梯度诱导建立对紫杉醇（TAX）耐药的鼻咽癌（KB）细胞株,SRB法测定其对TAX的敏感性;Western blot检测P-糖蛋白（P-gp）的表达情况。随后用1μmol/L EGCG与TAX以及耐药性KB细胞共同孵育,检测P-gp的表达情况以及耐药指数（RI）。结果建立的耐药细胞株对TAX的RI为62.2,P-gp表达水平明显高于对照组（P〈0.05）。EGCG、TAX与耐药性KB细胞共同孵育后,RI指数降至40.5,且P-gp蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）。结论 EGCG能逆转耐药细胞对TAX的耐药性,其机制可能与P-gp表达下调有关。