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1.
中国汉坦病毒H82O5株G2糖蛋白基因的克隆及在真核细胞中的瞬时表达 总被引:2,自引:1,他引:1
从感染病毒乳鼠脑组织提取总RNA,采用RT-PCR和分子克隆技术将扩增到的G2糖蛋白基因插入含CMV启动子的pcDNA3.1/His质粒载体中,通过脂质体介导转染COS-7细胞,用SDS-PAGE、Western-blot及IFIA方法分别测定表达产物的相对分子量及特异性。结果证明获得正向插入的G2-pcDNA3.1/His重组表达质粒,表达产物的相对分子量为56ku,与理论预期大小一致,并且可与汉坦病毒H8205株的腹水抗体起特异反应。表明构建的G2-pcDNA3.1/His重组质粒所表达的蛋白为中国汉坦病毒株特有,能在哺乳动物细胞中表达并具有抗原性,重组质粒可应用于汉坦病毒的DNA疫苗研究。 相似文献
2.
目的采用分光光度法测定人RBC谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)活性,研究196名(男101名,女95名)健康汉族人的GSTs活性分布。方法制备人RBC裂解后,参照Habdous等的方法测定GSTs活性。反应体系如下:0.1 mol.L-1磷酸钠缓冲液(pH 6.5)2.6 mL,RBC裂解液0.1 mL,30 mmol.L-1谷胱甘肽0.1 mL,10 mmol.L-11-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)0.1 mL。结果方法的日内和日间精密度均<10%。RBC GSTs活性呈正偏态分布,196例健康汉族人的平均GSTs活性为(3.89±0.96)U.(gHb)-1。不同年龄组平均GSTs活性无差异,而女性的平均GSTs活性比男性的平均值高,但并不显著。结论确定了可供临床参考的健康汉族人GSTs活性分布范围。 相似文献
3.
目的研究补充鱼油制剂对哮喘患者运动诱发性支气管痉挛的预防作用。方法本研究为随机、双盲、安慰剂对照、二阶段交叉试验,入组的18例有运动诱发性哮喘发作病史的哮喘患者随机分为两组,分别服用鱼油或安慰剂胶囊,补充鱼油组予鱼油胶囊2.0,3次/d(治疗组,n=9),安慰剂组予相应数量的相同外观的胶囊口服(安慰剂组,n=9),治疗3周。于试验前及治疗后行运动前及运动后的肺功能(FEV1、FVC、FEV1/FVC)、诱导痰细胞分类计数、前炎症细胞因子白三烯C4(LTCA)及前列腺素D2(PGD2)的测定。经过2周的药物清洗期后进入第二阶段试验,两组对象交叉服用另一种胶囊,治疗3周后重覆第一阶段的检查。结果服用安慰剂患者全部出现运功诱发性哮喘,而补充鱼油患者肺功能均有所改善,未出现运动性哮喘。同时,补充鱼油患者运用支气管舒张剂频率减少(P〈0.05)。与服用安慰剂相比,补充鱼油后运动前后诱导痰中性粒细胞、嗜酸性粒细胞百分比以及LTC4、PGD2浓度均显著下降(P〈0.05)。结论补充鱼油制剂对有运动诱发性哮喘病史的哮喘患者可降低气道炎症反应,并有预防运动诱发性支气管痉挛的作用。 相似文献
4.
目的:探讨粘着斑激酶(FAK)在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性及表达变化。方法:同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测肺高转移性涎腺腺样囊性癌(SACC-LM)及涎腺腺样囊性癌(SACC)83细胞系中FAK mRNA和蛋白表达;同时测定FAK酶活力。所得实验数据采用SPSS12.0统计软件进行,t检验进行组间比较。结果:SACC-LM细胞中的FAK活性为(18.320±2.050)pmol·min~(-1)·μg~(-1),SACC-83细胞中的FAK活性为(0.873±0.091)pmol·min~(-1)·μg~(-1)。与SACC-83细胞相比,SACC-LM细胞中FAK具有较高的活性(t=13.865,P<0.01)。FAKmRNA在SACC-LM细胞中的表达量为0.883±0.052,明显高于其在SACC-83细胞中的表达量(0.637±0.081,t=4.952,P<0.05)。在SACC-LM细胞中FAK蛋白的表达高于在SACC-83细胞中的表达。结论:FAK蛋白活性变化及蛋白表达与SACC的侵袭有关。 相似文献
5.
目的探讨骨科手术切口感染的相关因素,为制定预防措施提供理论依据。方法回顾性分析2015年3月-2016年12月在医院接受治疗的185例骨科手术患者的临床资料,观察切口感染率,分析不同临床特征患者切口感染率的差异,分析影响切口感染的相关因素。结果 185例骨科手术患者发生切口感染28例,感染率为15.14%;肥胖、糖尿病史、手术部位位于腰腹以下及下肢、术前合并感染、术前未应用抗菌药物、手术时间≥150min、有气管插管和转入ICU的骨科手术患者切口感染率较高;将患者术后是否出现切口感染作为因变量,以患者的肥胖、糖尿病史、手术部位、术前合并感染、术前应用抗菌药物、手术时间、有气管插管、转入ICU作为自变量,进行多因素Logistic回归分析,结果显示,术前合并感染、手术部位位于腰腹以下及下肢、手术时间≥150min是患者术后发生感染的相关因素,其OR值分别为5.39、6.06、2.79。结论骨科手术患者切口感染率较高,术前是否合并感染、手术部位以及手术时间是影响患者术后发生感染的独立相关因素,可为临床预防提供参考。 相似文献
6.
目的构建能表达结核分枝杆菌早期分泌蛋白CFP10-ESAT6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌。方法采用基因拼接(Gene SOEing)法体外扩增结核杆菌1hp-ESAT6融合基因,插入大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pB-CG3000,构建重组穿梭表达质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,构建耻垢疫苗株Msmc2155-CFP10-ESAT6,热诱导表达CFP10-ESAT6融合蛋白,Western blot分析其免疫原性。结果经PCR、酶切及测序鉴定,证实成功构建重组质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,并在耻垢分枝杆菌中经热诱导表达出分子质量单位约为22 ku的CFP10-ESAT6蛋白,该蛋白可被结核病患者血清、鼠抗ESAT6血清和鼠抗CFP10血清识别。结论结核分枝杆菌lhp-ESAT6融合基因在耻垢分枝杆菌中成功表达。 相似文献
7.
脑出血后凝血酶的作用与抗凝血酶治疗 总被引:19,自引:0,他引:19
文章介绍了凝血酶的结构、其在中枢神经系统产生和代谢特征、在脑出血后脑水肿形成中的重要作用及其可能机制,内源性和外源性凝血酶抑制剂.脑出血抗凝血酶治疗用药的初步临床试验结果。随着凝血酶在脑出血后作用研究的深入.抗凝血酶治疗可能是防治出血性脑损伤最有希望的措施之一。 相似文献
8.
目的 构建携带炭疽芽孢杆菌保护性抗原(PA)的两种穿梭载体与上游强启动子。方法 将解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶启动子克隆到载体pblueseript—sk(+)上,构建载体pBLKSP;以A16R疫苗株(Tox+,Cap-,弱毒株)DNA为模板,设计合成内外侧引物巢式PCR扩增获得保护性抗原(PA)的全基因,先克隆到载体pBLKSP,再将其和质粒PUB110重组构建成两种穿梭载体。结果 酶切鉴定显示所切下的片段大小均与预计相符。测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论 成功构建了带有强启动子的两种穿梭载体。为在无毒炭疽疫苗株中的高效表达和炭疽芽孢杆菌的分子疫苗研究奠定了基础。 相似文献
9.
目的:检测黏着斑激酶(FAK)及细胞外信号调节激酶(ERK)在涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞系SACC-LM和SACC-83中的表达,探讨其与SACC肺转移发生的关系。方法:选择停止在G1/S期的SACC-LM和SACC-83细胞,测定其细胞内FAK和ERK酶活力,采用Western blotting方法检测SACC-LM及SACC-83细胞中FAK及ERK蛋白表达,对其结果进行量化分析。结果:FAK及ERK在SACC-LM细胞中的活性均高于SACC-83细胞(P<0.01),SACC-LM细胞中FAK酶活性与ERK酶活性呈正相关关系(r=0.62,P<0.05)。Western blotting方法检测到在SACC-LM细胞中两种蛋白的表达水平均高于在SACC-83细胞中的表达水平(P<0.05)。结论:FAK及ERK可能参与了SACC的发生发展过程和转移信号转导通路,FAK及ERK蛋白表达变化与SACC的转移行为有关。 相似文献
10.
目的:光子中医信息疗法是融入中医信息调制技术的一种新疗法,本文研究了利用该疗法进行术后康复的可行性。方法:光子中医信息疗法治疗前后,采用热辐射断层扫描成像(TTM)系统,进行机体的热辐射状况观测对比试验。结果:试验表明光子中医信息疗法具有即时双向调节血液循环和机体代谢的作用,可调节免疫功能和内分泌功能,实施中医经络辨证施治的治则,具有泻实补虚、平衡阴阳的功效。结论:光子中医信息疗法对肿瘤术后康复具有整体治疗效应。 相似文献