基于超滤管过滤联合二维液相色谱荧光法测定血浆中替考拉宁游离浓度

目的 建立超滤管过滤联合二维液相色谱荧光法测定血浆中替考拉宁游离浓度的方法,用于临床患者血液中游离低浓度替考拉宁的测定。方法 血浆样本经超滤离心管过滤后,取150μL下层滤液,加入150μL的40%叔丁醇溶液后进样。采用“柱柱”二维模式分离,流动相为水(A,1.0 mmol/L磷酸氢二铵水溶液,磷酸调pH至7.40)、水(B,1.0 mmol/L磷酸氢二铵水溶液,pH为3.00)、乙腈(C),发射波长333 nm,灵敏度设置为“中”,增益为“×4”,柱温为40℃,进样量为80μL。第一维色谱柱为苯基柱SRC,流动相为A∶B∶C=33∶45∶22(V/V/V),流速：0.8 mL/min;第二维色谱柱为C₁₈柱SCB,流动相为A∶B∶C=23∶40∶37(V/V/V),流速1.2 mL/min。结果 替考拉宁在0.5—50.0μg/mL与峰面积线性关系良好(R²=0.999 8),定量限为0.5μg/mL,相对回收率为96.8%—99.7%。日内精密度RSD为0.3%—3.8%,日间精密度RSD为0.3%—3.5%。结论 建立的方法专属性强、操...