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目的:探讨兔肌源性干细胞(MDSCs)的分离及特征和表型研究。方法:取1.5月龄新西兰兔大腿肌肉,采用差速贴壁分离Preplate技术,分别用Ⅺ胶原酶、dispase蛋白酶以及胰蛋白酶分步消化肌肉,并用差速贴壁法分离晚期贴壁的细胞,流式细胞仪(FCM)、免疫细胞化学以及Western blotting等检测初步确定细胞表型。结果:进行连续6 d的差速贴壁分离。第3 d开始得到较多量的圆形或短梭形细胞,簇样生长,体积明显小于骨骼肌细胞及其它杂细胞,10 d左右汇合,有极强的融合生长倾向。细胞在汇合度<30%传代可较好地保持原形态,流式细胞仪检测示MDSCs>80%为desmin+,>70%为Bcl-2+,>95%为CD45-,免疫细胞化学定性示desmin+。Western blotting检测显示随着细胞的纯化,α-SMA表达越来越弱。而细胞高汇合度(>50%)或低血清培养时极易融合成肌管或肌细胞链,skeletal myosin+。结论:MDSCs具有desmin、Bcl-2高水平表达和CD45极低水平表达的特性,具有多向分化能力的MDSCs是组织工程研究的一种新型种子细胞。 相似文献
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目的 探讨不同伤口负压治疗模式联合自体脂肪微粒移植在糖尿病足足部创面修复中的应用效果。方法 选取72例糖尿病足患者,将患者随机分为观察组和对照组,每组36例。常规手术清创后,两组患者均行自体脂肪微粒移植,在此基础上,对照组行负压封闭引流治疗,观察组行负压辅助闭合治疗,均持续治疗至出院,并于治疗结束后随访3个月。比较两组患者的临床疗效、换药次数、创面愈合时间和住院时间。结果 观察组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组的换药次数少于对照组,创面愈合时间和住院时间均短于对照组(均P<0.05)。结论 负压辅助闭合联合自体脂肪微粒移植在糖尿病足足部创面修复中的疗效确切,可缩短患者住院时间,减少换药次数,有利于创面的快速愈合,并促进患者恢复。 相似文献
3.
目的探讨反鼓取皮筛状移植治疗大面积皮肤软组织挫裂伤的临床效果。方法将13例大面积皮肤软组织挫裂伤患者的皮肤组织瓣用鼓式取皮机反鼓切取制成筛状中厚自体皮,立即封闭创面,观察术后恢复情况并进行随访。结果13例患者中11例Ⅰ期愈合,1例有少量点状皮肤坏死,换药2周后愈合,1例少量补充(0.5%)植皮愈合。移植皮肤质地2~3个月后柔软,功能基本恢复。结论大面积皮肤软组织挫裂伤的皮瓣反鼓取皮筛状移植操作相对方便,省时省力,节省皮源,成活率高,功能与外形恢复较满意。 相似文献
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肌源性干细胞分离培养及诱导分化为平滑肌细胞的研究 总被引:2,自引:11,他引:2
目的探讨兔肌源性干细胞分离、鉴定及诱导分化为平滑肌细胞的方法。方法取1.5个月龄新西兰兔大腿肌肉,采用Preplate技术分离培养肌源性细胞,并进行流式细胞仪(FCM)、免疫细胞化学、Western blot等确定细胞表型。采用添加血管内皮生长因子(VEGF)和与兔阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)共培养的方法诱导分离而得的细胞分化为平滑肌细胞并运用免疫细胞化学和Western blot检测特异性α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)的表达。结果经过连续6d的差速贴壁分离得小圆形或短梭形的小体积细胞,FCM结果显示这些细胞〉80%为desmin+,〉70%为bcl-2^+,〉95%为CD45^-。免疫细胞化学定性结果显示desmin+。高汇合度(〉50%)或低血清培养时容易融合形成肌管或肌细胞核链。诱导处理后分离的细胞表达α—SMA。结论采用Preplate技术能很好地分离出肌源性干细胞,并能在体外诱导分化为平滑肌细胞,为组织工程提供种子细胞。 相似文献
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组织工程尿道在裸鼠皮下的埋置 总被引:1,自引:0,他引:1
背景:由于创伤、先天畸形、肿瘤或手术继发的尿道缺损、狭窄、憩室等病理状况下,需要采用自体组织修复其缺损。
目的:验证构建组织工程化尿道的可行性。
设计、时间及地点:观察性实验,于2005-01/2006-01在中山大学林百欣医学研究中心完成。
材料:雄性新西兰兔10只,体质量3.0~3.5 kg,用于制备脱细胞尿道;4~6周龄BALB/cA-nude裸鼠20只,体质量18~20 g,与细胞外基质材料复合体进行体内培育。
方法:取新西兰兔完整尿道,脱细胞后形成细胞外基质材料,切取成体新西兰兔阴茎头约1/2大小,组织块法培养扩增兔平滑肌细胞;之后将尿道海绵体平滑肌细胞种植到脱细胞尿道基质上,将其植入裸鼠背部皮下进行培育。实验分为2组,实验组埋置细胞材料复合体,对照组埋置未接种细胞的单纯脱细胞尿道基质。
主要观察指标:植入后1,2,4,6,8周取材,行大体和组织学及电镜观察细胞材料复合体的生长情况,免疫组织化学鉴定平滑肌细胞的表达。
结果:①大体观察裸鼠背部切口愈合良好,饮食活动正常。植入后1,2周实验组脱细胞基质表面已有少量的组织膜形成; 4周组织膜逐渐增厚,有小血管长入;6,8周脱细胞基质材料逐渐被新的细胞替代。②苏木精-伊红染色可见,随着时间延长,脱细胞材料逐渐被吸收,被各种细胞代替。其中平滑肌细胞最多,并可见大小不等的血管长入基质,部分有形成血窦的倾向;提示复合材料在裸鼠体内逐渐形成类似正常尿道的组织结构。③电镜观察从第4周有血管长入基质,可见较多的平滑肌细胞和内皮细胞及少量的成纤维细胞和巨噬细胞,并有部分平滑肌细胞凋亡。④α-平滑肌肌动蛋白抗体进行免疫组织化学染色后可见有平滑肌细胞生长。
结论:采用组织工程技术可再造出类似于正常尿道的海绵体组织。 相似文献
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家庭对儿童心理卫生发育的影响因素调查 总被引:2,自引:0,他引:2
调查300名儿童心理卫生发育的影响因素,结果表明:独生与非独生儿童的心理卫生状况无显著差异,家庭环境、父母文化程度、职业及对子女的管教方式等对儿童的心理卫生发育有一定影响。 相似文献
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目的:对MEEK植皮在大面积烧伤肉芽创面中的应用进行分析和探讨。方法整群选取该院2013年5月—2015年3月收治的34例大面积烧伤患者,随机分为观察组和对照组,观察组患者接受MEEK植皮技术的治疗,对照组患者接受微粒皮移植技术的治疗,对比应用效果。结果观察组患者植皮存活率为94.12%,高于对照组患者的76.47%,平均手术时间、愈合时间、住院天数均显著优于对照组患者,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论MEEK植皮在大面积烧伤肉芽创面中的应用效果显著,可有效抓住早期结痂机会、缩短愈合时间。 相似文献