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κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱(CDP-胆碱)。结果表明:250mL摇瓶中加入50mL反应液(葡萄糖400mol/L,CMP10mmol/L,磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L,MgSO410mmol/L,pH=8.0),固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下,反应4h后补加400mmol/L葡萄糖,反应8h可使60%以上的CMP转化为CDP-胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I(NAD^ )后,固定化细胞可连续使用4次,CDP-胆碱转化率维持在40%以上。 相似文献
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在枯草芽孢杆菌突变株D-756发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能促进菌体的生长,显著地提高D-核糖的产量。经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活。在5L发酵罐中,利用葡萄糖酸维持发酵pH值在7.2,培养72h后产核糖76.8g/L。 相似文献
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利用κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶包埋的固定化啤酒酵母细胞,由腺苷(AR)生产三磷酸腺苷(ATP)。采用HPLC法分析固定化细胞反应过程核苷(酸)的变化以及用琼脂糖平板电泳法对其工艺条件进行了优化。固定化细胞反应1h,ATP转化率接受100%。底物溶液灭菌和添加NAD^+后,该固定化酵母细胞可反复使用12次,ATP的转化率稳定维持在95%以上。 相似文献
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胞苷生产菌的选育及发酵 总被引:1,自引:0,他引:1
目的选育胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌,提高胞苷发酵单位,并对间歇补料分批发酵方式进行了初步研究。方法(1)以胞苷脱氨酶缺失枯草芽孢杆菌CDS36为突发菌株,对其进行紫外诱变,经6-杂氮尿嘧啶(6AU)、5-氟胞苷(5FCR)等进行定向抗性筛选;(2)采用间歇补料分批发酵,葡萄糖初始浓度10.0%,48h后补加10.0%,72h补加5.0%的补料方式培养,并测定发酵单位。结果(1)通过紫外诱变和抗性筛选得到了6-杂氮尿嘧啶、5-氟胞苷抗性的突变株CDS36—800—17,抗6-杂氮尿嘧啶和5-氟胞苷的临界浓度分别为1000mg/L和800mg/L;(2)通过间歇补料分批发酵方式发现培养96h,胞苷发酵单位可达4.86g/L,培养120h可达5.58g/l,比未经补料分批发酵时提高了20.0%。结论(1)筛选获得胞苷发酵单位较高的突变株CDS36—800—17,并具有较好的遗传稳定性,可稳定发酵;(2)间歇补料分批发酵方式可提高胞苷产量。 相似文献
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酶法合成核苷类抗病毒药物 总被引:14,自引:0,他引:14
综述了近几年酶法合成核苷类抗病毒药物的研究进展,主要包括苷磷酸化酶、N-脱氧核糖转移酶的应用,以及应用一麦进行糖或碱基的修饰等方面。 相似文献
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将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量表达N-脱氧核糖转移酶II。在此酶作用下,以5-杂氮胞嘧啶和脱氧胸苷为底物,生成胸腺嘧啶和目标产物5-杂氮-2’-脱氧胞苷。最佳反应条件为:底物浓度均为2 mmol/L, 20 mmol/LTris-HCl缓冲液(pH为7.1), 相似文献