游离脂肪酸对THP-1巨噬细胞NALP3炎性通路的影响

目的：探讨NALP3 炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH) 的炎症发 生发展中的可能作用。方法：选择THP-1 构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸干预24 h;用不同浓度 的N- 乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC) 预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸孵育24 h。分别用活性氧(reactive oxygen species,ROS) 指示剂结合流式细胞仪检测THP-1 中ROS 的变化;ELISA 检测细胞上清液中IL-1 的浓 度;免疫荧光技术检测NALP3,caspase-1 蛋白的表达;荧光定量PCR 检测NALP3 蛋白复合体各组分(NALP3, ASC,caspase-1)mRNA 的表达水平。结果：与空白组相比,各棕榈酸组细胞内ROS 增加,NALP3 和caspase-1 蛋 白表达及其分泌IL-1 水平均增加(P<0.05),并随棕榈酸浓度增加而增强;NAC 预处理后,与单纯棕榈酸组相比, 各NAC 组THP-1 产生ROS 水平均下降,同时NALP3 和caspase-1 蛋白表达水平,NALP3 复合体各组分mRNA 水 平及其分泌IL-1 的能力均降低(P<0.05),此抑制作用随NAC 浓度增加而增强。结论：游离脂肪酸可通过产生 ROS 调节巨噬细胞NALP3 炎性小体信号通路的活化引起炎症因子分泌,该通路可能是NASH 的发病机制之一。