生育晚期各级别宫颈病变患者宫颈微生态的特征

目的 探讨生育晚期宫颈病变患者宫颈微生态特征,寻找阻断宫颈病变的新途径。方法 根据入组及排除标准,纳入健康女性25例,高危型人乳头瘤病毒感染者24例,低级别宫颈上皮内瘤变（LSIL）27例,高级别宫颈上皮内瘤变（HSIL）36例,宫颈癌35例,合计147例。通过对所取的宫颈分泌物进行核酸提取,针对16S rRNA的V3+V4区域进行PCR扩增及测序。样本稀释曲线及物种箱型图证明本研究测序深度充分,样本合格。对有效数据进行OTUs分析,了解物种表达情况,并以此为基础进行α和β多样性分析。α多样性分析主要采用Chao1、Simpson和Shannon指数。β多样性分析主要采用T检验条形图、基于Weighted Unifrac Beta多样性的箱形图以及MetaStat分析。结果 5组受试者OTUs分析显示,宫颈菌落属水平丰度均以乳酸杆菌、加德纳菌、普氏菌为主,随着病变的加重乳酸杆菌丰度降低,加德纳菌属和普氏菌属丰度增高。Chao1、Simpson和Shannon指数差异均无统计学意义（P>0.05）。T检验条形图中,与健康组相比,其余各组中差异具有统计学意义的菌属为9~15个。除LSIL组外,差异菌种丰度最高的3个菌属为乳酸杆菌属（P_1-2=0.025,P_1-3=0.025,P_1-4<0.001）、加德纳菌属（P_1-2=0.01,P_1-3=0.001,P_1-4<0.001）和普氏菌属（P_1-2=0.047,P_1-3=0.023,P_1-4=0.048）。LSIL组与健康人群比较差异菌属丰度最高的3个菌属分别为加德纳菌属（P_1-3=0.021）、依格纳季氏菌属（P_1-3=0.015）、链球菌属（P_1-3=0.041）。MetaStat综合分析5组数据,其中差异具有统计学意义的菌属中丰度最高的为乳酸杆菌属（P _1-4=0.025）、加德纳菌属（P _1-2=0.004、P_1-4=0.002、P_1-5=0.001）及普氏菌属（P_3-5=0.005）。结论 宫颈群落属水平表达均以乳酸杆菌、加德纳菌属、普氏菌属为主,并随疾病进展而变化;α多样性分析无明显差异,证实除病理因素外,生理因素也可导致α多样性的差别。LSIL组是所有病变中与健康人群最为相近的一组,这符合其疾病预后,进一步证实宫颈菌群表达与疾病预后相关,有望成为良好预后的生物学评估指标。