不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育潜能的影响

目的 探讨不同年龄女性D3卵裂期胚胎细胞数对囊胚发育潜能的影响,为临床优选胚胎提供参考。方法 回顾性分析行囊胚培养的29 314枚D3卵裂期胚胎情况,按照女方年龄分为<35岁组和≥35岁组,再按照卵裂期胚胎细胞数分为4细胞～11⁺细胞和融合期胚胎9个亚组,比较不同年龄组中不同细胞数亚组的囊胚形成率。行单囊胚冻融移植的共2 402个周期,其中<35岁组和≥35岁组中又根据囊胚来源的D3胚胎细胞数分为4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组,比较不同年龄不同细胞数胚胎来源的囊胚冻融移植临床结局。同时分析1 069个行胚胎植入前非整倍体检测(PGT-A)囊胚中<35岁组和≥35岁组4～6细胞、7～9细胞和≥10细胞+融合期3个亚组的整倍体率情况。结果 (1)<35岁组和≥35岁组中,8细胞亚组发育成囊胚的潜能最高,融合期胚胎次之,而6细胞以下亚组明显劣于其他细胞数目亚组(P<0.05)。(2)<35岁组中,各细胞数D3胚胎发育潜能层次明显,按照可利用囊胚形成率从高到低依次排序为：8细胞>融合期>11^+<...     

人精子CatSper1 mRNA表达与精子活力的相关性研究

目的研究不同精子活力的人精子中精子特异性阳离子通道蛋白1(CatSper1)mRNA的表达差异,以及其与精子活力相关指标的相关性。方法分别收集少、弱精症患者精液标本和健康人对照精液标本各25份,用Trizol试剂提取精子中的总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CatSper1 mRNA表达改变。结果少、弱精症组CatSper1 mRNA表达水平与健康人对照组相比,差异具有统计学意义[(0.54±0.01)vs(1.13±0.05),P<0.01]。CatSper1 mRNA表达与精子活率以及a+b级精子百分率之间呈显著正相关。结论人精子CatSper1 mRNA表达与人精子活力呈正相关。     

可溶性晚期糖基化终产物受体:在非PCOS患者卵泡液中的水平与其促排后卵巢反应性相关

目的 探讨非PCOS卵泡液可溶性晚期糖基化终产物受体（sRAGE）水平与其促排后卵巢反应性的相关性。方法 ELISA法测定90例非PCOS患者常规长方案COH患者取卵日卵泡液中sRAGE浓度;收集患者临床基础状态、激素水平、获卵数以及受精率等数据。采用SAS统计软件对各项指标进行分析。结果 卵泡液的sRAGE水平与基础FSH（P=0.0036）、Gn使用量（P< 0.0001）呈显著负相关关系。卵泡液的sRAGE水平与AFC（P<0.0001）、获卵数（P<0.0001）,受精率（P=0.0047）呈显著正相关关系。并按照获卵数分为3组：目标获卵数以下（<7个）、在目标标获卵数范围内（7-15）,在目标获卵数目以上（>15个）;单因素方差分析卵泡液sRAGE水平与获卵数呈正相关关系,与明显高于目标获卵数组和目标获卵数目以下组（P值分别为：P<0.0001 和 P=0.0012）。结论 卵泡液中sRAGE水平与非PCOS患者卵巢储备功能相关,卵泡液中sRAGE水平可以反映COH后获卵数与受精率情况,可以预测在控制性超促排卵过程的卵巢反应性。     

StarD7与Wnt/β-catenin信号通路对Annexin 5刺激大鼠Leydig细胞睾酮分泌的影响

目的:研究StarD7以及Wnt/β-catenin信号通路促进睾酮合成的内在机制,探索睾酮合成的调控新途径。方法:用1 nmol/L的Annexin 5处理大鼠原代Leydig细胞24 h,化学发光法检测睾酮含量,利用RT-PCR和Westernblot方法分析StarD7和β-catenin在mRNA和蛋白水平上的表达变化,并利用免疫荧光法对β-catenin进行定位。结果:在Annexin 5的刺激作用下,与对照组相比,睾酮合成水平明显增加了176%[(7.83±0.32)vs.(21.6±1.1),P<0.05];在Annexin 5作用下,与对照组相比,StarD7在mRNA水平表达增加55%[(1.12±0.08)vs.(1.74±0.11),P<0.05],β-catenin表达增加48%[(1.15±0.08)vs.(1.70±0.05),P<0.05]。在蛋白水平上,与对照组相比,StarD7增加42%[(1.06±0.09)vs.(1.51±0.07,P<0.05)],β-catenin增加55%[(1.02±0.01)vs.(1.58±0.02),P<0.05],此外在Annexin 5作用下,β-catenin有入核积聚的趋势。结论:在Annexin 5作用下,StarD7和β-catenin的表达均有显著增加,且β-catenin有入核积聚的趋势,提示StarD7和β-catenin对Annexin 5刺激Leydig细胞睾酮的合成均有调控作用,该过程可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路,从而促进StarD7表达上升,最终导致睾酮合成增加。     

膜联蛋白5刺激大鼠Leydig细胞增殖过程中RhoA、 RockⅠ的表达

目的研究RhoA、RockⅠ促进大鼠Leydig细胞增殖的机制,探讨膜联蛋白5调控Leydig细胞增殖的新途径。方法用1 nmol/L膜联蛋白5处理原代培养大鼠Leydig细胞12、24、48 h后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,western blot检测RhoA和RockⅠ的蛋白质表达情况。结果 MTT法结果显示,1 nmol/L膜联蛋白5呈显著的时间依赖的促进Leydig细胞增殖作用,且24 h组细胞增殖能力与对照组差异最为显著(0.251±0.019 vs 0.207±0.009,t=4.380,P0.01);流式细胞分析发现,1 nmol/L膜联蛋白5作用于Leydig细胞,以作用24 h时对细胞周期的影响最为显著,可使G2+M期比例比对照组升高(12.24±0.84 vs 7.79±1.15,t=5.407),G0/G1期比例下降(67.61±0.37 vs 74.49±0.73,t=-14.64),P均0.01;western bolt结果表明,膜联蛋白5作用12、24、48 h后Leydig细胞RhoA表达结果分别为1.39±0.29、2.21±0.38、1.46±0.19,与0 h组结果 0.89±0.41比较,均有升高(t=2.028,P0.05;t=4.736,P0.01;t=2.550,P0.05);膜联蛋白5作用24、48 h后Leydig细胞RockⅠ表达结果分别为1.14±0.18、1.03±0.17,与0 h组结果 0.72±0.22比较均升高(t=2.944,P0.01;t=2.246,P0.05)。结论 RhoA、RockⅠ可能参与膜联蛋白5促进细胞周期G0/G1进程,最终促进Leydig细胞的增殖。     

冻融单囊胚移植中囊胚内细胞团和滋养层评分对妊娠结局及新生儿出生结局的影响

目的 探讨单囊胚冻融胚胎移植(FET)周期中不同囊胚内细胞团和滋养层细胞评分对妊娠结局和新生儿出生情况的影响。方法 回顾性分析2015年1月至2021年12月在本科室行单囊胚FET患者的临床资料,共1 647个周期。根据囊胚的内细胞团(ICM)和滋养层细胞(TE)评级进行分组,分别为A组(移植AA级囊胚)231个周期,B组(移植AB/BA级囊胚)422个周期,C组(移植BB级囊胚)885个周期,D组(移植CB/BC级囊胚)109个周期。比较4组患者的一般资料、妊娠结局及新生儿出生情况,并采用多因素Logistic回归分析临床妊娠率的影响因素。结果 各组患者的年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、授精方式、基础性激素水平、促性腺激素(Gn)总量及Gn天数均无显著性差异(P>0.05)。各组患者的临床妊娠率、流产率及活产率组间比较均有显著性差异(P<0.01),且随着ICM和TE评分的下降(从A组到D组),临床妊娠率和活产率有明显下降的趋势,流产率则有明显上升的趋势。各组间的早产率比较无显著性差异(P>0.05)。新生儿出生性别比4组间有显著性差异(P<0.05),...     

Annexin5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中StarD7表达的影响

目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中的StarD7(START domain containing 7)表达的影响,探讨annexin 5影响睾酮分泌的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,1nmol/L的annexin 5处理间质细胞24h,分别提取细胞总mRNA和总蛋白。RT-PCR检测StarD7的mRNA表达改变。Western blotting方法分析睾丸间质细胞中StarD7的蛋白表达变化。收取细胞爬片,利用免疫细胞化学的方法对StarD7在睾丸间质细胞中进行定位。结果与对照组相比,在mRNA水平上,加药组StarD7 mRNA的表达增加了44.5%(1.10±0.02 vs 1.59±0.09,P<0.05)。在蛋白水平上,加药组StarD7蛋白的表达增加了44.3%(1.49±0.10 vs 2.15±0.16,P<0.05)。StarD7主要定位在大鼠睾丸间质细胞的胞浆内,加药组的染色强度明显强于对照组。结论 StarD7在基因和蛋白水平均受annexin 5的调控,结合先前发现annexin 5可调控睾丸间质细胞睾酮合成的结果,提示annexin 5调控睾酮合成可能是通过调控StarD7的表达来实现的。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对小鼠精子畸形的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对实验小鼠雄性配子体内发育的影响。方法:选取64只6周龄昆明种雄鼠,随机分成如下8组:生理盐水组为阴性对照组,30 mg/kg环磷酰胺(CP)为阳性对照组,不同剂量EGCG组(20、40、80 mg/kg)以及EGCG抗环磷酰胺诱导组(30 mg/kg CP+20、40、80 mg/kg EGCG),隔日给药,连续5次。在首次给药的第4周和第5周,检测小鼠精子畸形率。结果:EGCG本身不会诱导小鼠精子畸形,而且延长EGCG的处理时间,小鼠精子畸形率有下降的趋势,尤其可以明显抑制CP诱导的小鼠精子畸形。结论:EGCG对在体内的雄性动物配子可能具有保护作用。     

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中Ect2表达的影响

目的研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中上皮细胞转化序列2癌基因(epithelial cell transfor-ming sequence 2 oncogene,Ect2)表达的影响,探讨annexin 5影响睾丸间质细胞增殖的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,不同剂量的annexin 5处理后,采用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR检测Ect2的mRNA表达改变,western blot分析睾丸间质细胞中Ect2蛋白质表达变化。结果 MTT法检测结果显示,annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖有明显的促进作用,且在2～3 d呈显著的剂量-时间依赖关系(P<0.01),在第5天细胞增殖作用已明显减弱。流式细胞分析发现,1 nmol/L annexin 5作用48 h时G2/M期细胞减少为24.49%,72 h时减少为16.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05)。RT-PCR结果表明,0.1 nmol/L组和1 nmol/L组Ect2 mRNA表达[(0.77±0.06)和(0.85±0.04)]与对照组(0.67±0.06)比较,分别增加了14.9%(P<0.05)和26.9%(P<0.01),而10 nmol/L组Ect2 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。western blot结果表明,1 nmol/L annexin 5作用组的Ect2蛋白质表达比对照组增加了20.9%[(1.50±0.15)vs(1.24±0.07),P<0.05],而0.1 nmol/L组和10 nmol/L组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖的促进作用是通过促进细胞周期由G2期向M期的转变来实现的。Ect2在基因和蛋白质水平均受annexin 5的影响,提示annexin 5调控睾丸间质细胞增殖可能通过增加Ect2的表达而实现。