弓形虫表面抗原研究进展

刚地弓形虫是一种广泛分布于人和哺乳动物组织细胞内的机会性致病原虫,可引起严重的人兽共患病.弓形虫抗原的研究对开发诊断制剂、疫苗以及从分子水平探讨弓形虫与宿主之间的相互关系具有重要意义,该文对近年来有关弓形虫抗原的研究进展作一综述.     

弓形虫表面抗原研究进展

刚地弓形虫是一种广泛分布于人和哺乳动物组织细胞内的机会性致病原虫,可引起严重的人兽共患病.弓形虫抗原的研究对开发诊断制剂、疫苗以及从分子水平探讨弓形虫与宿主之间的相互关系具有重要意义,该文对近年来有关弓形虫抗原的研究进展作一综述.     

弓形虫表面抗原研究进展

刚地弓形虫是一种广泛分布于人和哺乳动物组织细胞内的机会性致病原虫,可引起严重的人兽共患病.弓形虫抗原的研究对开发诊断制剂、疫苗以及从分子水平探讨弓形虫与宿主之间的相互关系具有重要意义,该文对近年来有关弓形虫抗原的研究进展作一综述.     

弓形虫表面抗原研究进展

刚地弓形虫是一种广泛分布于人和哺乳动物组织细胞内的机会性致病原虫,可引起严重的人兽共患病.弓形虫抗原的研究对开发诊断制剂、疫苗以及从分子水平探讨弓形虫与宿主之间的相互关系具有重要意义,该文对近年来有关弓形虫抗原的研究进展作一综述.     

蛔虫抗菌肽在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定

目的在毕赤酵母表达系统中表达蛔虫抗菌肽cecropin P1并检测其生物活性。方法根据毕赤酵母的密码子偏好性,人工设计并合成3条cecropin P1基因寡核苷酸片段,通过PCR扩增得到cecropin P1基因,构建重组载体pMD18-T-CecP1。双酶切pMD18-T-CecP1,将cecropin P1基因克隆到载体pPICZα-A信号序列α-因子之后,构建酵母分泌表达载体pPICZα-A-CecP1,用SacⅠ将其线性化后转化毕赤酵母X-33,采用Zeocin抗性筛选阳性菌株并进行诱导表达,发酵上清进行SDS-PAGE分析,抑菌试验鉴定其抑菌活性。结果获得酵母分泌表达载体pPICZα-A-CecP1。SDS-PAGE证实pPICZα-A-CecP1/X-33甲醇诱导产物的分子质量单位为6.3 ku。表达产物对大肠埃希菌DH5α的生长有抑制作用。结论应用毕赤酵母表达系统能表达cecropin P1。该抗菌肽具有抑菌作用。     

猫肠上皮细胞的原代培养及cDNA文库的构建

目的建立猫肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)培养体系,构建其酵母双杂交cDNA文库,为筛选弓形虫毒性因子在终末宿主的互作蛋白奠定基础。方法分别采用组织块法以及低浓度胶原蛋白酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法进行猫IECs的原代培养,通过形态学观察及细胞免疫组织化学方法鉴定后提取mRNA,运用SMART技术合成cDNA第一链,以LD-PCR扩增获得双链cDNA(ds cDNA),通过同源重组方法在酵母菌株Y187中构建猫IECs的cDNA文库,计算文库的容量,以酵母菌液PCR检测插入片段的大小分布。结果两种培养方法效果表明酶联合消化法更为有效。本研究建立了连续培养猫IECs体系,培养出高纯度的猫IECs,用其构建的cDNA文库容量为1.1×10~6,滴度为2.8×10~9cfu/ml,插入片段大小在0.5~2.0 kb之间。结论培养的原代猫IECs构建的cDNA文库符合酵母双杂交筛选互作因子标准,这为筛选弓形虫终末宿主的毒性因子互作蛋白奠定了基础。     

国产奥沙利铂为主的联合化疗治疗晚期大肠癌临床研究

目的 观察国产注射用奥沙利铂(L-OHP)为主的联合化疗治疗晚期大肠癌的临床疗效和毒副反应.方法治疗组为A组,对照组为B组.A组L-OHP 130 mg/m2,静脉滴注,第1天,注射用亚叶酸钙(CF)200 mg/m2,静脉滴注,第1～5天,氟脲嘧啶脱氧核苷(FUDR)400 mg/m2,静脉滴注,第1～5天,21天为一个周期;B组:CF 200 mg/m2,静脉滴注,第1～5天,FUDR 400 mg/m2,静脉滴注,第1～5天,21天为一个周期.2周期后评定疗效.结果共收入病人51例,A组26例,有效率为46.2%,不良反应主要为感觉神经毒性、恶心、呕吐和白细胞下降;B组25例,有效率12.0%,不良反应主要为恶心、呕吐和白细胞下降,无神经毒性.结论 L-OHP,联合CF+FUDR化疗较CF+FUDR化疗疗效提高,病人的耐受良好,是治疗晚期大肠癌安全有效的方案.     

我国不同疫区杜氏利什曼原虫ITS-1片段序列的多态性分析

目的确定rDNA的内转录间隔区Ⅰ(ITS-1)是否可作为我国杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)分类的分子遗传标记。方法对我国不同疫区杜氏利什曼原虫分离株(L.d.SD1、L.d.SC7、L.d.XJ3、L.d.JS12)的ITS-1进行PCR扩增、克隆、测序,并分析它们的ITS-1序列多态性。结果 4个不同疫区的利什曼原虫分离株(L.d.SD1、L.d.SC7、L.d.XJ3、L.d.JS12)经PCR均扩增出一条约320bp的ITS-1片段,其序列大小分别为:317bp、323bp、317bp、316bp。序列分析表明:序列之间在多处位点发生了不同类型的突变,存在明显的序列多态性,其中伽师县突变的频率最为频繁,序列多态性最为显著。结论 ITS-1可以作为Leishmania donovani种内分类的分子遗传标记,有利于我国内脏利什慢原虫病的防治、诊断和治疗。     

生物抗菌肽毕赤酵母表达系统研究进展

抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽,广泛存在生物界。抗菌肽具有广谱抗菌活性,有良好的应用前景,使其走向临床的最大的挑战是如何用基因工程技术低成本大量生产抗菌肽产品。抗菌肽天然提取资源有限且提取难度大,难以实现规模化生产;人工合成成本太高,难以实现产业化,目前多局限于研究用途。毕赤酵母表达系统适用于多种生物抗菌肽的表达,多种表达策略的采用可以提高表达量,毕赤酵母表达抗菌肽具有良好的应用前景。本文综述了抗菌肽毕赤酵母表达的研究进展。