光动力作用对人肝癌细胞HepG2的影响及其机制探讨

目的 研究血卟啉衍生物光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及其机制.方法 应用流式细胞仪分析光动力作用后细胞凋亡及免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2蛋白、bax蛋白表达水平.结果 血卟啉衍生物光动力组人肝癌细胞HepG2凋亡率达(25.28±1.52)%,与对照组相比,差异有极显著意义(P＜0.01);并且光动力作用后凋亡相关蛋白bcl-2表达显著高于对照组(P＜0.05).结论 血卟啉衍生物光动力作用具有诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的生物学效应,而凋亡调控蛋白bcl-2表达水平的降低可能是血卟啉衍生物光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的一个重要机制.     

从PBMCs及CD133免疫磁珠分选获得内皮祖细胞的体外研究

目的：比较从外周血单个核细胞(PBMCs)和CD133免疫磁珠分选体外培养人外周血内皮祖细胞(EPCs)的表型、分化、扩增、功能特点,为EPCs细胞治疗提供临床参考。方法： 健康成年人外周血,经Ficoll密度梯度离心法得PBMCs,经直接接种法或免疫磁珠分选CD133阳性细胞后置于M199培养基中培养,于第7、14 d比较2组细胞表型变化及细胞因子分泌、扩增、体外血管形成及趋化能力。结果：相同血量标本PBMCs组早期集落数高于CD133+组(P<0.01),随着培养时间的推移,流式细胞检测2组细胞均显示造血干细胞标志的表达下调和内皮细胞标志表达上升,但CD133+组内皮标志CD144表达率低于PBMCs组(P<0.01),ELISA法检测到在PBMCs组早期EPCs分泌VEGF的水平高于CD133+组(P<0.01),MTT法显示PBMCs组有较强的增殖能力,基质胶及Transwell实验表明PBMCs组细胞参与血管形成的能力较强。结论： CD133+来源的EPCs分化、分泌、增殖及血管形成能力相对较低,推断PBMCs中CD133-细胞可能在形成功能性的EPCs中发挥更重要的作用。     

FAP-1和RAC-1在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨RAC-1和FAP-1在肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其与肝癌浸润转移之间的关系。方法应用免疫组化SP技术,检测50例肝癌组织中RAC-1和FAP-1的表达,分析其与肝癌侵袭转移之间的关系。结果50例肝癌组织中RAC-1和FAP-1的表达与HCC的Edmondson分级、侵袭转移能力密切相关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关;RAC-1和FAP-1的表达具有高度协同性。结论RAC-1和FAP-1的表达能反映HCC的侵袭转移能力,联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,可以更准确判断HCC的恶性程度和生物学行为。     

避免腹腔镜胆囊切除术中胆管损伤的手术技巧

目的 探讨避免腹腔镜胆囊切除术（LC）中胆管损伤的方法。方法 对2014年1月至2015年12月我院收治的676例施行LC的临床资料进行回顾性分析。手术技巧包括：前哨淋巴结定位识别胆囊动脉、Rouviere沟引导定位、Calot三角360°解剖、胆囊板分离、吸引器冲洗钝性解剖、果断中转开腹等。结果 本组患者无胆管意外损伤。手术时间30～110 min,平均45 min。11例中转开腹手术,其中4例因腹腔粘连严重,2例因Mirizzi综合征,1例因胆囊结肠内瘘,4例因术中冰冻病理检查提示胆囊癌,遂中转开腹行胆囊癌根治术。术中见2例少见副肝管汇入胆囊管。术后无大出血、胆漏或再次手术等。结论 合理应用手术技巧能有效避免LC术中的胆管损伤。     

微RNA在急性胰腺炎中的研究进展

<正>微RNA(microRNA,miRNA)具有高度的同源性和保守型,且表现出组织的特异性表达,在急性胰腺炎的发生、发展和预后中具有重要作用。了解mi RNA在急性胰腺炎中的作用,可为急性胰腺炎的诊断、治疗和预后评估提供新的方向。因此,本文就mi RNA与急性胰腺炎的关系、miRNA在临床诊断和治疗中的应用及展望作一综述。1 miRNA的含义miRNA一般是指由内源基因编码的、长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,最早在线虫中被发现,目前已经被证实存在于大部分的动物中~([1])。     

氯化钴预处理对内皮祖细胞成血管功能的影响

目的:研究氯化钴预处理对培养的内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)体外成血管功能的影响.方法:氯化钴预处理培养的EPC,用MTT和ELISA检测细胞增殖及分泌能力,细胞迁移和基质胶管型实验检测细胞趋化和体外血管形成的功能,Western蛋白印迹检测预处理后EPC相关蛋白的变化.结果:100μmol/L氯化钴预处理6 h可增加EPC分泌,趋化及体外血管形成;氯化钴浓度>400 μmol/L显著降低EPC功能活性;随着氯化钴浓度的增高,BCL-2/BAX比值逐渐降低.结论:氯化钴低浓度短时间预处理可以增强EPC体外成血管功能,而高浓度氯化钴则降低EPC的增殖及分泌能力,可能与EPC促凋亡蛋白上调有关.     

重组Ad⁃CRM8⁃survivin⁃EHV4 TK腺病毒的构建及对肝癌移植瘤的抑制作用

目的：构建含有肝癌特异性的HS?CRM8增强子、survivin启动子及EHV4 TK自杀基因的腺病毒,探讨该重组病毒对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法：构建重组Ad?CRM8?survivin?EHV4 TK腺病毒,获取重组腺病毒。构建裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,给予重组腺病毒结合更昔洛韦（GCV）治疗,2周后观察肿瘤大小。对肿瘤组织切片使用HE染色,观察瘤内细胞坏死情况。结果：裸鼠肝癌移植瘤经腺病毒治疗后,EHV4 TK和GCV+EHV4 TK组肿瘤体积分别为（108.5 ± 18.3）mm3和（37.6 ± 8.7）mm3。GCV+EHV4 TK组与EHV4 TK相比,裸鼠的肿瘤重量减少,生存率提高。HE染色结果显示,GCV+EHV4 TK组肿瘤内出现大量细胞的坏死,而EHV4 TK组肿瘤内仅有少量细胞的坏死。结论：重组肝脏特异性腺病毒Ad?CRM8?survivin?EHV4 TK结合GCV能够有效地在体内促进肝癌细胞的坏死从而抑制裸鼠移植瘤的生长,对肝癌的治疗有良好的效果。     

Isolation of cultured endothelial progenitor cells <Emphasis Type="Italic">in vitro</Emphasis> from PBMCs and CD133<Superscript>+</Superscript> enriched cells

Two isolation methods for sorting of endothelial progenitor cells(EPCs):from peripheral blood mononuclear cells(PBMCs)and CD133+ enriched cells were compared,by defining the cell morphology,phenotype,reproductive activities and function in vitro,to provide a reference for clinical application of EPCs.PBMCs from healthy subjects were used either directly for cell culture or for CD133+ sorting.The two groups of cells were cultured in complete medium 199(M199)for 7 to 14 days and the phenotypes of EPCs were an...