脊髓损伤后凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达及意义

目的:观察探讨大白鼠脊髓损伤后细胞凋亡及调控基因Bcl-2、-Bax的表达及意义.方法:28只SD大鼠随机分为7组,Allen‘s法致伤脊髓,于术后4、8、24、48、72、168h采集脊髓标本,1组作为对照组,分别行HE染色、TUNEL染色和免疫组化技术检测Bcl-2、Bax的表达.结果:TUNEL染色显示有神经元和胶质细胞凋亡.Bcl-2在术后4h开始出现阳性表达,24h达高峰.Bax术后4h出现阳性表达,8h时达高峰.结论:脊髓损伤后存在神经元和胶质细胞的凋亡,Bcl-2、Bax基因对调控细胞凋亡可能具有重要作用.     

大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的光镜和电镜观察

目的：观察大白鼠脊髓损伤后细胞凋亡现象及超微结构特点，方法：48只SD大鼠为分两组，Allen's法致伤脊髓（轻度损伤和中度损伤），分别于术后4、8、24、48、72、168h处死，采集脊髓标本，应用HE、TUNEL当色进行光镜和电镜观察，结果：HE当色显示轻度损伤后 髓主要表现为多发性小出血灶，后期为胶细胞增生，中度损伤早期主要表现为大片出血灶，继之出现损伤部位细胞液化坏死，后期空腔形成。TUNEL染色显示，术后4h即出现细胞凋亡，术后8h达最高峰，包括神经元和胶质细胞凋亡。术后48h开始减少，术后72h和168h仍可见到凋亡的胶质细胞，术后4h和8h凋亡细胞主要分布在损伤节段内，结论：脊髓损伤后存在细胞凋亡现象，从形态上看包括神经元和胶质细胞和凋亡，细胞是脊髓继发性损害中细胞死亡的一种重要形式。     

HIPK2抑制非小细胞肺癌上皮间质转化及迁移侵袭的作用及机制

目的 研究同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞上皮间质转化(EMT)以及迁移侵袭的影响及机制。 方法 应用Lipofectamine 2000将HIPK2高表达质粒pcDNA3.1-HIPK2和对照质粒pcDNA3.1-Vector转染至A549、H520细胞,分别为高表达组和对照组;应用慢病毒转染HIPK2干扰质粒GV248 shHIPK2和对照质粒GV248 shVector,在A549细胞中分别构建沉默组和对照组;在A549 细胞沉默组中应用Lipofectamine 2000转染GV248 shZEB1质粒和GV248 shVector质粒,分别为干扰组和对照组。Western blotting检测HIPK2表达水平及其对EMT标记蛋白的影响;应用细胞划痕实验、Transwell实验、Matrigel实验检测细胞迁移、侵袭能力。 结果 与对照组相比,高表达组上皮细胞标记蛋白表达增强(P<0.01)、间质细胞标记蛋白表达下降(P<0.01),EMT受到抑制。高表达组迁移距离小于对照组(P<0.05),高表达组细胞迁移和侵袭至下室的细胞数也明显减少(P<0.01)。沉默HIPK2则促进EMT发生、增强细胞的迁移和侵袭。干扰锌指E盒结合蛋白(ZEB1)的表达可以缓解HIPK2沉默引起的EMT和迁移侵袭现象。 结论 HIPK2具有抑制NSCLC细胞EMT和迁移侵袭的作用,其发生机制可能与转录因子ZEB1有关。     

脑啡肽对早期反应性胶质增生形态及其神经营养功能的影响

目的　研究脑啡肽对早期反应性胶质细胞形态、增殖及神经营养功能的影响。方法　在相差显微镜下观察反应性胶质细胞形态,３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验检测反应性胶质细胞增殖,以Ｇｒｉｅｓｓ反应测定亚硝酸盐含量表示一氧化氮（ＮＯ）量,原位杂交实验检测生长相关蛋白（ｇｒｏｗ ｔｈ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＧＡＰ－４３）ｍ ＲＮＡ 的表达。结果　脑啡肽能促进损伤边缘的胶质细胞向损伤裸露区伸出宽大扁平的突起,增强反应性胶质细胞３Ｈ－ＴｄＲ的掺入（Ｐ＜０．０５）,抑制其ＮＯ的生成（Ｐ＜ ０．０５）;经脑啡肽处理的反应性胶质细胞能增强神经元ＧＡＰ－４３ ｍ ＲＮＡ 的表达（Ｐ＜０．０５）。结论　脑啡肽增强反应性胶质增生的同时抑制了反应性胶质细胞ＮＯ 的生成而增强反应性胶质细胞的神经营养功能。     

逆行标记法研究颈脊神经节至交感神经节的神经反射通路

目的 分析颈交感神经节和颈脊神经节之间的神经纤维联系,探讨颈性眩晕发病的神经反射基础.方法 48只新西兰兔随机分为颈上交感神经节组和颈下交感神经节组及相应对照组,于颈上或颈下交感神经节内分别注入荧光金溶液或生理盐水,分别于存活4、8d后取出双侧颈脊神经节C2～C8,制备冷冻切片并进行荧光显微镜观察分析.结果 颈上交感神...     

脊髓损伤后凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达及意义

目的：观察探讨大白鼠脊髓损伤后细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax的表达及意义。方法：28只SD大鼠随机分为7组，Allen’s法致伤脊髓，于术后4、8、24、48、72、168h采集脊髓标本，1组作为对照组，分别行HE染色、TUNEL染色和免疫组化技术检测Bcl-2、Bax的表达。结果：TUNEL染色显示有神经元和胶质细胞凋亡。Bcl-2在术后4h开始出现阳性表达，24h达高峰。Bax术后4h出现阳性表达，8h时达高峰。结论：脊髓损伤后存在神经元和胶质细胞的凋亡，Bcl-2、Bax基因对调控细胞凋亡可能具有重要作用。     

脊髓损伤后凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达及意义

目的 :观察探讨大白鼠脊髓损伤后细胞凋亡及调控基因Bcl -2、Bax的表达及意义。方法 :2 8只SD大鼠随机分为 7组 ,Allen′s法致伤脊髓 ,于术后 4、 8、 2 4、 48、 72、 168h采集脊髓标本 ,1组作为对照组 ,分别行HE染色、TUNEL染色和免疫组化技术检测Bcl -2、Bax的表达。结果 :TUNEL染色显示有神经元和胶质细胞凋亡。Bcl-2在术后 4h开始出现阳性表达 ,2 4h达高峰。Bax术后 4h出现阳性表达 ,8h时达高峰。结论 :脊髓损伤后存在神经元和胶质细胞的凋亡 ,Bcl-2、Bax基因对调控细胞凋亡可能具有重要作用。