高内涵筛选结合活细胞实时成像技术分析谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡

 目的  利用高内涵筛选（high-content screening,HCS)技术结合活细胞实时成像技术研究谷氨酸诱导的小鼠神经瘤母细胞N2a凋亡的形态学变化特征。  方法  用HCS技术分析摸索不同浓度谷氨酸诱导的N2a细胞早期凋亡百分比的变化,同时结合活细胞实时成像技术追踪谷氨酸诱导的N2a凋亡的形态学变化特征。  结果  当谷氨酸浓度为750 μg/mL时,发生早期凋亡的N2a细胞比例达到峰值(42.07%)。对同一谷氨酸浓度,随着拍摄追踪时间的增加,凋亡细胞数目逐渐增多,胞核荧光强度的变异系数逐渐增大,胞核面积逐渐缩小,胞核逐渐出现碎片化。  结论  使用HCS结合活细胞实时成像技术能直观清晰地捕捉谷氨酸诱导N2a细胞凋亡的形态学变化特征,是一种体外追踪单一细胞凋亡形态学变化的可靠方法。该方法也可应用于药物对细胞凋亡的促进或抑制作用的形态学变化特征的研究。     

活细胞成像技术实时追踪荧光蛋白标记的分枝杆菌的胞内增殖

 目的  利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记和活细胞显微成像的方法,实时追踪分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖过程。方法  用经GFP标记的野生型海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,Mm)分别侵染未激活和γ-干扰素激活的巨噬细胞,使用活细胞显微成像系统连续记录胞内分枝杆菌的增殖动态,同时优化不同细胞接种浓度和感染复数(multiplicity of infection,MOI)对胞内菌增殖动态的追踪效果。结果  使用GFP标记和活细胞成像的方法可以实时追踪胞内分枝杆菌的增殖过程和形态学变化。γ 干扰素对Mm在巨噬细胞中的增殖有抑制作用。当接种巨噬细胞浓度为1×105/孔,MOI为1时,可直观清晰地分析实时追踪图像中胞内菌的增殖过程。结论  通过活细胞成像技术分析荧光蛋白标记的分枝杆菌,可实时追踪巨噬细胞内分枝杆菌增殖过程和形态学变化,是一种体外分析胞内分枝杆菌增殖的理想方法,可应用于其他相关病原菌和宿主相互作用及影响因素的研究。     

单核苷酸多态性与原发性肝癌的研究进展

原发性肝癌的发生是一个多因素的复杂的生物学过程,在其发生发展机制的研究中,对宿主遗传易感性的研究越来越受到重视.作为第三代分子遗传标记的单核苷酸多态性,是目前原发性肝癌研究中的一个热点.本文对原发性肝癌易感相关基因的单核苷酸多态性与原发性肝癌的易感相关关系的研究进展进行综述.     

中国云南怒族群体线粒体DNA D环区SNP遗传多态性研究

目的观察怒族群体线粒体DNA单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）的群体遗传特点,为法医学鉴定提供线粒体DNA序列多态性的基础数据,并为研究少数民族起源提供科学依据。方法应用ABI3730型遗传分析仪,PCR产物直接测序法,对87名中国云南怒族无关个体线粒体DNAD环Ⅰ区进行序列分析。结果在mtDNA高变区SNP16028～16362之间与Anderson序列比较,怒族87名无关个体中共检出62个碱基突变SNP位点,突变点492个,59个SNP单倍型。怒族mtDNA两个高变区SNP基因差异度为0.9675,偶合概率为0.0437。结论怒族线粒体DNAD环Ⅰ区SNP具有高度多态性,是对怒族群体的个体识别、亲权鉴定以及民族起源的分子研究有用的遗传标记。