胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过G→A突变抑制乙型肝炎病毒的复制

目的研究胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G(A3G)对HBV复制的影响及作用机制。方法利用脂质体介导A3G和HBV的真核表达质粒瞬时共转染人肝癌细胞株HepG2,以空载体pcDNA3.1与HBV真核表达质粒共转染为对照,同时转染含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的质粒载体以判定转染效率。共转染两天后用荧光定量PCR方法定量细胞内核壳体(core)相关HBV DNA水平,用Western blot检测细胞内A3G和HBcAg的表达,并对细胞内core相关HBV DNA X基因进行PCR扩增、T-A克隆和测序,分析X基因中的碱基突变。结果经EGFP判定的转染效率平均为29%。共转染0.5μgA3G和0.5μgHBV的HepG2细胞内core相关HBV DNA量平均下降为对照的8.9%,共转染2μgA3G和0.5μgHBV的平均下降为对照的0.6%。共转染A3G和HBV表达质粒后,HepG2细胞内HBV的X基因中发生G→A突变的数目明显增多,33个克隆中有9个克隆检测到了16～37个G→A突变,突变总数达254个,而对照的33个克隆中仅有2个克隆各检测到2个G→A突变。进一步的分析发现,共转染A3G后发生的G→A突变大多集中于几个热点区域,突变靶点常在GG二核苷酸中的第一个G上。结论胞嘧啶脱氨酶APOBEC3G可能通过诱导。HBV DNA的X基因发生G→A超突变,抑制HBV在人肝癌细胞HepG2中的复制。     

小檗胺诱导白血病细胞株NB4细胞凋亡及其机制的研究

目的：探讨小檗胺对白血病细胞系NB4生长的影响及其机制。方法：体外培养人白血病细胞株NB4细胞，经不同浓度小檗胺处理不同时间后，MTT法检测药物对NB4细胞的抑制作用；细胞形态学观察和DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡；流式细胞仪检测DNA含量及细胞周期；巢式PCR及RT-PCR检测PML／RARα融合基因及Survivin基因表达及流式细胞仪检测Caspase3阳性表达率。结果：经不同浓度小檗胺处理不同时间后，NB4细胞生长出现明显的抑制，并呈现明显的时间剂量依赖性，48h IC50为3．860μg／ml；细胞形态学观察可见细胞凋亡现象，DNA琼脂糖电泳显示典型的凋亡梯形图；流式细胞仪检测发现细胞凋亡率明显增加，经48h作用后，凋亡率从2．83％增至12μg／ml时的58．44％；虽未发现药物作用后PML／RARα基因表达量的改变，但检测到NB4细胞经药物作用后Survivin基因表达量的减少和Caspase3表达的增加，Caspase3阳性率从对照组的2．06％增至12μg／ml时的70．89％。经相关性分析，随着细胞Survivin表达水平的下降和Caspase3表达水平的增高，NB4细胞凋亡率相应地增高。结论：小檗胺对NB4细胞有增殖抑制作用，诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用的重要机制之一，但不是通过作用于NB4细胞特异性融合基因PML／RARα发挥作用的，其抗凋亡的可能分子机制之一是抑制Survivin基因的表达和增加Caspase3的表达。     

多发性骨髓瘤骨损害的发生机理及诊断方法

多发性骨髓瘤(multiplemyeloma ,MM)是一种骨髓浆细胞异常增生的恶性肿瘤,骨损害在MM患者中十分常见,可为全身性的骨质疏松、单一骨质损害及多发的溶骨性病变,以溶骨性损害及骨质疏松发生率较高,<5 %的病例表现为骨硬化[1] 。现将MM骨损害的发生机制及早期诊断进展综述如下。　　MM骨损害的发生机制关于MM引起溶骨性损害的确切机制到目前为止尚不清楚。Mundy等对淋巴瘤细胞的研究中发现,造成MM骨损害的基本原理是由破骨细胞引起的骨吸收增加而成骨细胞新骨形成受抑制所致。在MM早期,由于在骨吸收增强的同时成骨细胞活性也随之增强,故…     

多发性骨髓瘤贫血的发病机制和治疗进展

多发性骨髓瘤 (MM)是一种骨髓浆细胞系异常增生引起的血液系统恶性肿瘤 ,其发生率约占血液系统恶性肿瘤的10 % ,其典型的临床表现有骨痛、贫血、肾功能损害和感染等[1] 。贫血的发生率在初诊患者达 70 % ,随着疾病的进展 ,几乎所有患者最终均出现贫血。和慢性病性贫血 (ACD)一样 ,MM所致贫血通常也是正细胞正色素性贫血 ,其主要原因为大量的骨髓腔被骨髓瘤细胞侵占红系生成受抑、肾功能受损、化疗引起的骨髓抑制及伴发的自身免疫性溶血、出血等 ,目前认为白细胞介素 6 (IL 6 )、IL 1、肿瘤坏死因子(TNF)等细胞因子产生过多引起的红细…