血管紧张素Ⅱ受体在肾上腺产醛固酮腺瘤中的表达研究

目的：研究血管紧张素Ⅱ受体AT1R和AT2R在肾上腺产醛固酮腺瘤（APA）中的表达.方法：通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测50例APA及瘤旁组织和12例正常肾上腺组织中AT1R和AT2R mR-NA表达,采用免疫组织化学染色方法检测组织石蜡切片中AT1R和AT2R蛋白表达情况.结果：AT1R在腺瘤、瘤旁及正常肾上腺组织中的表达无明显差异.AT2R在APA组织中的表达低于正常肾上腺组织（P〈0.05）.将AT2R mRNA表达量与患者临床数据作相关性分析,提示AT2R的表达与患者血浆醛固酮浓度负相关（r=-0.467,P〈0.05）,与血浆肾素活性正相关（r＝0.604,P〈0.05）.结论：AT2R表达下调可能与肾上腺产醛崮酮腺瘤原发性醛固酮增多症的发病相关.     

醛固酮腺瘤模型大鼠主动脉平滑肌细胞增殖与mdm2和p53的表达

目的 初步探讨肾上腺醛固酮腺瘤血管重构的机制.方法 将微量渗透泵植入大鼠皮下,随机分为对照组、腺瘤组、腺瘤+依普利酮组和腺瘤+肼苯哒嗪组.8周后检测主动脉平滑肌细胞的增殖状态和mdm2、p53的表达.结果 ①成功建立大鼠醛固酮腺瘤模型;②与对照组相比,腺瘤组大鼠主动脉平滑肌细胞增生活跃(P＜0.05);MDM2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05);而p53只在蛋白水平增加(P＜0.05);③相较于肼苯哒嗪,依普利酮能抑制醛固酮的作用(P＜0.05).结论 醛固酮通过诱导mdm2表达而逆转p53的细胞周期阻滞作用,促使平滑肌细胞增殖,可能是醛固酮腺瘤血管重构的原因之一.     

内皮素-1在醛固酮增多症大鼠模型肾脏纤维化过程中的作用及其意义

目的：观察内皮素-1（endothelin-1,ET-1）在醛固酮增多症大鼠肾脏中的表达情况,初步探讨临床上原发性醛固酮增多症术后持续性高血压的机制。方法：将SD大鼠随机分成三组,每组8只。采用经微量渗透泵持续释放给药的方式建立醛固酮大鼠模型。其中醛固酮组持续泵入醛固酮（1μg／h）;醛固酮＋螺内酯组除泵入等量醛固酮外,每日行螺内酯灌胃（100mg·kg^-1·d^-1）;对照组仅泵空白溶剂。尾套法监测大鼠血压。4周后处死所有大鼠,测定血钾、钠、醛固酮浓度及血浆肾素活性。分别采用HE及Masson染色观察肾组织形态学改变及纤维化情况,采用RT—PCR及免疫组织化学方法检测肾皮质ET-1的表达及定位。结果：成功建立醛固酮增多症大鼠模型,醛固酮组血压2周后明显升高,血钾下降,呈现低肾素、高醛固酮特征,与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）。醛固酮组肾组织形态学观察可见明显纤维化,ET-1表达明显高于对照组（P〈0．01）。螺内酯可抑制醛固酮的上述效应（P〈0．01）。结论：醛固酮可能通过上调ET-1的表达,促进肾脏纤维化,造成肾脏不可逆性损害,其可能是临床上原发性醛固酮增多症术后持续性高血压的机制之一。     

自拟六君子解毒汤治疗HBeAg阴性乙型肝炎病毒携带者45例临床分析

目的探讨六君子解毒汤治疗HBeAg阴性乙型肝炎病毒携带者的临床疗效。方法将90例HBeAg阴性乙型肝炎病毒携带者随机分为观察组和对照组各45例,观察组采用六君子解毒汤治疗,对照组采用叶下珠片治疗,比较两组临床疗效及不良反应。结果治疗48周后观察组总有效率86.66%,对照组为40.00%,两组比较有显著性差异(P<0.05),两组患者的体质与治疗前比较,均有明显改善(,P<0.05);观察组与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论六君子解毒汤能改善HBeAg阴性乙型肝炎携带者的病理体质,明显降低其HBV-DNA载量,值得临床推广。     

Fibulin-5表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨fibulin-5表达在膀胱尿路上皮癌中的影响作用. 方法 经尿道切除获取膀胱尿路上皮癌标本20例,其中低级别(G_1和G_2)13例、高级别(G_3)7例.蛋白质印迹法检测fibulin-5在膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜组织中的表达.将PCR扩增的fibulin-5 cDNA克隆到pMD-19T载体中,构建p-EGFP-fibulin-5质粒.脂质体介导法将p-EGFP-fibulin-5质粒转染到人膀胱癌5637细胞株内,流式细胞仪分选,经G418筛选形成稳定的表达克隆.Boyden小室法检测未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞迁移和侵袭能力. 结果 正常膀胱黏膜、低级别和高级别膀胱尿路上皮癌组织中fibulin-5蛋白相对表达量分别为1.16±0.28、0.57±0.32和0.44±0.42.与正常膀胱黏膜相比,膀胱癌组织中fibulin-5蛋白表达显著下调(P<0.01),低级别和高级别癌之间差异无统计学意义(P>0.05).转染成功的膀胱癌5637细胞显示绿色荧光.未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞的迁移细胞数分别为136.9±5.7、139.3±7.7和127.6±3.1,侵 袭细胞数分别为31.7±4.7、31.5±4.8和8.05±3.1.转染fibulin-5后膀胱癌细胞侵袭力明显降低 (P<0.01),其迁移力虽低于对照组但差异无统计学意义(P>0.05). 结论 Fibulin-5蛋白表达减 少可能是膀胱癌发生和发展的机制之一,过表达fibulin-5可以抑制膀胱癌细胞侵袭力.     

醛固酮对大鼠主动脉bax基因表达的影响

目的 研究醛固酮对大鼠主动脉bax基因表达的影响.方法 32只SD大鼠随机分为空白对照组、腺瘤组、腺瘤+依普利酮组和腺瘤+肼苯哒嗪组.在每只大鼠皮下埋植的微量渗透泵内注入空白溶剂或醛固酮.8周后通过免疫组化、RT-PCR和Western 印迹检测主动脉bax基因的表达.结果 与对照组相比,腺瘤组大鼠主动脉bax mRNA和蛋白表达都显著上调(P＜0.05);依普利酮能够抑制醛固酮对bax基因的诱导作用(P＜0.05);而肼苯哒嗪虽然可以使大鼠收缩压下降,但不能阻止醛固酮对bax基因的作用.结论 醛固酮通过诱导bax基因表达,调节血管平滑肌细胞凋亡和干预细胞周期进程,可能是其导致血管重构的机制之一.     

Fibulin-5过表达对膀胱癌细胞增殖的影响

目的 观察Fibulin-5对膀胱癌细胞增殖的影响.方法 采用脂质体介导法将构建好的p-EGFP-N1-Fibulin-5表达载体转染到膀胱癌5637细胞中.通过噻唑蓝(MTT)比色法和细胞计数法检测Fibulin-5表达上调后膀胱癌细胞生长率的变化.结果 酶切鉴定及DNA测序结果显示Fibulin-5 cDNA插入正确;转染48 h后,观测到p-EGFP-N1-F5表达载体转染成功的细胞均有不同程度的绿色荧光表达.培养第7天,MTT法测得转染Fibulin-5、转染空载体和未转染的膀胱癌细胞的吸光值分别为0.330±0.025、0.640 ±0.030和0.72±0.060.绘制生长曲线发现转染Fibulin-5的膀胱癌细胞的生长率明显低于转染空载体(P＜0.05)和未转染的细胞(P＜0.05).细胞计数结果和MTT一致.结论 Fibulin-5可能通过抑制膀胱癌细胞的增殖而在膀胱癌中起抑癌基因的作用.     

Aortic Cell Apoptosis in Rat Primary Aldosteronism Model

This study aimed to determine whether aldosterone could induce vascular cell apoptosis in vivo.Thirty-two male rats were randomly divided into 4 groups:vehicle(control),aldosterone,aldosterone plus eplerenone or hydralazine.They were then implanted with an osmotic mini-pump that infused either aldosterone or the vehicle.Systolic blood pressure(SBP) was measured weekly by the tail-cuff method.After 8 weeks,plasma aldosterone concentration(PAC) and renin activity(PRA) were determined by radioimmunoassay.Aorti...