肾细胞癌中WNK2基因甲基化状态与mRNA表达的研究

目的 探讨WNK2基因在肾细胞癌(RCC)发生及发展中的作用.方法 选取2016年5月至2017年6月本院的肾肿瘤患者58例,分别应用甲基化特异性PCR(MSP)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其RCC及相应癌旁组织、正常组织标本中WNK2基因甲基化状态和mRNA表达情况.结果 在58例RCC组织、癌旁组织...     

肾细胞癌中DACT2基因启动子区甲基化状态与mRNA表达的研究

目的 探讨DACT2基因在肾细胞癌(RCC)发生、发展中的作用.方法 收集该院2014年8月至2015年8月59例住院RCC患者肾癌根治术后RCC及相应癌旁组织、正常组织标本,分别应用甲基化特异性PCR(MSP)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测其DACT2基因甲基化状态、mRNA表达情况,应用免疫组织化学过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)法检测其细胞质内β-catenin蛋白的表达,并分析RCC组织DACT2基因甲基化状态及mRNA表达与临床病理特征的关系,以及DACT2基因甲基化与mRNA及β-catenin表达的关系.结果 RCC组织中DACT2 mRNA相对表达水平(0.427±0.025)明显低于癌旁组织(0.801±0.047)和正常组织(0.872±0.022),RCC组织中DACT2基因甲基化阳性率(45.76%)明显高于癌旁组织(6.78%)及正常组织(5.08%),差异均有统计学意义(P<0.05),而癌旁组织与正常组织比较差异均无统计学意义(P>0.05).在RCC组织中DACT2基因mRNA相对表达水平及启动子区甲基化发生率与患者的年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、Fuhrman分级等临床资料间均无明显相关性(P>0.05).甲基化组中DACT2基因的mRNA相对表达水平低于非甲基化组,差异有统计学意义(P<0.05).RCC组织中β-catenin蛋白在细胞质中的表达率高于癌旁组织和正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),且DACT2基因甲基化与β-catenin蛋白表达呈正相关(r=0.324,P=0.012).结论 DACT2基因启动子区甲基化及其mRNA相对表达水平降低可能参与RCC的发生,但与RCC的临床进展无关,DACT2基因启动子区发生甲基化可能是引起其mRNA相对表达降低的原因之一,且肾癌组织DACT2基因甲基化的发生可能与β-catenin的高表达有关.     

阴茎恶性黑色素瘤1例报告

阴茎黑色素瘤临床少见。本文报道1例,患者因阴茎外伤20个月,发现阴茎肿物14个月入院,行阴茎肿物切除＋左侧腹股沟淋巴结活检术,病理示阴茎恶性黑色素瘤,左侧腹股沟淋巴结转移。后行双侧髂腹股沟淋巴结清扫术,病理示双侧髂腹股沟淋巴结转移。术后行帕博利珠单抗治疗17个周期。术后随访22个月,未出现疾病进展。     

铁死亡相关蛋白SLC7A11及GPX4在肾细胞癌中的表达及意义

目的:探讨SLC7A11及GPX4在肾细胞癌及正常肾组织中的表达差异,初步分析SLC7A11及GPX4的表达情况与肾癌预后之间的关系。方法:采用免疫组化方法检测SLC7A11及GPX4在肾癌及正常肾组织中的表达,同时分析SLC7A11及GPX4表达水平与肾癌患者临床病理参数的相关性。采用Spearman法分析SLC7A11及GPX4之间表达的相关性,利用Kaplan-Meier生存曲线及Cox回归方法分析SLC7A11,GPX4表达的高低及临床因素对肾癌患者预后产生的影响。结果:SLC7A11及GPX4在肾癌中为高表达,而在正常肾组织为低表达（P<0.05）,SLC7A11及GPX4蛋白表达与肾癌大小、远处转移及临床分期密切相关,SLC7A11与GPX4之间呈正相关(r=0.583,P<0.01)。在肾癌组织中,SLC7A11,GPX4表达阳性的患者与阴性表达的患者相比预后较差（P<0.05）。多因素分析提示肾癌大小、远处转移、临床分期、SLC7A11及GPX4是影响肾癌预后的独立因素。结论:SLC7A11及GPX4在肾癌中高表达,可能参与了肾癌的发生,SLC7A11或GPX4高表达的肾癌患者预后不良,未来可能成为肾癌治疗新靶点。     

河北医科大学第四医院前列腺癌患者的基线特征与生存分析

背景与目的：近年来，前列腺癌发病率逐年增高，但前列腺癌筛查工作仍不全面，国内前列腺癌数据库也相对匮乏。分析河北医科大学第四医院前列腺癌患者的基线特征、治疗以及生存情况等数据，为河北及周边地区前列腺癌的诊治提供参考。方法：回顾性分析2008年1月—2018年12月在河北医科大学第四医院泌尿外科就诊的857例前列腺癌患者信息，分析初次就诊时非转移性（M ₀ ）和转移性（M ₁ ）前列腺癌患者的基线特征、治疗方案和生存情况。对随访数据采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，并用log-rank检验比较两组之间生存率差异。结果：纳入基线统计的患者共计857例，中位年龄71岁，797例存在前列腺特异性抗原（prostate-specific antigen，PSA）记录，689例存在Gleason评分记录。412例M ₀ 患者和445例M ₁ 患者中，PSA≥100 ng/mL的患者分别占11.1%（44/397）和57.3%（229/400），Gleason评分≥8分的患者分别占46.9%（166/354）和63.9%（214/335）。纳入随访分析的患者共计606例，患者生存395例，死亡211例，其中182例死于肿瘤进展。M ₀ 和M ₁ 患者5年生存率分别为63.2%（76/120）和41.3%（102/247），M ₀ 和M ₁ 患者的中位生存期分别为85和 47个月（P＜0.01）。此外，在所有采用传统内分泌治疗［雄激素剥夺治疗（androgen deprivation therapy，ADT）或联合雄激素阻断治疗（combined androgen blockade，CAB）］的M ₁ 患者和高危转移性激素敏感性前列腺癌（metastatic hormone-sensitive prostate cancer，mHSPC）患者中，中位PSA进展时间（time to PSA progression，TTPP）分别为18和17个月。内分泌治疗初诊M ₀ 患者的中位TTPP为25个月。12例影像学检测未发现远处转移的去势抵抗性前列腺癌（non-metastatic castrate-resistant prostate cancer，NM-CRPC）患者，中位无转移生存期（metastasis-free survival，MFS）仅为16个月。结论：前列腺癌患者的年龄、PSA及Gleason评分偏高，多数患者在治疗时有转移，5年生存率偏低，因此应重视和加强前列腺癌的筛查工作。在接受内分泌治疗的M ₁ 患者进展为转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castrate-resistant prostate cancer，mCRPC）的时间较短，此外，接受内分泌治疗的M ₀ 患者进展至NM-CRPC后，进展为mCRPC或死亡的时间也非常短，未来对于M ₁ 和NM-CRPC患者应采取更为积极的治疗，以延缓病情进展到mCRPC阶段。     

瞬时受体电位类香草醛5和骨桥蛋白在泌尿系统结石患者中的表达及其与微小RNA-22-3p的关系

目的检测瞬时受体电位类香草醛5(TRPV5)和骨桥蛋白(OPN)在泌尿系统结石患者中的表达及其与微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)的关系。方法荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测健康体检者、非泌尿系统结石患者和泌尿系统结石血清TRPV5、OPN和miR-22-3p表达并分析其相关性。将模型+miR-con组(转染miR-con)、模型+miR-22-3p组(转染miR-22-3p)转染至HK-2细胞并草酸钙结石晶体溶液(100 mg/L)处理。流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测抗裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析联合SNK-q检验。采用Pearson相关性分析法分析相关性。结果与健康体检者或非泌尿系统结石患者比较,泌尿系统结石患者血清TRPV5和miR-22-3p表达显著降低(TRPV5分别为0.66±0.15、1.06±0.26、0.77±0.21,miR-22-3p分别为0.62±0.18、1.00±0.23、0.83±0.19),OPN表达显著升高(2.78±0.49、1.07±0.21、1.60±0.20),差异有统计学意义(F=43.908、300.788、41.410,P<0.05)。泌尿系统结石患者血清中miR-22-3p的表达量与TRPV5的表达呈正相关(r=0.52,P<0.05),与OPN的表达呈负相关(r=-0.69,P<0.05)。与对照组比较,模型组HK-2细胞中TRPV5和miR-22-3p表达显著降低(TRPV5为0.43±0.07比0.98±0.10,miR-22-3p为0.72±0.16比1.01±0.13),OPN表达显著升高(3.24±0.36比1.02±0.12),差异有统计学意义(t=13.517、75.794和17.551,P<0.05),细胞凋亡率[(17.37±2.09)%比(3.78±0.49)%]、cleaved Caspase-3(0.42±0.06比0.19±0.05)和bax(0.68±0.07比0.28±0.06)蛋白质表达均显著升高,bcl-2蛋白表达显著降低(0.14±0.03比0.31±0.05),差异有统计学意义(t=21.431、17.233、13.655、31.782,P<0.05)。与模型+miR-con组比较,模型+miR-22-3p组细胞上述检测指标均发生显著的负向调控。结论TRPV5和OPN在泌尿系统结石患者中的表达与miR-22-3p存在明显的相关性。     

LncRNA GATA2-AS1在肾癌组织中的表达及其对肾癌细胞ACHN恶性生物学行为的影响

目的:检测长链非编码RNAs(lncRNAs)GATA2-AS1在肾细胞癌(RCC)组织及肾癌细胞株中的表达,并探讨其表达与患者临床病理资料之间的相关性。研究过表达GATA2-AS1对肾癌ACHN生物学行为及上皮间质转化(EMT)进程的影响。方法:应用实时荧光定量多聚核苷酸酶链式反应(RT-qPCR)检测GATA2-AS1在71例肾细胞癌组织和与其相对应癌旁正常组织以及肾癌细胞株(786-O、ACHN)中的表达。通过建立过表达载体pcDNA3.1-GATA2-AS1并转染ACHN细胞,应用RT-qPCR法检测转染效率。应用细胞增殖实验(MTS)、克隆形成实验检测GATA2-AS1过表达对ACHN细胞体外增殖能力的影响。应用划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测GATA2-AS1过表达对ACHN细胞体外迁移能力及侵袭能力的影响。应用RT-qPCR法检测GATA2-AS1过表达对EMT进程中相关标志物(E-cadherin、N-cadherin及Vimentin)表达水平的影响。结果:GATA2-AS1在两株肾癌细胞系中相对表达量均明显下调(P<0.01),其中ACHN细胞...     

长链非编码RNA LOC100130476在肾细胞癌的表达及启动子区甲基化状态

目的∶探讨LOC10130476 在肾细胞癌（renalcell careinoma,RC）中的表达及启动子区甲基化状态。方法∶应用RT-qPCR 和甲基化特异性 PCR（methylation-specific PCR,MSP）检测 RCC中LOC100130476的表达及启动子区甲基化状态,并分析与临床病理资料的关系;DNA甲基转移酶抑制剂（5-Aza-dC）干预后的肾癌细胞系中,采用RT-qPCR 检测 LOC100130476 的表达及甲基化状态。结果;RT-gPCR显示,LOCI00130476在RCC组织的表达明显低于正常组织（0.593±0.306w1.000±0.018,t=-11.143,P<0.001）,并与淋巴结转移（t=2.774.P=0.007）及临床分期（F=5.436,P=0.002）相关。L.OCI00130476 在3株肾癌细胞系（A498、ACIIN,786-O）的相对表达量均低于对照组（HK-2）（F=107.068,P<0.001）。5-Aza-dC处理后,LOCI00130476 的表达均增高。MSP显示.RCC组织的甲基化率明显高于正常组织（x=33.273,P<0.01）,并与淋巴结转移有关（y=4.250,P=0.039）;3株肾癌细胞系经5-Aza-dC处理后,A498、786-0 中 LOC100130476 甲基化消失,ACHIN 中 LOC100130476 甲基化降低,3种细胞中LOCl00130476 非甲基化增高。结论;LOCl00130476在 RCC中低表达,并呈高甲基化状态,其高甲基化可能是肾癌发生发展的分子机制之一。