浅谈提高实验诊断学教学质量的体会

实验诊断学是研究临床基本技能的一门学科,是从基础向临床过渡的一门桥梁课程,也是医学生学习临床专业和今后从事临床工作的基础及培养检验医师的关键环节。如何学好实验诊断学不仅是检验医学学生的重要内容,而且也是临床医学学生所面临的挑战。因此,我们应通过加强理论与实践相结合的方法,增强学生的实际工作能力及对检测结果的分析能力,提高实验诊断学教学的质量来帮助学生学好实验诊断学。1重视基本的实验技能训练实验操作是属于医学基本技能之一,学好基本技能可使检验医师及临床医师终生受益,掌握正确规范的基本操作很重要。但由于临床资源不足等客观原因,安排真正动手的实验课学时数少,大部分实验课是以示教为主,理论知识讲得多,实践体检少,导致学生动手能力差,不能把课本上的理论知识运用于实验操作之中。此外,有些带教老师不重视实验课,影响了学生对实验课积极性,没有培养好学生的正确基本功。因此,要求我们带教老师自身要有过硬的基本技能,真正做到言传身教,带好每一位学生,提高他们学习的积极性,培养他们过硬的实验技能本领。2加强与临床实践的联系实验诊断学是一门实践性较强的课程,实习课的临床实践非常重要,应增加学生实验操作学时,与多个附属医院检验科联系,让...     

microRNA-10调控PTEN基因在促进胰腺癌细胞增殖和迁移的作用

目的：研究胰腺癌患者血浆和癌组织中microRNA(miRNA)-10和张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达,并探讨两者在胰腺癌中的调控关系;研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞中的表达及其对PANC-1细胞增殖和迁移的影响。方法：选择80例胰腺癌患者为研究组及80例健康体检者为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测胰腺癌患者血浆中miRNA-10和PTEN基因及组织中miRNA-10的表达,并分析miRNA-10和PTEN基因表达的相关性。采用四甲基偶氮唑盐法和细胞集落形成实验研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞生长和增殖能力,采用划痕实验检测细胞的迁移能力。结果：两组血浆中miRNA-10和PTEN mRNA的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-10和PTEN mRNA在胰腺癌患者血浆中表达呈线性负相关(r=-0.716,P<0.01)。miRNA-10在胰腺癌患者血浆和组织中表达呈正相关(r=0.938,P<0.01)。MTT法检测结果显示,miRNA-10细胞转染24、48、72、96 h的A值均高于对照组(P&l...     

广东粤北地区瑶族载脂蛋白E基因多态性与血脂代谢的关系

目的检测广东粤北地区瑶族人群载脂蛋白E（apoE）基因多态性并探讨其与血脂代谢的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）对750例23～80岁广东粤北地区瑶族人群进行apoE基因多态性检测,分析瑶族人群apoE基因频率分布特点,并比较分析不同apoE基因型与血脂水平的关系。结果共检测瑶族apoE6种基因型,以E3／3型最常见,占61．47％,其次E3／4型,占23．07％,E2／3、E2／4、E4／4、E2／24种基因型分别占11．87％、1．73％、1．07％、0.8％;apoE有3种等位基因,以ε3分布频率最高,为81．4％,其次是ε4,分布的频率为9．6％,ε2分布频率最低,为9．0％;男性和女性apoE基因型分布无差异;ε4等位基因携带者的TG、TC、LDL、apoB水平显著高于E2携带者和ε3携带者（P〈0．05）。结论apoE基因多态性影响广东粤北地区瑶族人群的血脂代谢,apoEε4等位基因携带者的TG、TC、TC、LDL、apoB水平较高,推测ε4等位基因可能是瑶族人群患高脂血症的危险因素之一。     

血液病患者信号转导及转录激活子5和叉头状转录因子3的表达

目的观察恶性血液病患者外周血中单个核细胞磷酸化STAT5及Foxp3的表达水平及其相关性。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者(AL)、23例慢性白血病(CL)、29例骨髓增生异常综合征(MDS)、20例重型再生障碍性贫血(SAA)及38例对照组外周血单个核细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)及Foxp3阳性细胞的百分率。结果PSTAT5表达AL组(2.29±0.79)%、CL组(2.45±0.88)%、MDS组(2.21±0.75)%都较对照组(0.54±0.15)%增高,差异具有统计学意义(P0.05),SAA组P-STAT5表达(0.43±0.17)%较对照组降低,差异无统计学意义(P0.05);Foxp3表达AL组(3.86±1.13)%、CL组(3.60±1.10)%、MDS组(4.01±1.19)%高于对照组(0.89±0.38)%,差异具有统计学意义(P0.05),SAA组Foxp3表达(0.57±0.21)%较对照组降低,差异具有统计学意义(P0.05)。AL、CL、MDS、SAA各组P-STAT5与Foxp3表达水平都呈正相关(P0.05)。结论 STAT5及Foxp3可能共同参与了AL、CL、MDS、SAA这几类恶性血液病的发生过程,同时测定可以提供有临床意义的实验依据。     

粤北地区早发冠心病与MEF2A基因11外显子的关系

目的:探讨广东粤北地区人群中肌细胞增强因子（MEF）2A基因第11外显子基因多态性与早发冠心病的关联性。方法: 应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序技术检测210例散发冠心病患者及180例对照者MEF2A基因第11外显子基因多态性,并研究它与冠心病的关系。结果: 冠心病常见的危险因素,如高血压病、糖尿病、吸烟,在冠心病组分布的频率明显高于对照组（P<0.05）,MEF2A基因11号外显子存在CAG重复序列多态性,重复序列4～11个不等,各等位基因的分布在冠心病组和对照组无明显差异,未发现21个碱基缺失的基因突变。采用Logistic回归方程分析,只有糖尿病是冠心病发病的独立危险因素（P<0.01）。结论: MEF2A基因第11外显子CAG重复序列基因多态性不是粤北地区早发冠心病的危险因素。     

原发性高血压患者血清白细胞介素-18水平与颈动脉内膜中层厚度的相关性

目的 探讨原发性高血压(EH)患者血清白细胞介素-18(IL-18)水平与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的相关性.方法 入选EH患者80例,正常对照组55例.高分辨超声测定CIMT作为大血管动脉粥样硬化(AS)程度的指标,同时检测血清IL-18水平;分析IL-18与CIMT之间的关系.结果 ①与正常对照组相比,EH组的血清IL-18水平显著增高(P＜0.01),CIMT显著增厚(P＜0.01).EH组内比较,CIMT正常亚组血清IL-18水平显著低于CIMT增厚亚组(P＜0.01).②直线相关分析显示,IL-18与CIMT呈正相关(P＜0.01).③以CIMT为因变量进行多重逐步线性回归分析,排除其他相关危险因素的干扰后,IL-18与CIMT的相关关系仍然存在(P＜0.01).④以CIMT增厚与否为因变量进行非条件Logistic逐步回归分析,筛选出IL-18为CIMT增厚的独立危险因素.结论 血清IL-18水平与EH患者CIMT具有显著相关性,此相关性独立于其他相关危险因素,是EH患者CIMT增厚的独立危险因素.提示IL-18参与了EH患者AS病理过程,且其水平的高低与AS严重程度有关,可作为早期EH患者并发AS的预测及监测指标.     

肿瘤坏死因子与甲状腺细胞凋亡及相关蛋白的检测和表达的意义

目的　探讨肿瘤坏死因子 a(TNF a)诱导Graves病甲状腺细胞凋亡与相关蛋白表达在Graves病 (GD)发病关系中的意义。方法　采用免疫组织化学S P方法检测 5 0例Graves病患者TNF a,并检测对照组对Fas表达的影响。采用原代细胞培养方法进行细胞培养 ,细胞培养液中的sFas含量采用ELISA法检测。Fas/sFasmRNA检测采用半定量RT PCR法。结果　含有TNF aGD组细胞凋亡率为 92 6 % ,显著高于对照组的凋亡率 (36 0 % ) (P <0 0 1)。其含有TNF aGD组甲状腺细胞sFas、Fas/sFasmRNA含量与对照组比较差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　TNF a诱导Graves病甲状腺细胞凋亡及凋亡相关蛋白sFas、Fas/sFasmRNA有一定水平的表达 ,这些改变可能是TNF a破坏甲状腺细胞的重要机制之一。     

肿瘤型M2-PK、APC、K-ras检测在结直肠癌诊断中的意义

目的检测结直肠癌患者粪便和血清的M2型丙酮酸激酶(M2-PK)、APC、K-ras水平,并分析M2-PK、APC、K-ras的水平与结直肠癌病理T分期的关系。方法将2015年1-10月在该院手术治疗的结直肠癌患者200例纳入该研究作为患者组,另外选取健康体检者100例作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、Ras水平,并结合患者的病理资料对M2-PK、APC、K-ras的水平与结直肠癌病理T分期的关系进行分析。结果结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、K-ras的表达水平分别高于对照组(P0.05)。M2-PK、APC、K-ras的表达与结直肠癌的病理T分期有密切关系,且临床病理T分期较晚的患者M2-PK、APC、K-ras的表达水平更高(P0.05)。结论结直肠癌患者血清和粪便的M2-PK、APC、K-ras水平较高且与肿瘤的临床病理T分期有关。M2-PK、APC、K-ras可作为早期诊断结直肠癌的分子标志物。     

干扰素-γ对Graves病甲状腺细胞凋亡的影响

目的 探讨干扰素一γ(interferon-γ,IFN-γ)对Graves病(GD)患者甲状腺细胞凋亡的影响.方法 取5例GD患者甲状腺组织,采用原代细胞培养技术、细胞增殖实验和流式细胞术检测IFN-γ对甲状腺细胞增殖活力、细胞凋亡率以及对Fas蛋白表达率的影响.应用ELISA检测IFN-γ刺激甲状腺细胞后培养上清液中sFas含量的变化.结果 与未加IFN-γ处理的对照组相比,经IFN-γ处理的甲状腺细胞增殖活力明显降低(P＜0.05),但甲状腺细胞的凋亡率、Fas蛋白表达率以及培养上清液中sFas含量明显增加(P＜0.05);IFN-γ诱导的凋亡率与F&s蛋白表达率的相关性有统计学意义(P＜0.05).结论 IFN-γ可以通过调节Fas的表达影响甲状腺细胞凋亡的发生,提示IFN-γ可能通过调节凋亡参与GD的病理生理过程.     

直接免疫荧光法快速检测甲型流感病毒抗原的临床意义

目的探讨直接免疫荧光法快速检测早期甲型流感病毒抗原及其临床应用。方法选择临床上诊断为急性呼吸道感染入院的患者,采集标本200例,将其分为两组:冬春两季流行季节儿童组(100例)和夏秋两季非流感流行期间儿童组(100例),使用美国D3Ultra甲型流感病毒抗原检测试剂,采用荧光标记的单克隆抗体对感冒患者进行甲型流感病毒抗原检测。结果在冬春两季流感流行期间,100例儿童检测有8例阳性,阳性率为8%;在夏秋两季非流感流行期间100例儿童检测有2例阳性,阳性率为2%;两组阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论运用直接免疫荧光法快速检测甲型流感毒感抗原是一种经济、高效、快速、特异的检测方法,能指导临床快速诊断,合理用药。