超声靶向转染c-myc基因的反义肽核酸抑制兔髂动脉平滑肌细胞增生的实验研究

目的观察制备的白蛋白超声微泡载c-myc原癌基因反义寡肽核酸靶向转染血管内膜平滑肌细胞的效果及对受损血管内膜增生的影响。方法用球囊导管剥脱兔髂动脉内皮细胞制备血管内膜平滑肌细胞增生模型;设计合成针对兔c-myc m RNA原癌基因反义PNA,并将其5’-氨基端以生物素分子标记;采用白蛋白作为原料,在制备超声微泡过程中向白蛋白溶液中加入定量PNA制备白蛋白超声微泡-PNA靶向载体,在超声场的作用下转染局部血管壁细胞;用免疫组织化学法检测PNA转染效果并观察其对血管内膜平滑肌细胞表达增殖细胞核抗原的影响;血管形态测量法直接测量局部血管内膜厚度和面积并评价其对内膜增生的影响。结果超声波介导白蛋白超声微泡载c-myc反义PNA靶向转染受损血管壁获得成功并有效抑制血管内膜平滑肌细胞表达PCNA和内膜增生。结论白蛋白超声微泡携带PNA靶向转染方法为促进其进入体内特定细胞发挥功效提供又一可行途径。     

转染PDGF-B mRNA的反义寡肽核酸抑制狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄

目的探讨PDGF-B mRNA反义寡肽核酸对冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄的影响。方法建立狗冠状动脉搭桥吻合口再狭窄模型;用合成的反义寡PNA以外科涤纶线携带并辅助治疗性超声波转导吻合口局部血管平滑肌细胞;分别用原位分子杂交和LSAB免疫组织化学法检测PDGF-B mRNA和PCNA表达;用形态测量法检测吻合口局部冠状动脉内膜厚度和面积。结果PNA显著抑制术后第4周吻合口局部冠状动脉内膜vSMCs表达PCNA和PDGF-B mRNA,与对照组相比抑制率分别为75.37%和71.64%;显著减少血管内膜厚度和面积。结论合成的反义寡PNA可部分抑制狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄。     

风湿性心脏瓣膜病发生机制探讨

对134例风湿性二尖瓣切除标本进行了瓣膜及心肌间质病理学观察。结果显示：广泛的胶原纤维组织增生、玻璃样变性和分布紊乱，弹力纤维破坏以及钙化是风湿性心脏瓣膜病显著病理特征之一。此等心脏胶原基质网的重建是病变发生、发展的主要机制。     

左心房原发性黏液瘤14例临床病理分析

目的 分析左心房原发性黏液瘤的临床特征、病理学特点,探讨其组织来源、诊断及鉴别诊断.方法 收集14例心脏黏液瘤患者的临床资料,对组织病理学表现和免疫组化结果进行分析,并结合文献复习.结果 14例心脏黏液瘤患者,男性3例,女性11例,年龄20～ 64岁,平均年龄50.2岁;黏液瘤均位于左心房.除1例没有临床症状外其余均有胸闷、心悸、气促.镜下大量黏液样基质中可见散在或灶状分布的肿瘤细胞,细胞呈星芒状、梭形、圆形或卵圆形,核深染,局部可见多核瘤细胞.免疫组化:14例vimentin均(+),SMA灶性(+),Ki-67(-);6例calretinin灶性(+).结论 左心房黏液瘤可能起源于原始多潜能间叶细胞,可向平滑肌分化;但部分细胞calretinin(+).组织病理结合超声心动图可明确诊断.该瘤复发率较低,预后较好.     

心原发性卵黄囊瘤临床病理观察

目的分析心原发性卵黄囊瘤临床病理特征及诊断、鉴别诊断要点。方法对1例发生于心的肿瘤进行组织形态学观察和免疫组化研究,结合文献探讨其病理组织特征。结果镜下见肿瘤细胞呈立方、柱状,核深染,大小不一,有异型。瘤细胞形成微囊、乳头状结构,可见SD小体、透明小体及出血、坏死。免疫组化显示CK、PLAP、AFP和AAT(+),PAS亦(+)。结论心原发性卵黄囊瘤非常罕见,由于其临床表现无特异性,早期诊断困难,诊断主要依赖于组织形态学及免疫组化检查。     

颅针对家兔实验性急性心肌缺血的影响

<正> 颅针疗法是我国七十年代末用于临床,对常见病包括冠心病在内,疗效显著。为了探讨颅针治疗冠心病的机理,用垂体后叶素给动物造成心肌缺血性模型,进行了如下实验。     

转染PDGF-B反义核酸和tPA基因预防狗冠脉搭桥术吻合口再狭窄

目的： 探讨联合应用组织型纤溶酶原激活物（tPA）基因质粒和血小板源性生长因子（PDGF-B）反义核酸预防冠状动脉搭桥术后吻合口再狭窄。方法： 建立狗冠状动脉搭桥术吻合口再狭窄模型，构建tPA基因质粒并设计合成（PDGF-B）反义寡核苷酸，在冠状动脉搭桥术同时以超声波辅助转染心肌细胞和吻合口血管平滑肌细胞，采用常规病理、免疫组织化学、原位杂交以及形态测量方法观察对吻合口局部血栓形成、血管内膜细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和PDGF-B mRNA表达以及内膜增生的影响。结果： 成功转染tPA基因和（PDGF-B）反义核酸；2种基因联合应用显著抑制血管内膜细胞表达PCNA和PDGF-B mRNA，抑制率分别为65.01%和81.75%；显著减少局部血管内膜厚度、内膜面积和吻合口血栓形成，使吻合口狭窄率显著减少62.63%。结论： 联合转染tPA表达质粒和PDGF-B的反义寡核苷酸在一定程度上抑制猪实验性冠状动脉搭桥术后吻合口再狭窄。     

兔髂动脉内膜损伤后PDGF-BmRNA在血管壁原位表达增强

目的:探讨内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMCS)增殖的体内机制。方法:用球囊导管损伤兔髂动脉内膜建立VSMCS增殖模型,以自行设计、合成的血小板源性生长因子β(PDGF-B)cDNA探针和原位杂交方法检测了损伤后不同时期VSMCS表达PDGF-B mRNA与VSMCS表达增殖细胞核抗原和内膜横断面积增加关系。 结果:血管损伤后VSMCS 表达PDGF-B mRNA增强,计数内膜(0.25 mm×mm)×4面积中PDGF-B mRNA阳性细胞数分别为1、2和4周的31.93±14.63,26.50±9.25和24.85±13.65。其表达与VSMCS表达增殖细胞核抗原和内膜面积的增加密切相关。结论: 血管内膜损伤后VSMCS自泌性产生PDGF-B 是VSMCS增殖和内膜增生的主要原因之一。我们设计的探针为原位研究兔VSMCS PDGF-B mRNA的表达提供方便。     

构建高表达组织型纤溶酶原激活物基因质粒预防兔动脉粥样硬化血栓形成

目的探讨组织型纤溶酶原激活物基因质粒在预防动脉粥样硬化及血栓形成中的作用。方法新西兰纯种兔20只,分为基因治疗组和模型组,每组各10只,基因治疗组双侧髂动脉内膜剥脱术 转基因治疗 高胆固醇饮食喂养;模型组双侧髂动脉内膜剥脱术 高胆固醇饮食喂养。4周后处死动物,观察动脉内粥样硬化病变和血栓形成;在处死动物的同时抽血检测D-二聚体含量。结果成功建立了兔髂动脉粥样硬化模型并获得了组织型纤溶酶原激活物在血管周围肌肉组织中的有效表达。构建的组织型纤溶酶原激活物基因质粒可显著抑制兔动脉血管损伤后平滑肌细胞增殖细胞核抗原表达(13.55±8.43比27.78±12.35)和血小板源生长因子BmRNA表达(3.54±1.78比20.40±11.25),显著减少血管内膜厚度(32.75±21.50μm比165.70±71.21μm)和内膜面积(0.41±0.47mm2比2.01±1.15mm2),且显著抑制了局部血管粥样硬化病变发展并使病变血管内血栓形成明显减少。结论构建的组织型纤溶酶原激活物基因质粒可用于预防兔实验性动脉粥样硬化血栓形成。     

γ干扰素对兔血管内膜损伤后平滑肌细胞c-myc癌基因表达和增生的影响

目的：阐明γ干扰素抑制血管内膜增生和防治再狭窄的体内机制。　　方法：建立兔再狭窄血管模型。将６０只新西兰纯种兔分为实验组（ｎ＝ ３０）术前１ 天给予重组γ干扰素和对照组（ｎ＝３０）术前不给干扰素。每组分别于术后１周、２ 周和４周处死动物，每次１０只。动态观察给予重组γ干扰素对损伤后不同时期内膜血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）原位表达ｃ－ｍ ｙｃ信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）和增殖细胞核抗原的影响。　　结果：γ干扰素显著抑制１ 周和４周时内膜ＶＳＭＣ增殖细胞核抗原的表达，抑制率分别为８８．５０％ 和５８．８９％ ；显著抑制新生内膜ＶＳＭＣｃ－ｍ ｙｃｍ ＲＮＡ的表达，抑制率分别为１周９１．４５％ 、２ 周９３．６６％ 和４ 周５２．９２％ 。　　结论：γ干扰素抑制内膜ＶＳＭＣ增殖和再狭窄伴ｃ－ｍ ｙｃ癌基因表达的下调，为防治再狭窄提供了一条途径