纳米短肽系统对子宫损伤高效修复过程的机制研究

【立论依据】 目前,临床上主要依靠清宫术、抗生素抗感染等措施来处理人流损伤,虽然诊疗器械升级快、新药问世频繁,但用于术后子宫康复的有效疗法仍为空白。本方案以“纳米短肽”为平台,探索高效修复子宫损伤的过程及机制,对提供新的临床干预技术和方法意义重大。在子宫损伤修复过程中,生长因子(GF)对内膜再生起重要作用。目前,国内主要研究人流手术方式及镇痛方案,刮宫术后多主张自愈,忽视损伤修复的质量研究。国际较早从GF着手,推动损伤的高效愈合,但传统工艺制备难而价格高、控释靶点不明,能投入相关临床实践的GF及其控释机制探索报道甚少。原因在于:定量调控损伤修复GF方面的研究较少,基础研究如高通量、高纯度GF生产技术没有突破,组织创伤的三维修复研究也不成熟等。D型短肽可自组装成纳米纤维并形成水凝胶,可支持细胞三维生长,还可维持GF及能量物质的缓慢控释。“纳米短肽-兔网织红细胞无细胞蛋白质系统”作为GF制备的新途径前景广阔。 【设计思路】 采用“纳米短肽-Cell free体系”,制备bFGF;利用bFGF修饰短肽,得到纳米网络水凝胶;最后通过SD大鼠子宫损伤修复实验,确认短肽修饰前后的实际效果,洞察其机制并建立“纳米三维微环境-GF损伤快速修复”的假说,为临床应用打下基础。 【实验内容】 (1)利用“短肽-Cell free体系”,制备bFGF。(2)合成、连接、纯化得到含修饰bFGF的纳米短肽。(3)短肽理化检测,自组装效能及GF控释分析。(4)构建SD大鼠子宫损伤模型,评估修复效果,建立数学模型和假说。 【材料】 SD大鼠、新西兰大白兔、PET系列载体、短肽。 【可行性】 目标短肽模板得到国家专利授权,本方案是对其理论和应用的创新。本方案拥有“短肽-Cell free体系”及其相关技术规范。预实验中,动物实验模型损伤修复效果明显。 【创新性】 应用“短肽能量泵”优化“cell-free 体系”,制备GF。采用短肽控释GF,对子宫损伤进行快速修复。将GF制备与子宫损伤修复整合为一套完备的修复策略,在控制炎症反应、减少瘢痕产生、保护子宫上实现突破,国内外尚无报道。     

MLLT1超伸长复合亚基在肝细胞癌发生发展中的作用及其临床意义

目的 探讨MLLT1超伸长复合亚基(MLLT1)在肝细胞癌发生中的作用以及其对肝细胞癌免疫微环境的影响。方法 利用多因素Cox回归分析以及GEPIA、UALCAN等肿瘤基因分析工具，探讨MLLT1基因在不同肿瘤中的表达情况和预后改变；利用Real-time PCR、免疫印迹、免疫组织化学方法探讨MLLT1在肝细胞癌肿瘤组织和正常组织间的表达差异；利用MTT实验、细胞周期实验检测敲低MLLT1对细胞增殖和细胞周期的影响；探讨MLLT1与肿瘤微环境中免疫细胞及免疫浸润的相关性，以及与免疫新抗原、免疫检查点、肿瘤突变负荷和微卫星不稳定性的相关性。结果 MLLT1基因在包括肝细胞癌在内的多种实体瘤中异常表达，敲低MLLT1会抑制肝癌细胞增殖能力并对细胞周期造成阻滞，且MLLT1的高表达与肝细胞癌的不良预后相关。MLLT1的高表达也会影响肝细胞癌中CD4⁺T细胞、中性粒细胞等免疫细胞的浸润。结论 MLLT1在肝细胞癌中高表达，MLLT1能够影响肝癌细胞增殖和破坏细胞周期，并通过影响免疫微环境的稳态在肝细胞癌发生发展中扮演重要角色。     

ATP柠檬酸裂合酶在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探究ATP柠檬酸裂合酶(ACLY)在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用及其对HCC免疫微环境的影响。方法 采用美国阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析网站和肿瘤基因表达谱交互分析数据库在线检索ACLY在癌症基因组图谱数据库收录的不同肿瘤中的表达情况和预后改变，选取HCC为疾病模型，分析ACLY在基因表达数据库HCC标本中的表达情况，并采集HCC患者临床标本在mRNA、蛋白水平进行表达验证；同时在细胞水平敲减ACLY,并利用转录组测序分析差异表达基因，进行细胞增殖实验等功能验证；探讨ACLY与肿瘤微环境中免疫细胞及免疫浸润的相关性，以及与免疫新抗原、免疫检查点基因的相关性。结果 ACLY基因在包括HCC在内的多种实体瘤中高表达(P均<0.05),且ACLY高表达与HCC的总体存活率具有显著相关性(P=0.005)。ACLY的高表达可影响包括肿瘤相关成纤维细胞在内的多种免疫细胞的数量以及脂代谢基因的表达(P均<0.05)。结论 ACLY与HCC的发生发展及脂代谢异常密切相关，并对HCC的免疫微环境造成一定程度的影响。