308nm准分子激光对角质形成细胞分泌细胞因子的影响

目的探讨308nm准分子激光对人角质形成细胞(HKC)增殖及分泌细胞因子的影响。方法CCK-8法检测不同剂量准分子激光照射后12h及24h对HKC增殖的影响;ELISA法检测细胞培养上清液中干细胞生长因子(SCF)、集落细胞生长因子(GM-CSF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的浓度;DNA Ladder法检测准分子激光照射后HKC晚期凋亡情况。结果细胞活力与照射剂量呈负相关,照射后12h的细胞活力与24h相比差异有显著性(P=0.001);308nm准分子激光剂量在100～300mJ/cm2时,HKC分泌SCF,GM-CSF,bFGF的增加呈剂量依赖性,与对照组(0mJ/cm2)比较差异有显著性(P<0.001),6h后分泌的SCF,GM-CSF,bFGF开始增加,24h后达到峰值。准分子激光照射可诱导HKC出现晚期凋亡。结论308nm准分子激光可能通过诱导角质形成细胞分泌SCF,GM-CSF,bFGF等促进黑素细胞增殖分化的细胞因子,使白癜风皮损复色。     

单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录子蛋白读码框2真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达

目的:克隆单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录子蛋白读码框2(LAT ORF2)基因,构建真核表达载体并在真核细胞中表达,用于进一步研究LAT介导的HSV-2潜伏及激活感染机制. 方法：以构建成功的pVAX—LAT重组质粒为模板,根据GenBank中HSV-2 LAT ORF2基因的核苷酸序列设计引物,并在引物的5'端分别引入Kpn I和Pst I酶切位点.用PCR特异性扩增LAT基因ORF2片段,PCR产物纯化回收后经Kpn I、Pst I双酶切,再次回收后产物与同样经双酶切的pcDNA 6／myc—His B质粒进行连接,Amp抗性筛选阳性重组子．双酶切及测序鉴定连接产物.在脂质体介导下瞬时转染Vero细胞,用RT-PCR及SDS-PAGE检测其在Vero细胞中的表达. 结果：重组质粒经Kpn I和Pst I双酶切获得预期大小的两条片段,测序表明ORF2正确,RT-PCR及SDS-PAGE显示转染了重组质粒的Vero细胞内有目的基因及其编码蛋白的表达. 结论：成功构建了ORF2-pcDNA 6／myc-His B重组质粒,并可在Veto细胞内有效表达.     

308nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡的研究

目的:探讨308 nm准分子激光对T淋巴细胞直接和间接诱导凋亡的作用及转化生长因子β1(TCF-β1)在诱导T淋巴细胞凋亡中的作用.方法:308 nm准分子激光分别照射角质形成细胞和体外分离的活动期白癜风患者外周血T淋巴细胞;ELISA检测照射后24h及48 h角质形成细胞培养上清中的TGF-β1浓度;流式细胞仪检测照射后48 h的T淋巴细胞凋亡情况;建立Transwell细胞共培养系统(角质形成细胞位于上室,T淋巴细胞位于下室),308 nm准分子激光照射Transwell上室,照射后48 h检测T淋巴细胞凋亡情况;照射前加入不同浓度的抗TGF-β1抗体(25、250、2 500 pg/L),于照射后48 h采用流式细胞仪分别检测T淋巴细胞凋亡情况.结果:308 nm准分子激光诱导角质形成细胞分泌TGF-β1的增加呈剂量依赖性;流式细胞仪检测结果显示:准分子激光可直接诱导T淋巴细胞凋亡;准分子激光照射Transwell上室可间接诱导T淋巴细胞凋亡;照射前加入抗TGF-β1抗体.可抑制308 nm准分子激光的诱导凋亡作用.结论:308 nm准分子激光直接照射可诱导T淋巴细胞凋亡,也可作用于角质形成细胞间接诱导T淋巴细胞凋亡.TGF-β1在308 nm准分子激光诱导T淋巴细胞凋亡中起重要作用.     

308 nm准分子激光联合吡美莫司乳膏治疗儿童白癜风的疗效观察

目的 评价308 nm准分子激光联合吡美莫司乳膏治疗儿童白癜风的疗效及不良反应。 方法 随机选取49例皮损对称的稳定期儿童白癜风患者，采用自身对照方法，将对称的皮损随机分成A、B两组，A组：给予准分子激光照射，每周2次，疗程15周，联合外用吡美莫司乳膏，每日2次；B组：单独给予准分子激光照射，每周2次，疗程15周。分别于准分子激光治疗第15次及30次后进行疗效评价。结果 30次治疗结束后，A组显效率为77.1%，有效率为89.6%，B组显效率为52．1%，有效率为75.0%，A组有效率及显效率均显著优于B组（P ＝ 0.048，P ＝ 0.040）。两组不同部位皮损疗效比较，仅面部皮损予以联合治疗后显效率及有效率显著优于单用准分子激光治疗（P = 0.004）。结论 308 nm准分子激光对儿童白癜风是一项安全、有效的治疗方法，联合应用吡美莫司乳膏能增加面部皮损疗效。     

第一讲色素性皮肤病的概述与分类

色素增加性皮肤病是一类常见的有碍美容的色素障碍性疾病，可由遗传、环境等因素引起，常影响患者的自信心、外在形象及社交等，多数求治心切。因其存在普遍性，应广大读者要求，我刊特邀广州军区总医院皮肤科杨慧兰主任等专家撰文进行专题讲座，就色素增加性皮肤病的病因、发病机理和临床经验及目前的治疗进展等进行深入讨论，欢迎广大读者来信来函交流。相关章节具体如下： 第一讲：色素性皮肤病的概述与分类；第二讲：黄褐斑的治疗；第三讲：雀斑的治疗；第四讲：色素细胞性肿瘤；第五讲：色素性皮肤病的鉴别诊断；第六讲：色素性皮肤病的治疗及进展；第七讲：激光在色素性皮肤病中的应用；第八讲：常见色素增加性皮肤病的中医诊治；第九讲：色素增加性皮肤病激光治疗后的护理。[编者按]