竹荪多糖与多西紫杉醇联用抗肺癌效应及机制研究

目的探讨竹荪多糖与多西紫杉醇（DOC）在肺癌治疗中的协同效应及机制。方法40只C57小鼠构建路易斯肺癌（LLC）荷瘤C57小鼠模型,分别采用竹荪多糖组分ZSP1（ZSP1组）、DOC（DOC组）、ZSP1+DCC联用（联用组）及0.9%氯化钠注射液（对照组）,每组10只,在建模当天开始腹腔注射治疗,第10、12、15天时检测肿瘤体积,并采用流式细胞术检测小鼠外周血及脾中髓源抑制性细胞（MDSC）的比例。另用Toll样受体素4（TLR4）基因敲除C57小鼠（TLR4KO组）和野生型C57小鼠（WT组）构建LLC荷瘤模型,采用实时荧光定量PCR检测MDSC中IFN-γ、IL-12、CXCL-9和CXCL-2mRNA表达水平,Westernblot法检测IL-12蛋白表达水平。结果与对照组相比,ZSP1组、DOC组和联用组小鼠的肿瘤体积在第10、12、15天均明显为小（均P＜0.01）;TLR4KO组较WT组小鼠的肿瘤体积在第10、12天均明显为小（均P＜0.01）;第12、15天联用组小鼠的MDSC比例均明显低于对照组、ZSP1组和DOC组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;与WT组相比,TLR4KO组IFN-γ、IL-12和CXCL-9mRNA表达水平均明显增加（均P＜0.01）,IL-12蛋白表达水平有所增加。结论DOC与竹荪多糖联用抗肿瘤效果优于单用,其作用机制与下调荷瘤小鼠外周血中MDSC比例有关,其作用受体可能为TLR4。竹荪多糖与DOC联用可以上调IL-12的转录水平和表达水平。     

MSC联合磁流体热疗治疗肺癌的实验研究

目的 探讨磁流体热疗与MSC对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用。方法 体外制作FMNP-MSC;建立肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,等肿瘤直径长至约4mm时,将FMNP-MSC通过小鼠尾静脉注射到体内。注射后1周,在交变磁场下热疗,每周1次,时间30min,连续4周,光纤测温检测肿瘤温度的变化,每周测量瘤体的长径和短径变化。治疗4周后,球取血观察白细胞变化,离断法处死小鼠,取出肿瘤组织,称取瘤重;光镜观察各组肿瘤组织病理学变化,Western blot法检测FMNP-MSC热疗后凋亡蛋白（Bax、caspase-3）、抗凋亡蛋白（Bcl-2）的表达。结果 MSC可以将FMNP携带至肿瘤区域,小鼠的白细胞无明显变化,在交变磁场的作用下可以升温至53℃,荷瘤小鼠肿瘤体积和重量增长受到明显抑制。病理观察可见肿瘤细胞大片凋亡和坏死样改变。Western blot法检测证实Bax蛋白在两个治疗组明显表达。结论 MSC可以将FMNP携带到小鼠皮下移植肿瘤区域,在交变磁场作用下升温至有效温度,小鼠肿瘤的生长受到明显抑制,肿瘤组织呈凋亡和坏死样改变,可能是通过增加Bax的表达来实现的。     

G0S2基因在NSCLC中的表观遗传性改变

目的 检测G₀S₂基因在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的甲基化率及表达量,并探讨其成为NSCLC早期诊断和预后预测特异性分子标志物的可能性。方法 采用焦磷酸测序法测定组织细胞中G₀S₂基因甲基化率,荧光定量PCR测定组织细胞中G₀S₂基因mRNA的表达量,根据NSCLC患者的人数平均分为两组后,cut-off值为0.2,以此分为G₀S₂基因高表达组与低表达组,并对G₀S₂基因表达量的影响因素进行单因素分析,并分析该基因表达量与患者预后之间的关系。结果 在NSCLC患者中G₀S₂基因存在高甲基化率（40%）,并且该基因在正常组织中的表达量与肿瘤组织中的表达量比较差异有统计学意义（P=0.000）;在单因素分析中发现NSCLC患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤的病例类型、分期分级对G₀S₂基因的表达量均无明显影响（P>0.05）;G₀S₂基因的表达量与NSCLC患者的预后无明显相关性（P>0.05）。结论 检测G₀S₂基因的表达情况对NSCLC患者早期诊断有一定的作用,但在后续指导肺癌分期、预测患者预后等方面无明显参考价值。