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我们以前的工作表明糖皮质激素(GC)靶细胞上除存在经典的高亲和力、低容量GC受体(GR_H)外,尚存在低亲和力GC受体(GR_L)。GR_L可介导大剂量GC的作用。本文初步探讨了GR_L与GR_H在分子结构以及基因水平上的相互关系。利用两种抗大鼠肝GR_H单克隆抗体(MabN250:为抗GR_H N端免疫活性区的单抗,MabBuGR_1:为抗GR_H DNA结合区的单抗)制备Mab-Sepharose 4 B亲和层析柱,将[~3H]曲安缩酮(TA)与大 相似文献
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目的探究牵张力对3D打印组织血管形成的调控作用及其涉及的分子机制。方法以脐静脉内皮细胞、成纤维细胞为种子细胞, 明胶、透明质酸、纤维蛋白为支架材料, 进行3D打印。以聚己内酯(polycaprolactone, PCL)支架固定打印组织建立牵张力调控血管形成模型。用活/死细胞染色试剂盒检测打印组织内细胞的活性。通过免疫荧光染色CD31观察血管形成, 实时定量PCR检测CDC42表达。结果 3D打印组织培养14 d, 细胞活性为(96.7±0.7)%。与对照组打印组织相比, 牵张力组打印组织血管生长方向与牵张力方向基本一致, 血管分支数量显著减少。进一步研究发现, 牵张力组打印组织CDC42表达显著降低, 用含CDC42激动剂的培养基培养牵张力组打印组织能显著增加血管分支数量。结论牵张力对3D打印组织血管分支形成具有抑制作用, 可能通过下调CDC42表达减少血管分支形成。该研究可能为组织工程皮肤血管化的调控提供有效方法。 相似文献
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大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定 总被引:7,自引:2,他引:5
为了测定糖皮质激素受体的结合参数,以利于今后进步探讨GR改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以「^3H」地塞公为配基,建立了大鼠外周血GR的放射配体结合测定方法。结果Scatchard作图分析「^3H」Dex特异结合呈一直线,表观结合容量和平衡解离常数分别为(3387±328)位点细胞和(2。35±1.13)nmol/L(x±s,n=5),「^3H」Dex特异结合有明显的甾体特 相似文献
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The homogeneity between the high-and low-affinity glucocorticoid receptors(GR_H and GR_L)was testified by immunoaffinity chromatography using Mab N250(recognizing the immunogenic domain at the N terminal of GR_H)and Mab BuGR1(recognizing the DNA binding domain of GR_H).The specific binding peak of 0.98μmol/L[~3H]triamcinolone acetonide(TA)was higher than that of 52.50nmol/L[~3H]TA.The re-sult suggests that the antigenic determinants of GR_L are similar to those of GR_H.ThecDNA of rat liver GR_H was introduced into GR_H-and GR_L-negative mouse fibroblast cellline E82.A3 by calcium phosphate coprecipitation.A number of clones which expressGR_H were selected with G418(400μg/ml).The results of radioligand binding assay indicatethat GR_H gene is expressed successfully and GR_L also may be encoded by GR_H gene. 相似文献
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Studiesonthefunctionandregulationoflow-affinityglucocorticoidreceptor¥LeYingying(乐颖影);XuRenbao(徐仁宝)(DepartmentofPathophysiolo... 相似文献
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目的为了测定糠皮质激素受体(GR)的结合参数,以利于今后进一步探讨GR改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以[3H]地塞米松(Dex)为配基,建立了大鼠外周血GR的放射配体结合测定方法。结果Scatchard作图分析[3H]Dex特异结合呈一直线,表现结合容量(Ro)和平衡解离常数(Kd)分别为(3387±328)位点/细胞和(2.35±1.13)nmol/L(±s,n=5),[3H]Dex特异结合有明显的甾体特异性。结论大鼠外周血白细胞[3H]Dex特异结合部位具备了鉴定受体所必须的基本条件。 相似文献
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本文用Pseudoscatchard分析法测定了对照和烫伤后1、12,24小时大鼠肝胞液糖皮质激素特异结合部位结合参数的变化。与对照组相比,烫伤后1小时,糖皮质激素受体(GR)的结合容量显著减少,烫伤后12小时部分恢复,烫伤后24小时完全恢复。糖皮质激素低亲和力结合部位(LAGS)的结合容量在烫伤后12小时有下降趋势,但t检验与对照组相差不显著。GR和LAGS的解离常数在烫伤后无显著变化。对以上变化的可能病理和临床意义作了讨论。 相似文献
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本文在证实小鼠成纤维细胞系E82.A3无糖皮质激素受体(GR)的基础上,采用磷酸钙共沉淀法,用含大鼠肝GRcDNA的质粒pRGR-Neo转染给E82.A3细胞,并用G418筛选稳定表达细胞,Scatchard分析表明,转化细胞特异性结合[3H]曲安缩酮的结合参数及甾体特异性与经典GR相同,说明所筛选得的细胞确实表达了GR。 相似文献
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为了探讨糖皮质激发低亲和力结合部位(LAGS)介导大剂量糖皮质激素(GC)的效应,本文研究了氢化可的松(F)对原代培养大鼠肝细胞酪氨酸转氨酶(TAT)诱导的量效关系。结果表明,F浓度在1—10nmol/L时,量效关系呈饱和趋势;超过10nmol/L直到10μmol/L,TAT活性又不断上升,这种效应可被糖皮质激素受体(GR)的竞争性拮抗剂RU486完全阻断。提示LAGS也能介导F对TAT活性的诱导。 相似文献