宫内发育迟缓出生后追赶生长大鼠脂肪组织LRP6/β-catenin通路表达变化

目的：探讨宫内发育迟缓出生后追赶生长（CG-IUGR）大鼠脂肪组织低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）/β-联蛋白（β-catenin）通路表达变化。方法：随机将SD孕鼠分为两组,一组孕鼠全程限食喂养,生产后通过减少喂养子鼠数量,建立子鼠CG-IUGR模型（CG-IUGR组）;另一组孕鼠正常喂养,生产的子鼠作为对照组。为排除性别因素的干扰,CG-IUGR组和对照组均选取雄性子鼠。CG-IUGR组和对照组在12周龄时进行葡萄糖耐量试验,并取肾周脂肪组织标本,通过苏木素-伊红染色观察脂肪结构,共聚焦显微镜下观察脂肪组织LRP6、β-catenin及胰岛素受体底物1（IRS-1）的免疫活性,蛋白质印迹法检测LRP6、β-catenin、IRS-1蛋白表达。结果：CG-IUGR组在60?min时血糖浓度及曲线下面积均大于对照组（均P<0.05）,表明CG-IUGR组葡萄糖耐量受损。CG-IUGR组脂肪细胞面积较对照组增大,脂肪组织中LRP6、β-catenin和IRS-1免疫活性较对照组降低（均P<0.05）。结论：CG-IUGR大鼠脂肪组织胰岛素抵抗可能与LRP6/β-catenin通路表达下调有关。     

利用Cre/loxP系统构建胰岛α细胞特异性敲除血管紧张素转换酶2基因的小鼠模型

目的构建α细胞特异性血管紧张素转换酶2(ACE2)敲除小鼠模型, 为研究胰岛α细胞ACE2功能提供基础。方法利用Cre/loxP系统, 将雌性ACE2loxP/WT与雄性Gcg-cre+/-小鼠进行交配, 取鼠尾组织, 通过PCR法鉴定子代基因型。选取基因型为ACE2loxP/y Gcg-cre+/-的雄性小鼠为实验所需要构建的模型小鼠(αACE2KO小鼠)。采用免疫荧光和免疫组织化学法检测ACE2表达。采用独立样本t检验。结果免疫荧光分析提示, 在Gcg-Cre小鼠胰岛中, (55.14±25.33)%的α细胞表达ACE2, 然而αACE2KO小鼠胰岛α细胞中未检测到ACE2表达(t=14.202, P<0.01), 同时αACE2KO小鼠的肝、肾、肺、心和骨骼肌中仍然表达ACE2。结论成功利用Cre/loxP原理特异性敲除α细胞ACE2, 为研究胰岛局部α细胞ACE2功能提供动物模型和基础。