氯化铵裂解法与非裂解法提取人脂肪干细胞生物学特性的差异

文题释义： 氯化铵红细胞裂解液：含有氯化铵成分的红细胞裂解液,此种裂解液被广泛应用于骨髓干细胞及脂肪干细胞的提取,其目的是去除组织内的红细胞,使目的细胞群进一步纯化。其作用机制为：红细胞内有大量碳酸酐酶,可自发将NH₃转化为NH₄⁺,CO₂转化为HCO₃^-,促使胞外NH₃和CO₂连续内流造成细胞裂解。 基质血管成分：脂肪组织中除了含有成熟脂肪细胞外,还包含一组混杂的细胞群,即基质血管成分。基质血管成分包括血管内皮细胞、脂肪祖细胞、成纤维细胞、周细胞、脂肪干细胞,造血干细胞、红细胞等,其具有多向分化潜能及促进组织血管再生等功能,在组织及器官的再生、修复中具有极大的应用前景。 背景：脂肪干细胞的提取及纯化流程尚未建立统一标准。最常用的纯化脂肪干细胞的方法是利用红细胞裂解液处理基质血管成分。但这一步骤是否对脂肪干细胞存在不良影响仍缺乏证据,是否有利于未来临床应用仍有待探讨。 目的：比较氯化铵红细胞裂解液法和非裂解法提取脂肪干细胞的效率,并进一步比较两种方法提取脂肪干细胞的生物学特性。 方法：收集吸脂手术患者脂肪组织,经Ⅰ型胶原酶消化后,利用或不用氯化铵红细胞裂解液对基质血管成分进行纯化,Muse^TM细胞状态分析仪对活细胞计数及活细胞比例评估;将基质血管成分接种后培养人脂肪干细胞至第2代,光学显微镜观察脂肪干细胞形态,流式细胞学分析脂肪干细胞表型,CCK-8法绘制细胞增殖曲线,成脂及成骨培养基诱导后油红O及茜素红染色法分别评估成脂、成骨分化能力。该实验经中国医学科学院整形外科医院伦理委员会批准,并与患者签署相关知情同意书。 结果与结论：①与裂解组相比,非裂解组提取即刻的基质血管成分中非红活细胞数更多,活细胞百分比更大;②两组脂肪干细胞均呈梭形、鱼群状排列;③两组细胞均高表达CD90、CD73、CD105等细胞表面抗原,低表达或不表达CD11b、CD34、CD19、CD45、HLA-DR等细胞表面抗原;④非裂解组细胞增殖速度更快,成脂及成骨能力两组间无明显区别;⑤结果表明,利用氯化铵红细胞裂解液法提取基质血管成分降低了脂肪干细胞提取效率,抑制了脂肪干细胞增殖能力。非裂解过程不影响脂肪干细胞表型及成脂、成骨分化能力。因此不建议在人脂肪干细胞提取过程中进行氯化铵法红细胞裂解。 ORCID: 0000-0002-8958-4975(李梓菲) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

椎体后方结构及对突出椎间盘体积测量的影响

背景：突出椎间盘体积测量是定量评估椎间盘突出程度的重要数据,以往在对内窥镜下微创颈椎管成形术后突出颈椎间盘体积的观察中发现,定量测量不能证实突出的颈椎间盘被完全吸收,可能与椎体后方一些不能吸收回纳的组织被包容在突出的椎间盘组织中一并被测量有关。目的：对比分析包含与去除椎体后方结构对突出腰椎间盘体积测量的影响,并初步观察内镜下微创腰椎管成形术后突出椎间盘体积的早期变化。方法：选择郑州大学第一附属医院收治的腰椎间盘突出患者98例(涉及191个椎间盘),收集患者内镜下微创腰椎管成形术前与术后1周的腰椎MRI影像资料,均应用PACS软件测量突出椎间盘体积,分2种测量方法：一组包含椎体后方结构,另一组去除椎体后方结构。比较两种测量方式下,手术前后突出腰椎间盘的缩小率、缩小比、不变比、增大比、增大率,以及术后1周的2种测量方法下的突出腰椎间盘的吸收比、吸收率。结果与结论：(1)包含组术后突出腰椎间盘体积缩小的有123个,缩小比64.4%,最大缩小率34.17%;体积不变的有45个,不变比23.6%;体积增大的有23个,增大比12%,最大增大率59.9%。去除组术后突出腰椎间盘体积缩小的有143个,...     

Six1和MTDH在人脑胶质瘤中的表达、临床病理特征及预后的相关性分析

目的探讨Six1和异黏蛋白(MTDH)在人脑胶质瘤中的表达、患者临床病理特征及预后的相关性。方法选取该院2012年12月至2016年12月收治的150例人脑胶质瘤患者作为研究组,同时选择60例非肿瘤脑组织作为对照组。采用免疫组化法检测脑组织中Six1和MTDH蛋白表达水平,采用χ2检验分析Six1和MTDH蛋白表达与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系,并采用Cox比例风险分析脑胶质瘤患者预后影响因素。结果研究组Six1、MTDH蛋白阳性表达率[65.33%(98/150)、63.33%(95/150)]均明显高于对照组[33.33%(20/60)、28.33%(17/60),P0.05]。Six1、MTDH蛋白表达与脑胶质瘤患者的分化程度差异有统计学意义(P0.05);Spearman等级相关分析显示:脑胶质瘤患者中Six1与MTDH蛋白表达呈正相关(r=0.354,P0.05);脑胶质瘤患者平均中位生存期48个月,其中Six1阳性表达和阴性表达患者中位生存期分别为21个月、44个月,2组比较差异有统计学意义(χ2=22.872,P0.05);MTDH阳性表达和阴性表达患者中位生存期分别为19个月、45个月,2组比较差异有统计学意义(χ2=24.361,P0.05);单因素分析显示:病理学分级越高、肿瘤低分化、Six1阳性、MTDH阳性患者其生存时间均明显缩短(P0.05);多因素Cox回归模型分析显示:肿瘤低分化、Six1阳性、MTDH阳性均为脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(P0.05)。结论 Six1与MTDH蛋白在脑胶质瘤患者组织中的表达水平升高,其表达水平随着人脑胶质瘤的恶性程度升高而升高,Six1表达阳性或MTDH表达阳性患者预后较差。     

后踝骨折研究进展与争论

目的：总结后踝骨折研究进展 数据源：主要使用Pubmed数据库资源 文献选择：选取与后踝骨折或三踝骨折有关的文献 结果：对于多大后踝骨折块影响踝关节稳定并需要手术尚无一致结论。X线评估后踝骨折不可靠,CT推荐使用,特别是胫骨干骨折合并隐匿性后踝骨折,其发生率以往被低估。通过后外侧入路直视下钢板固定后踝骨折块临床效果良好。固定后踝相较于下胫腓螺钉更适用于下胫腓损伤。手术指征和功能锻炼时机仍有争议。 结论：踝关节稳定性判断、选择适宜的诊断评估手段和手术方法有利于后踝骨折处理。需要更多的踝关节稳定性和不同治疗方式对比等方面的基础临床研究。     

缺血、缺氧对小鼠海马DNA甲基化的影响

目的建立缺血、缺氧脑片模型,探讨缺血、缺氧对小鼠海马的损伤及其机制。方法利用C57BL/6J小鼠建立海马脑片缺血、缺氧性脑损伤(HIBD)模型,采用免疫组织化学染色法和Western blotting法分析正常对照组海马脑片与HIBD实验组海马脑片炎症损伤、DNA甲基化相关酶的表达情况。结果 HIBD实验组海马脑片氧化应激、炎症损伤细胞明显多于对照组(P0.01),诱发海马应激损伤;同时HIBD实验组海马脑片DNA甲基化水平高于对照组(P0.01)。结论脑片缺血、缺氧可促发炎症反应对海马组织造成损伤,DNA甲基化水平升高,提示DNA甲基化可能参与缺血、缺氧组织损伤过程;机制可能是HIBD影响DNA代谢活动,诱导DNA甲基化水平升高,DNA甲基化调控相关基因表达产生氧化应激,促发炎症反应,对海马造成损伤。     

超高龄自发性脑出血临床分析

目的 探讨超高龄自发性脑出血的临床特点、危险因素、治疗方案与疗效.方法 回顾性分析2009年9月至2010年10月收治的35例超高龄(≥80岁)脑出血患者的一般资料、治疗方式、效果及预后.结果 保守治疗31例(88%),开颅手术治疗4例(11%);住院期间并发症发生率97%(34/35),死亡率11%(4/35),其余31例出院时GOS评分2～5分(3.25±1.44).门诊及电话随访3-6个月,死亡6例.结论 超高龄自发性脑出血与非超高龄在出血部位、临床特点、治疗方式等方面有较大的不同,手术指征应个体化设计,治疗方式以保守治疗为主.

Abstract：

Objective To analyze the clinical characteristics, risk factors and therapy of extremely elder patients with intracerebral hemorrhage.Methods The clinical data , therapeutic efficacy and prognosis of 35 extremely elder patients( ≥80 years old) with intracerebral hemorrhage in our hospital from September 2009 to October 2010 were reviewed.Results 31 cases (88%) received conservative treatment, 4 cases( 11% ) received craniotomy.The incidence of complications was 97% (34/35), and the mortality was 11% (4/35).The Glasgow Outcome Scale (GOS) were ranged from 2 to 5 (3.25 ± 1.44) in 31 discharged patients.6 cases were died during follow - up period (3 - 6 months ) .Conclusions Compared with elder patients, the clinical characteristics, site of hemorrhage and therapy of extremely elder patients with intracerebral hemorrhage are specific.For their treatment, conservative method should be prefered.     

Reelin在中枢神经系统进化过程中的作用

目的探讨Reelin在中枢神经系统进化过程中所起的作用及其调节机制。方法取Reelin基因缺失小鼠(Reeler)和野生小鼠(WT),胚龄16d(E16)至出生30d(P30)各年龄点,共192例。利用免疫荧光技术与5’-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)法,检测两组小鼠中大脑皮质、海马、脊髓发育过程中放射状胶质细胞、神经干细胞、增殖细胞及星形胶质细胞的表达,并使用Nissl染色技术,分别对脊髓、海马、大脑皮质的组织学特征进行观察。结果脊髓发育过程中,神经细胞仅发生1次迁移,并形成套层,套层进而衍变成呈H型脊髓灰质。与野生型小鼠相比,同年龄Reelin基因缺失小鼠(Reeler小鼠)在形态结构、细胞迁移方面与野生型小鼠基本类似,但增殖的神经细胞数目明显减少。在第1次迁移的基础上,海马的形成还需经历第2次神经细胞迁移,最终形成了双"C"字型结构的锥体细胞层和颗粒细胞层;与野生型小鼠相比,在形态上Reeler小鼠锥体细胞层明显扩散劈裂为两层,齿状回颗粒层细胞明显增殖并向门区迁移以致颗粒层与门区的界限消失,形成鼓槌状结构;同时,增殖的神经细胞数目减少,放射状胶质细胞排列紊乱。新皮质的形成也需经历两次迁移,但第2次神经细胞迁移所形成的皮质板按照由内向外的迁移方式继续发育为界限清晰的6层结构;与野生型小鼠相比,同年龄点Reeler小鼠新皮质片层化结构紊乱,增殖的神经细胞和放射状胶质细胞数目均有所减少,并且放射状胶质细胞排列紊乱。结论脊髓、海马和新皮质分别代表了进化过程中的管状神经、古皮质和新皮质,Reelin可能是皮质进化的关键分子。Reelin参与了第2次迁移以及新皮质皮质板的继续分层,Reelin缺失可以引起上述皮质形态和结构的变化,尤其是古皮质和新皮质。     

乳头内陷治疗方法的研究进展

乳头内陷是乳房整形外科中常见的疾病之一,其患病率则报道不一,一般为1.7%~10.0%。根据乳头内陷的严重程度通常将其分为轻度、中度、重度。乳头内陷不仅影响美观和哺乳,还可因积垢而造成湿疹、感染、异味等症状。目前,已报道治疗乳头内陷的方法较多,同时还不断有新的方法被采用,现笔者对乳头内陷治疗的常用方法及治疗进展作一综述。     

腹壁浅静脉超回流在单蒂腹壁下动脉穿支皮瓣乳房再造中的作用

目的探究在延期单蒂腹壁下动脉穿支(DIEP)皮瓣乳房再造中预防性使用腹壁浅静脉(SIEV)进行静脉超回流的安全性和有效性。方法回顾性分析2018年5月至2022年8月在中国医学科学院整形外科医院乳腺综合整形科行单蒂DIEP皮瓣延期单侧乳房再造患者的临床资料, 按是否行SIEV-胸廓内静脉远心端吻合分为超回流组和非超回流组。记录SIEV的直径、吻合所需时间, 比较2组的手术总时间、皮瓣缺血时间、住院时间、皮瓣弥漫性淤血率、受区和供区并发症发生率、二次手术率, 计算未进行超回流时皮瓣弥漫性淤血、并发症和二次手术的相对危险度。采用SPSS 24.0软件进行数据分析, 计量资料以±s表示, 组间比较采用独立样本t检验;计数资料用%表示, 组间比较采用χ²检验, P<0.05为差异有统计学意义。结果共纳入患者45例, 非超回流组26例, 超回流组19例, 手术总时间分别为(7.7±1.9)、(8.4±1.5)h, 皮瓣缺血时间分别为(89.5±10.4)、(92.6±12.3)min, 住院时间分别为(6.6±1.8)、(6.6±2.0)d, 差异均无统计学意义(P&...