金属离子刺激单核-巨噬细胞核因子κB受体活化子的研究

目的:探讨Cr3+、Co2+对体外培养的小鼠单核-巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性以及刺激单核-巨噬细胞表达核因子κB受体活化子(RANK)在人工关节术后引起骨溶解的分子生物学机制.方法:在体外培养单核-巨噬细胞(RAW264.7).用Co2+、Cr3+分别干预单核-巨噬细胞,不同时间用噻唑蓝(MTT)比色法检测其细胞活性.将细胞分为5组,A组为单纯单核-巨噬细胞,B组为单核-巨噬细胞+500 mg/L Cr2+,C组为单核-巨噬细胞+500 mg/L Cr3+ +20 μmol/L SP600125,D组为单核-巨噬细胞+10mg/LCo2+,E组为单核-巨噬细胞+10mg/LCo2++20 μmol/LSP600125.用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)在24 h、48 h检测各组细胞的RANK mRNA的表达量.结果:与A组相比,B组和D组单核-巨噬细胞的细胞活力明显下降.在24 h、48 h时,Co2+和Cr3+均能刺激单核-巨噬细胞使其细胞RANK mRNA表达量增强(P<0.05),且SP600125可抑制Cr3+、Co2+刺激的单核-巨噬细胞RANK mRNA表达(P<0.05).结论:金属离子对单核-巨噬细胞有细胞毒性,且能够诱导单核-巨噬细胞RANK mRNA的表达,此外JNK通路参与金属离子刺激单核-巨噬细胞表面RANK的表达.     

金属离子刺激单核—巨噬细胞核因子kB受体活化子的研究

摘要：[目的] 探讨Cr3+ 、Co2+对体外培养的小鼠单核/巨噬细胞(RAW264.7) 的细胞毒性以及刺激单核/巨噬细胞表达RANK在人工关节术后引起骨溶解的分子生物学机制。[方法] 在体外培养单核/巨噬细胞(RAW264.7)。用Co2+、Cr3+分别干预单核/巨噬细胞,不同时间用MTT方法检测其细胞活性。将细胞分为5组：A:单纯单核/巨噬细胞; B:单核/巨噬细胞+500 ppm 铬离子;C:单核/巨噬细胞+500ppm铬离子+ 20μΜ SP600125;D:单核/巨噬细胞+10ppm 钴离子;E:单核/巨噬细胞+10ppm 钴离子+ 20μΜ SP600125; 用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法在24h、48h检测各组细胞的RANK mRNA 的表达量。[结果] MTT显示与对照组相比,钴和铬离子都能使单核/巨噬细胞的细胞活力明显下降。在24h、48h时,Co2+ 和Cr3+均能刺激单核/巨噬细胞使其细胞RANK mRNA表达量增强（P<0.05）且SP600125（JNK抑制剂）可抑制钴和铬离子刺激单核/巨噬细胞表达RANK mRNA（P<0.05）。[结论]金属离子对单核/巨噬细胞有细胞毒性,且能够诱导单核/巨噬细胞RANK mRNA 的表达,此外JNK通路参与金属离子刺激单核/巨噬细胞表面RANK的表达。     

Flavopiridol联合顺铂对人U2-OS细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Flavopiridol（FP）联合顺铂（DDP）对人骨肉瘤细胞株（U2-OS）的增殖及凋亡的作用。方法将不同浓度的FP(0、50、100、200、400、1000nmol·L^-1)分别与人U2-OS细胞共同培养24、48h后,采用MTT法检测U2-OS细胞增殖,以确定FP作用48h的半数抑制浓度（IC50）;采用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变;采用流式细胞术测定U2-OS细胞凋亡率。然后将培养后的U2-OS细胞分为4组:空白对照组、单用FP组、单用DDP组、联合用药组（FP+DDP组）,每组设5个复孔,分别加入0.1%DMSO、FP（IC50）、DDP、FP（IC50）+DDP处理,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果 FP对人U2-OS细胞的增殖抑制作用呈现浓度依赖性,作用48h的IC50值为340nmol·L^-1,Hoechst33258染色后细胞出现明显的核固缩、核浓聚等凋亡改变,随着FP浓度的增加,流式细胞术检测细胞凋亡率升高。FP+DDP联合作用于人U2-OS细胞,随着时间的增加抑制率逐渐增大（P<0.05）;与FP和DDP单独用药组比较,抑制率、凋亡率及周期阻滞差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 FP可明显抑制人U2-OS细胞增殖并诱导凋亡,联合顺铂对人U2-OS细胞的增殖抑制及凋亡促进具有协同作用。