疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体制备及鉴定

目的制备抗疣鼻栖鸭恒定链(MDIi)多克隆抗体,鉴定其与组织抗原MDIi的反应性。方法以PCR扩增获得MDIi序列构建原核表达载体pET-32a/MDIi,转化大肠杆菌进行表达;对表达产物鉴定后,免疫小鼠制备抗MDIi多克隆抗体;间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,间接ELISA检测抗体与疣鼻栖鸭组织MDIi的反应强度。结果成功构建了pET-32a/MDIi原核表达载体,诱导表达了相对分子质量(Mr)约40 000的包涵体形式的MDIi重组蛋白,免疫小鼠获得效价为1∶128 000的特异性多克隆抗体,抗体与疣鼻栖鸭组织中的MDIi反应滴度为1∶32 000。结论成功制备了高效价的特异性抗MDIi多克隆抗体,抗体与组织抗原有较强的免疫反应性。     

高效毛细管电泳法测定延黄烧伤膏中盐酸小檗碱的含量

目的建立延黄烧伤膏中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用高效毛细管电泳法,用熔融石英毛细管柱64.5cm×50μm,有效长度56cm;缓冲溶液为0.02mol·L^-1磷酸缓冲溶液pH7.0-甲醇（80∶20）,分离电压为20kV,毛细管柱温25℃,UV检测波长254nm。结果盐酸小檗碱进样浓度30.4～152g.mL^-1线性关系良好（r=0.9996）,平均加样回收率为98.45%（n=6）,RSD为1.4%。结论该方法灵敏、快速、准确,结果可靠,可用于延黄烧伤膏中盐酸小檗碱的含量测定。     

药用真菌葡聚糖免疫调节作用的研究进展

药用真菌含有多种对人体有益的生理活性物质,具有多种药用功能,其中真菌多糖所具有的免疫调节作用倍受关注。该文在阐述真菌多糖分子结构与生物学活性关系的基础上,主要综述了葡聚糖在免疫调节中的作用机制及药用真菌多糖的免疫调节功能。     

一种新型的免疫载体—MHCⅡ类分子的恒定链

MHCⅡ类分子的α、β链在内质网中与γ链聚合,形成九聚体(αβγ)3.不同于α、β链的多态性,γ链呈非多态性,故称为恒定链(Invariant chain,Ii).Ii链属Ⅱ型跨膜糖蛋白,存在于T、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞和肿瘤细胞表面,白细胞分化抗原编号为CD74[1-6].     

rhIL—2调节离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了ｒＨＩＬ－２调节离体奶牛外周血单核细胞（ｂｏＰＢＭＣ）免疫应答的特点。ｒｈＩＬ－２能诱导细胞持续性增殖和分泌Ｉｇ，尤其是分泌ＩｇＡ和ＩｇＧ２（与ＰＷＭ相比，Ｐ〈０．０１）；还能增强ＰＷＭ诱导的Ｉｇ的分泌，但不改变ＳＥＢ抑制Ｉｇ分泌的作用。细胞表型也表明，ｒｈＩｌ－２对ＰＷＭ或ＳＥＢ诱导的ｂｏＰＢＭＣｋ中ＣＤ４或ＣＤ８细胞增殖作用无选择性。     

用噬菌体肽库筛选IBDV单克隆抗体的模拟表位

目的:筛选法氏囊病毒(IBDV)单克隆抗体所针对的模拟抗原表位。方法:以纯化的3株IBDV单克隆抗体为靶分子用噬菌体12肽库筛选相应抗原模拟表位;应用间接和竞争ELISA鉴定所筛选的阳性样品;最后对与抗体高亲和结合的噬菌体进行测序分析。结果:经过四轮淘洗,随机挑取30个克隆经间接ELISA鉴定,发现其中22个克隆结合活性较高。进一步应用竞争ELISA,获得14个噬菌体克隆,其抑制率高达50%以上。对这些噬菌体进行DNA测序,并分析比对了IBDV相应序列,确定了3个抗原模拟表位。结论:通过噬菌体随机肽库成功筛选出3个IBDV模拟表位,为进一步研究IBDV抗原性质奠定了基础。     

2008—2013年大同市手足口病流行病学分析

目的了解大同市近年来手足口病的流行特征,为本市做好手足口病的预防控制工作提供依据。方法采用Excel 2003软件,按发病年龄统计,以发病率、构成比、性别、年龄等指标对手足口病资料运用描述性研究方法进行分析,率的比较采用χ2检验。结果大同市从2008—2013年共报告手足口病14 533例,年均发病率为75.19/10万;2008—2013年手足口病发病出现两个高峰,2008年和2011年,发病率分别为174.56/10万和63.62/10万,3年为一个流行周期;发病以5岁以下儿童为主,占总病例数的82.35%;男性发病率(88.59/10万)显著高于女性(61.22/10万),男女发病率差异有统计学意义(χ2=1.45,P0.05);5—7月份手足口病的病例数占全年病例数的65.14%,为手足口病高发季节;大同市2010—2013年4年病原学监测显示,EV71、CVA16、其他肠道病毒总的构成比分别为35.14%、46.39%和17.87%,每年流行的优势菌株不同。结论手足口病的发生存在明显的年龄、性别、季节差异,在流行高峰来临之前,针对重点人群采取针对性的防治结合措施是控制疫情、降低重症病例和死亡病例的关键。     

rhIL－2调节离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用

应用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了ｒＨＩＬ－２调节离体奶牛外周血单核细胞（ｂｏＰＢＭＣ）免疫应答的特点。ｒｈＩＬ－２能诱导细胞持续性增殖和分泌Ｉｇ，尤其是分泌ＩｇＡ和ＩｇＧ＿２（与ＰＷＭ相比，Ｐ＜０．０１）；还能增强ＰＷＭ诱导的Ｉｇ分泌，但不改变ＳＥＢ抑制Ｉｇ分泌的作用。细胞表型也表明，ｒｈＩＬ－２对ＰＷＭ或ＳＥＢ诱导的ｂｏＰＢＭＣ中ＣＤ４￣＋或ＣＤ８￣＋细胞增殖作用无选择性。     

鸡Ⅰ类抗原递呈分子亚单位与恒定链的细胞定位及相互关系研究

目的:研究鸡Ⅰ类抗原递呈分子亚单位和鸡恒定链的细胞定位及相互关系。方法:RT-PCR获得鸡MHCⅠ类分子α、β2m亚单位,并进一步构建了能表达红色和绿色荧光蛋白的α、β2m亚单位的真核表达载体,利用脂质体介导法与能表达增强型绿色荧光的Ii真核表达载体共转染COS-7细胞,荧光显微镜检测Ii与MHCⅠ亚单位的细胞定位,并通过免疫共沉淀进一步研究它们之间的相互关系。结果:GFP-Ii与MHCⅠα-RFP、MHCⅠβ2m-RFP在细胞中共表达后出现共定位现象,且共定位于细胞的内膜系统;免疫共沉淀结果显示,只有当GFP-Ii链与MHCⅠα-GFP、MHCⅠβ2m-GFP三者共转染后,才可以检测到MHCⅠα-GFP、MHCⅠβ2m-GFP的表达。结论:鸡Ii与单个的MHCⅠα、MHCⅠβ2m亚单位不能有效结合,Ii只有与完整的Ⅰ类抗原递呈分子才能够形成复合体,且共定位于细胞的内膜系统。     

薄膜过滤法在药品检验中的应用探讨

本文以薄膜过滤法为对象,分别从药品无菌检查、药品微生物限度检查、药品微生物验证实验等方面,探讨此方法的实际应用,望能为此领域研究有所借鉴。