Tmub1沉默提高Akt蛋白活性促进肝细胞增殖

目的 探讨Tmub1沉默对Akt磷酸化和肝细胞增殖及生长能力的影响.方法 应用RNAi技术对BRL-3A细胞株Tmub1基因进行沉默,采用qRT-PCR和Western blot分别检测Tmub1、Akt、p-Akt、Cyclin D1、c-myc等基因的mRNA和蛋白表达水平;采用平板集落形成实验和CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期.结果 与对照组相比,Tmub1基因沉默后,Cyclin D1和c-myc基因mRNA表达增强(P＜0.05),p-Akt磷酸化水平以及Cyclin D1和c-myc蛋白的表达增高(P＜0.05);BRL-3A细胞的增殖及生长能力增强(P＜0.05);且处于细胞周期S+G2/M期的细胞比例明显增加(P＜0.05).通过MK2206抑制Akt磷酸化后,可显著抑制上述基因的mRNA及蛋白的表达水平,细胞的增殖及生长能力明显降低(P＜0.05),且处于S+ G2/M期的细胞比例下降(P＜0.05).结论 Tmub1沉默通过增加Akt蛋白的磷酸化及Cyclin D1、c-myc的表达水平从而促进BRL-3A细胞的增殖和生长.     

长链非编码 RNALOC100288637在原发性肝癌中差异性表达的生物学意义及相关机制研究

目的：研究长链非编码 RNA （LncRNA ） LOC100288637在肝癌中的表达差异,对肝癌细胞增殖的影响及相关机制。方法分析GEO数据集GSE58043和GSE10694,得出LOC100288637及hsa‐miR‐101‐3p在肝癌组织中差异表达,RNA‐hy‐brid分析LOC100288637与hsa‐miR‐101‐3p的结合具有可能性。逆转录‐聚合酶链式反应在组织和细胞水平检测LOC100288637表达量。荧光原位杂交观察LOC100288637在细胞中的定位。敲低LOC100288637后CCK‐8检测细胞增殖情况。过表达hsa‐miR‐101‐3p后,检测 LOC100288637的变化。结果 LOC100288637在肝癌组织中的表达量高于癌旁组织（ P＜0．05）;LOC100288637在肝癌细胞系中的表达量高于肝细胞系（P＜0．05）。LOC100288637在 HepG2细胞核质均有表达,以细胞质居多。敲低LOC100288637后 HepG2细胞增殖活性降低（P＜0．01）。过表达hsa‐miR‐101‐3p后,LOC100288637表达量下降（P＜0．05）。结论 LncRNA LOC100288637可能在肝癌发生,发展过程中起重要作用并接受hsa‐miR‐101‐3p靶向调控影响肝癌细胞的增殖。     

O连接N-乙酰葡萄糖胺糖基化在正常肝脏及肝脏疾病中的作用的研究进展

O连接N-乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc）糖基化是将O-GlcNAc连接到靶蛋白的丝氨酸或苏氨酸位点上的一种蛋白质翻译后修饰,参与酶活性、蛋白稳定性、转录因子活性、蛋白质的亚细胞定位、分子之间相互作用等的调控。O-GlcNAc糖基化的异常与多种疾病相关,可能是一种全新的疾病治疗靶点。肝脏的生理稳态及各类疾病的发生、发展均与O-GlcNAc糖基化的失调密切相关。基于此,本文对O-GlcNAc糖基化在正常肝脏功能及非酒精性脂肪性肝病、肝细胞癌、肝损伤与再生中的作用的研究进展进行综述,旨在为肝脏疾病的治疗提供新思路。     

常见肝脏外科基础病变与肝再生

<正>正常的肝脏具有较强的再生能力。在急性损伤或肝切除手术后,正常肝脏可以立即进入再生过程,迅速恢复损伤前的肝脏大小、体积和功能。但在遭受严重的慢性肝损伤和纤维化之后,肝脏的再生能力往往受到不同程度的损害。虽然肝再生的研究已经进行了数十年,尤其是针对正常肝脏在肝切除术和药物诱导肝损伤后的再生机制,也有了较多的了解,但对于基础病变条件下的肝再生仍然报道较少。对合并基础病变的肝脏进行治疗是肝脏外科更常见的情况,如肝细胞性肝癌常合并肝硬化,结肠癌肝转     

急性阑尾炎单病种住院总费用的变异性分析

目的探讨不同类型急性阑尾炎单病种在三甲医院住院费用的变动情况,为确定分层社保报销额度提供依据。方法收集四川大学华西医院胃肠外科中心2011年1～4月(单病种收费前)和2012年1～4月(单病种收费后)期间住院手术治疗的所有急性阑尾炎病例,将纳入病例分成低风险组(单纯性、化脓性、坏疽性)和高风险组(穿孔性、脓肿形成、合并妊娠)共6种类型,分析其总住院费用与不同类型的关系以及实行阑尾炎单病种收费后住院总费用的变化情况。结果共纳入90例急性阑尾炎病例,其类型与住院天数和住院总费用均呈显著正相关。低风险组3种类型可控制平均住院总费用在10 000元以内。敏感性分析结果显示,实施单病种收费前,当额定住院总费用上限达6 000元时,按上述风险分组方式即可呈现正相关(r=0.442,P=0.003)。实施单病种收费后同期病例比较,两组住院天数的构成比差异无统计学意义(P=0.108),但住院天数<5天的比例从45%上升至64%,住院天数≥10天的比例从17%下降至4%,住院时间有缩短趋势;两组住院总费用构成比的差异亦无统计学意义(P=0.114),但住院总费用≥9 000元的比例从32%下降到13%,住院总费用有降低的趋势。结论对于在三甲医院住院治疗的急性阑尾炎低风险组病例,以6 000元为额定社保报销限度为宜。而高风险组其住院总费用变异较大,其是否按单病种额定收费以及额定住院总费用如何设定均需进一步研究。实行单病种收费有助于缩短住院时间和降低住院总费用。     

Hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的功能研究

目的 研究环状RNA hsa_circ_0000711在人肝癌细胞系中的表达以及对肝癌细胞生物学功能的影响.方法 利用RT-qPCR检测环状RNA hsa_circ_0000711在肝癌细胞系的表达;通过小干扰RNA特异性敲低hsa_circ_0000711的表达;通过CCK-8实验检测肝癌细胞系的增殖情况;利用流式细胞技术检测细胞周期及细胞凋亡.Western blot检测下调hsa _circ _0000711后Cyclin D1、CDK4、 cleavaed Caspase 3及Bcl-2蛋白的表达水平.结果 Hsa_circ_0000711在肝癌细胞HepG2和SMMC- 7721中明显高表达(P＜0. 05) .与对照组相比,hsa_circ_0000711干扰组的肝癌细胞增殖能力显著降低(P＜0. 05),处于G1期细胞增多(P＜0. 05),且凋亡细胞显著增加(P＜0. 05) .干扰hsa_circ_0000711的表达后,肝癌细胞中Cyclin D1、CDK4和Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P＜0. 05),cleavaed Caspase 3蛋白表达量显著升高(P＜0. 05) .结论 Hsa_circ_0000711可能通过调控细胞周期及凋亡影响肝癌细胞的增殖.     

Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及其机制

目的 探讨Tmub1对再生肝细胞有丝分裂的影响及与securin的相互作用机制.方法 使用40只雌性SD大鼠建立肝大部分切除术后肝再生模型,于术后0、6、12、24、48、72、96、168 h分别取再生肝组织,RT-qPCR和Western blot检测Tmub1和securin在肝再生过程中的mRNA与蛋白表达变化趋势.在大鼠正常肝细胞系BRL-3A中分别建立慢病毒稳定过表达Tmub1、干扰Tmub1和阴性对照组细胞株,用诺考达唑处理获取同步于有丝分裂期的细胞,免疫荧光观察Tmub1过表达组和阴性对照组细胞有丝分裂情况,并用免疫沉淀和Western blot检测Tmub1过表达、Tmub1干扰和阴性对照组BRL-3A细胞中securin的泛素化水平.结果 Tmub1的mRNA和蛋白水平在肝切除术后24、48 h最高,securin的mRNA水平也在48 h最高,而蛋白水平在48 h最低.Tmub1过表达可影响大鼠肝细胞有丝分裂,且securin泛素化水平显著低于阴性对照组(P＜0.01);Tmub1干扰组securin泛素化水平显著高于阴性对照组(P＜0.01).结论 Tmub1可通过抑制securin的泛素化影响大鼠再生肝细胞的有丝分裂.     

浅谈对元宇宙理念促进中国智慧医疗创新发展的思考

元宇宙指数字化虚拟世界和现实世界能够在一定程度上共存共生的数字样态。数字样态与医学科学相嵌相融后形成的智慧医疗理念, 在医学实践、医学教育、医学研究领域, 特别是外科学领域有巨大发展。分析能促进这一发展的主要因素, 其一, 智慧医疗领域元宇宙理念的技术源头为实实在在的人体解剖数字化数据集的生成技术;其二, 智慧医疗领域成功的元宇宙技术产业实践, 符合真实可信的"以人为本, 为人服务"的根本宗旨。