人垂体FSH分离提纯及放射免疫测定法的建立与应用

采用亲和层析和葡聚糖凝胶层析技术,从人垂体制品中分离,提纯人促卵泡成熟激素(h-FSH),制备了FSH抗血清,建立FSH放射免疫测定法。能反映不同性别、不同年龄正常人FSH水平和某些内分泌疾病中FSH的变化规律,为临床提供了新的指标。对性功能异常的诊治、中医虚症研究、计划生育等内分泌研究都有重要意义。     

老年人血清促卵泡成熟激素测定的初步结果和探讨

用亲和层析法提纯 FSH 抗原,对51名健康老年人(男28名、女23名)应用放射免疫双抗体分离法,进行血清 FSH 值测定。结果28名健康男性老年人血清 FSH 值为11.45±7.87,高于健康男性成年人,差异显著(P<0.05):但低于23名健康女性老年人,差异十分显著(P<0.01);与男性冠心病患者对比,亦有显著性差异(P<0.05)。健康老年人中,血清 FSH 值一般随年龄增长而增高,女性尤为明显,对其可能产生的机制,进行了初步讨论。     

基因型明确的17 α-羟化酶/17,20-裂解酶缺陷症杂合子肾上腺皮质功能的研究

目的 明确携带CYP17A1基因突变的杂合子个体肾上腺类固醇激素合成功能.方法 对17α-羟化酶和17,20-裂解酶缺陷(17OHD)5个家系的8例患者和14例家系成员,通过PCR产物直接测序的方法来鉴定CYP17A1基因突变,并测定CYP17A1基因突变携带者与45名年龄、性别匹配的正常个体在ACTH兴奋前后肾上腺皮质激素的变化.结果 发现5个家系14例CYP17A1基因突变的携带者中,7例为D487_F489del,6例为Y329fs,1例为H373L.杂合携带者基础和ACTH刺激后的皮质醇水平均低于正常对照,而兴奋后的皮质酮水平高于正常.杂合子的皮质酮与皮质醇的比值在ACTH兴奋前后皆高于正常对照.而男性杂合子在ACTH兴奋前后孕酮水平以及孕酮与17-羟孕酮比值也均都高于正常对照.D487_F489del和Y329fs两组杂合子之间的激素水平无显著差异.结论 与CYP21A2基因突变的携带者体内的21-羟化酶活性轻度受损相类似,CYP17A1基因突变杂合携带者的肾上腺类固醇激素合成已有异常.     

人乳腺癌雌激素受体的免疫组织化学测定

一、材料和方法人乳腺癌标本由上海市房地产管理局职工医院、瑞金医院和市第九医院收集，贮于一SOC；6－7［3H］－E2购自中科院原子核研究所；DAB和兔一PAP－IgG均为Sigma公司产品；兔抗小鼠IgG和羊抗兔IgG均为上海生物制品研究所产品；抗人乳腺癌雌激素受体（ER）单抗（IH12）为本所研制[1]。PAP免疫级化法：将冻存的标本作厚SPin冰冻切片，室温放置10分钟，3．7％福马林固定15分钟，浸入甲醇和丙酮各3分钟，10％小牛血清封闭15分钟，分别滴加ER单抗（1H12腹水1：10）和无关腹水（阴性对照）、PBS（空白对照），湿盒内1小时…     

雅培ALINITY i平台测定甲状腺激素TT3和FT3的性能评价

目的 对ALINITY i免疫发光测定系统检测游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)和总三碘甲腺原氨酸(total triiodothyronine,TT3)的性能进行验证,并评估新型ALINITY i系统6点校准体系和传统ARCHITECT系统6点校准体系检测对两项甲状腺激素(FT3和TT3)检测结果的一致性.方法 按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的指南文件和相关文献,对ALINITY i系统测定的FT3和TT3的精密度、最低检出限、线性和生物参考区间进行验证,并参考其中的CLSI EP9-A2文件对雅培ALINITY i系统6点校准体系和雅培ARCHITECT系统6点校准体系两种检测方法间的两项甲状腺激素检测结果进行方法学分析评价,并采用Pearson相关分析和Passing-bablok做数据比对分析.结果 ALINITY i系统6点校准体系检测FT3和TT3实验室内各水平总精密度均小于1/3 TEa,在可接受范围.通过线性验证试验证实上述两个项目在厂商声明的范围内呈良好的线性关系.生物参考区间与试剂厂商提供的参考区间数据相符.通过FT3和TT3两个检测项目评价两种检测方式的相关性和偏倚情况,FT3和TT3在雅培ALINITY i平台6点校准试剂检测和雅培ARCHITECT平台6点校准试剂检测的结果之间相关系数分别为0.996和0.987,斜率分别为0.998和0.924,两者检测结果之间有很强的相关性.结论 ALINITY i的免疫检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和总三碘甲腺原氨酸(TT3)的性能符合既定的实验室设置标准,且关键性能参数与ARCHITECT高度一致.     

酶法测定糖化血清白蛋白的多中心临床研究

目的糖化血清白蛋白(GA)是反映近期血糖控制总体水平的血糖对应指标,采用酶法测定上海3所三级甲等医院糖尿病患者的GA水平,观察其在中国上海糖尿病患者群中的临床意义。方法分别在3所医院随机抽取142例2型糖尿病患者,测定空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA_1c)、GA等。第1个月内每2周强化治疗1次,以后每个月强化治疗1次,至3个月。结果所有患者强化治疗结束后的各项血糖指标较入组前明显改善(P＜0．01)。GA与FPG或2hPG的相关系数(r=0．598和O．585)均高于HbA_1c (0．574和0．555),均呈显著正相关(P＜0．01)。所有受试者中,GA与HbA_1c呈显著正相关(r=0．777,P＜0．01)；而在初诊患者中相关性更好(r=0．835,P＜0．01)。结论GA是一个可反映血糖近期变化的优良且检测方便的指标,采用酶法测定的GA与各项血糖指标及HbA_1c有较好的相关性,在初次诊断的糖尿病患者中更为显著。     

上海地区糖化血红蛋白一致性计划建立和结果初步评价

2009年,美国糖尿病协会(American Diabetes Association,ADA)国际专家委员会正式推荐使用糖化血红蛋白A1c (glycohemoglobin A1c,HbA1c)作为糖尿病的诊断指标之一[1].自此,沿用多年的以血糖浓度为主要标准的糖尿病诊断模式发生了重要改变.HbA1c不仅作为判断血糖控制情况的疗效评价指标,也在糖尿病诊断中起到重要的作用[2].HbA1c的检测结果一致性日益为临床所重视[3-4].     

抗人雌激素受体单抗的制备及鉴定

分别采用部份纯化的人乳腺癌雌激素受体（ｈＥＲ）及合成的与ｈＥＲ分子中ＤＮＡ结合区序列相同的多肽（ＡＴ３）作免疫原。经用Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｉｓｔｅｉｎ杂交瘤技术，制备出７株抗人雌激素受体单体（１Ｈ１２、２Ｄ７、ＡＴ３～２７等），并经ｓｅｐｈａｃｒｙｌ凝胶层析、免疫沉淀反应和间接免疫荧光标记法作特异性鉴定。其中一株高亲和力、高特异性的单抗（１Ｈ１２）在免疫沉淀反应中与人乳腺癌雌激素受体的特异性结合率达４６．２±２２．０％，并用该单抗成功地进行了人乳腺癌组织冰冻切片的ｈＥＲ间接免疫荧光标记。