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目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定.方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOS cDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,制备逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS;经病毒包装细胞包装后抗性筛选出产高滴度病毒的细胞株,用高滴度病毒上清感染CHO细胞,抗性筛选出稳定表达细胞株.将CHO-ICOS细胞和PBMC以不同比例(1:1、1:2、1:5、1:10)共培养,加入亚刺激剂量(200 ng/ml)的抗人CD3抗体,采用3H-TdR掺入法检测PBMC的增殖,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD25表达情况,并以CHO-pMSCV细胞和PBMC以 1:1比例共培养作为阴性对照以及未处理的PBMC作为空白对照.结果:成功构建逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS,筛选出稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株.3H-TdR掺入法和流式细胞仪检测结果表明,与阴性对照及空白对照相比,CHO-ICOS细胞与PBMC共培养能抑制CD3抗体诱导的PBMC增殖及活化(P<0.05或P<0.01),细胞比例为1:1时抑制率最大,分别为(68±5.9)%、(44.08±3.26)%.结论:成功建立具有生物学活性的膜稳定表达人ICOS蛋白的CHO细胞株,为今后研究奠定了基础. 相似文献
2.
目的分析临床不同疾病程度慢性乙型肝炎(CHB)患者和正常对照者外周血辅助性T细胞17(Th17)的比例和其效应分子白细胞介素17(IL-17)水平的变化与疾病严重程度、乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量、肝脏损伤标志物等的关系,以进一步证实Th17细胞在CHB患者疾病进程中的作用。方法应用流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测93例CHB患者(其中轻度21例、中度37例、重度35例)和28名正常对照者外周血Th17细胞比例、血清IL-17水平,纯化CD4+T细胞经功能性抗CD3、抗CD28抗体刺激后IL-17和维甲酸相关孤儿核受体C(RORC)mRNA表达水平,纯化CD4+T细胞刺激后培养液中IL-17水平。比较和分析上述检测数据在各组间的统计学差异及与HBV DNA载量、肝脏损伤标志物等的关系。结果与正常对照组相比,CHB组外周血Th17细胞比例明显升高,且随着疾病的加重,Th17细胞的比例也随之上升。CHB重度组Th17细胞比例、IL-17和RORC mRNA表达水平显著高于中度组、轻度组和正常对照组(P0.05),各组间血清IL-17水平差异无统计学意义(P0.05);CHB组纯化CD4+T细胞刺激后培养液中IL-17水平显著高于正常对照组(P0.05);CHB重度组培养液IL-17水平明显高于中度组和轻度组(P0.05)。CHB组外周血Th17细胞比例与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈明显正相关(P0.01),而与血清HBV DNA载量无相关性。结论 CHB患者体内增高的Th17细胞可能是造成肝脏炎症、肝细胞损伤的主要原因之一,并与CHB的重症化密切相关。 相似文献
3.
目的对苏州市吴江区第五人民医院便携式血糖仪的临床使用进行质量检测和管理,规范血糖仪的质量管理体系。方法对便携式血糖仪进行品牌内一致性评价、稳定性评价及正确性验证。科室检测人员参加全院的培训学习,参加苏州市检验中心室间质量评价,与未参加室间质量评价的科室仪器比对验证正确度。结果 3家参加品牌内一致性评价的便携式血糖仪,检测结果一致性较高。对选择的1家公司提供的10台便携式血糖仪进行检测后稳定性评价合格,与生化仪比对结果后验证合格。参加苏州市检验中心便携式血糖仪室间质量评价3年,结果均合格,以此为标准比对在用其他血糖仪时除一台不合格遭淘汰其余均合格。结论经过几年的各项严格管理,各科室间的便携式血糖仪检测结果具有了可比性,管理质量有了显著提高,收效明显。 相似文献
4.
目的 探讨肿瘤标志物CA125和CA153对乳腺癌诊断和疗效监测的价值.方法 采用电化学发光法对乳腺癌170例、乳腺良性疾病102例及健康体检者153例的血清进行CA125和CA153联合检测,并对乳腺癌80例术后第3天、1周、2周和1个月的CA125和CA153的水平进行监测.应用ROC曲线对各指标进行分析.结果 乳腺癌组CA153、CA125均明显高于乳腺良性疾病组与正常对照组(P <0.05);CA153、CA125两项联合检测,其灵敏度为79.41%、准确度为87.53%、阴性预测值为87.13%,与单项指标比较差异均有统计学意义(P<0.05).CA153、CA125两项肿瘤标志物单独检测时,CA153的ROC曲线下面积(AUC)为0.823较CA125大;两项联合指标的AUC达0.876,大于各单项肿瘤标志物(P<0.05).结论 CA153、CA125是乳腺癌的肿瘤相关性标志物,CA153对于乳腺癌的诊断价值更大.两项指标联合检测优于单一的肿瘤标志物检测,可提高诊断乳腺癌的正确性.CA153、CA125亦可用于乳腺癌患者术后疗效的观察. 相似文献
5.
目的探讨肝素、EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝血浆标本用于化学发光法定量检测乙肝标志物的可行性。方法采用博阳生物科技LICA系列光激化学发光免疫测定系统,分别对81例体检人员3种不同类型抗凝血浆和血清标本行乙肝标志物5项定量检测。结果肝素抗凝血浆的HBsAg、HBsAb定量检测结果均高于血清标本检测结果 ,差异有统计学意义(P﹤0.05)。EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝血浆的HBsAg定量检测结果均高于血清标本检测结果 ,差异有统计学意义(P﹤0.05)。在其余检测项目上差异无统计学意义(P﹥0.05)。按照阴阳性判断标准,3种抗凝血浆的HBsAg阳性率均高于血清标本,本文中肝素抗凝血浆HBsAg阳性率差异有统计学意义(P﹤0.05),其余未检测到显著差异(P﹥0.05)。结论乙肝检测中,HBsAg的检测是重点,若运用抗凝血浆检测时,当其出现S/CO值在1~10之间的阳性结果 ,应当想到很有可能是抗凝血浆导致的假阳性结果。因此在乙肝标志物检测中,对于抗凝血浆的运用,一定要慎重。 相似文献
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目的探讨稀释法消除溶血对凝血检测结果影响的可行性。方法选取外观正常凝血标本65例,取35例标本血浆2倍稀释后与未稀释血浆检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)值,统计学线性分析并建立直线回归方程。另30例标本注射器反复抽吸使其溶血后,溶血前后凝血检测结果行统计学分析;并对溶血后标本2倍稀释,稀释后结果通过回归方程换算出的结果与溶血前原检测结果进行比较。结果标本稀释前后血浆的PT和APTT两项指标检测值具有线性相关特征。溶血前后两项指标测定结果显示:溶血后测定值高于溶血前,差异有统计学意义(P<0.01)。溶血标本2倍稀释后两项指标检测值经过回归方程换算后所得数据与未溶血的原检测数据相比并无显著统计学差异(P>0.05)。结论临床上对于溶血标本PT和APTT的检测,采用稀释法后能较好消除溶血对检测结果造成的影响。 相似文献
7.
目的检测卵巢癌患者血清人附睾蛋白4(HE4)、可溶性间皮素相关蛋白(SMRP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)的表达水平,并对四项标志物单独和联合检测结果进行统计比较,探讨它们在卵巢癌诊断中的临床应用价值。方法收集65例卵巢癌患者和70例健康体检者空腹静脉血清,ELISA法检测HE4、SMRP,化学发光法检测CEA、CA125。结果与健康对照组相比,卵巢癌组血清HE4、SMRP、CEA、CA125表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。HE4、SMRP诊断卵巢癌的敏感度较高,其中HE4明显高于CEA,差异有统计学意义(P0.05);CA125、HE4诊断特异度较高,均明显高于SMRP,差异有统计学意义(P0.05);准确度检测中,各指标间差异无统计学意义(P0.05),其中HE4和CA125诊断准确度高于其他指标。CA125与HE4组合联检时,敏感度提高,差异具有统计学意义(P0.05),但同时特异度明显降低(P0.05);CA125、HE4、SMRP三项组合联检时,敏感度得到更大提高(P0.05),达到78.46%,特异度较CA125单独检测仍有降低,但差异无统计学意义(P0.05);同时准确度得到了提高,高达80.74%;CA125、HE4、SMRP、CEA联合检测各项诊断效率指标变化均无统计学意义(P0.05)。结论联合检测CA125、HE4以及SMRP能有效提高单独检测时卵巢癌的诊断效率指标,临床工作中将HE4、CA125、SMRP这几项标志物进行联合检测有助于卵巢癌的筛查和早期诊断。 相似文献
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目的 通过检测肿瘤型M2丙酮酸激酶(TuM2-PK)、细胞角蛋白18(CK18)-3A9和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达水平,评价其在NSCLC中的诊断价值。方法 收集67例NSCLC患者(NSCLC组),72例肺部良性疾病患者(良性组)和75健康体检者(对照组)的血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TuM2-PK和CK18-3A9水平,采用电化学发光法检测CYFRA21-1水平。结果 与对照组及良性组比较,NSCLC组TuM2-PK、CK18-3A9和CYFRA21-1水平明显升高(P<0.05)。单一指标检测时,TuM2-PK、CK18-3A9的敏感性明显高于CYFRA21-1(P<0.05),CYFRA21-1的特异性明显高于TuM2-PK、CK18-3A9(P<0.01)。3项指标联合检测,其敏感性和准确性均高于单独检测CYFRA21-1(P<0.05);3项指标联合检测,其敏感性、特异性和准确性均高于单独检测TuM2-PK和CK18-3A9(P<0.05)。结论 TuM2-PK、CK18-3A9和CYFRA21-1联合检测可有效提高NSCLC诊断的敏感性和准确性。 相似文献
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正成人Still病又称为成人斯蒂尔病(AOSD),临床主要表现为发热、关节痛、咽痛、皮疹、肌肉酸痛等并伴白细胞、粒细胞增高。因无特异诊断标准,故易误诊。本文就2014年收治的1例成人Still病进行病例回顾,共同学习一些具有临床意义的检测指标及治疗方案,旨在提高对该病的确诊率和治愈率。1病例资料患者,女,28岁。于2014年4月4日出现恶寒、发热,体温 相似文献
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目的通过检测巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)和CA19-9在胰腺癌患者血清中的表达水平,并结合经典标志物CA19-9的联合检测结果,评价其在疾病中的临床诊断价值。方法收集86例胰腺癌患者和90例健康体检者血清,速率法检测恶性肿瘤生长因子(TSGF),化学发光法检测CA19-9,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MIC-1表达水平。结果胰腺癌患者血清中,3项肿瘤标志物检测结果均较健康对照组明显上升。单一标志物检测时,MIC-1的敏感性明显高于CA19-9,差异有统计学意义(P0.05),CA19-9的特异性明显高于其余两项指标,差异有统计学意义(均P0.05)。将MIC-1与CA19-9联合检测,较单独检测CA19-9,敏感性得到提高,差异有统计学意义(P0.05),将TSGF与CA19-9联合检测时,虽较单独检测CA19-9,其对胰腺癌诊断的敏感性有提高,但差异无统计学意义(P0.05)。当将3项指标进行联合检测时,较单独检测CA19-9,联合检测对胰腺癌诊断的敏感性及准确性均得到提高,差异有统计学意义(P0.05),特异性有提高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 MIC-1与CA19-9联合检测可以提高CA19-9诊断胰腺癌的敏感性,提高MIC-1诊断的特异性;而将MIC-1、TSGF、CA19-9联合检测时,则不仅提高了CA19-9诊断的敏感性,还提高了其诊断胰腺癌的准确性。因此,将此3项肿瘤标志物联合检测可有效提高胰腺癌的诊断效率。 相似文献