超雌综合征的病例报道及文献综述

超雌综合征是一组性染色体非整倍体疾病(sex chromosome aneuploidy,SCA),其特征为比正常女性核型额外多了1条或1条以上X染色体,可由于不同时期细胞分裂的不分离事件而形成47,XXX、48,XXXX、45,X/47,XXX等多种核型,同时其表型存在较大差异,表现为不同程度的发育、心理障碍和临床疾...     

顶体酶活性对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:探讨精子顶体酶活性对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法:选择909对在本院生殖中心就诊的不孕夫妇,其中女方检查为正常或仅为输卵管因素不孕。采用改良巴氏法染色和Na-苯甲酰-DL-精胺酸-P-硝酰基苯胺(BAPNA)法分别对丈夫的精液进行精子形态学分析和精子顶体酶活性测定。结果:顶体酶异常组中各项精液参数,包括正常形态精子百分率、精子活动率、活动力、快速前向运动精子百分率及精子密度均显著低于顶体酶正常组(P<0.01);顶体酶活性与精液常规分析上述各参数之间存在非常显著的正相关(P<0.01);两组间取卵数、卵裂率、优质胚胎率、胚胎冷冻率、无可移植胚胎周期百分率、胚胎移植数和流产率均无显著性差异(P>0.05);顶体酶正常组的受精率、仅一个胚胎移植的周期百分率、着床率及临床妊娠率均明显高于顶体酶异常组(P<0.01)。结论:顶体酶活性异常与精液常规分析各主要参数的异常密切相关,可导致体外受精率显著下降。顶体酶活性检测在IVF结局预测中起着重要作用。     

性染色体不一致嵌合的病例报道和文献综述

性染色体不一致嵌合是指个体中同时存在女性(46,XX)和男性(46,XY)细胞系,根据产生机制不同可分为同源性和异源性嵌合.其发生率很低,发生机制也不是很明确;且由于各细胞系嵌合比例不同表型存在很大差异,产前诊断时难以评估预后.本综述汇总既往的文献报道,对性染色体不一致嵌合的发生率、发生机制、临床表型、相关治疗、预后及...     

精子形态与体外授精妊娠结局的关系

目的 探讨精子形态与体外授精.胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的关系.方法 对480对接受IVF-ET的男方精液进行分析,观察精子形态对IVF的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎冷冻率、着床率、妊娠率、流产率等的影响.结果 随着精子正常形态率的降低,精子的质量逐渐下降,其密度、活动率,活动力都有显著下降(P＜0.01);精子形态对卵子受精率及优质胚胎率有显著影响(P＜0.01),但对辅助生殖中的其它参数,如卵裂率、胚胎冷冻率、着床率、妊娠率、流产率均无显著性影响(P＞0.05).结论 精子形态在IVF中的作用主要是影响其受精率及胚胎的发育潜能,而对IVF妊娠的结局无预测作用.     

绿脓杆菌ESBL和AmpC酶表型检出与耐药性分析

目的：了解本地区绿脓杆菌ESBL和AmpC酶的产生率和构成以及对临床常用抗生素的耐药情况。方法：绿脓杆菌的鉴定和药敏采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2系统进行，双纸片扩散确证实验和头孢西叮三维试验分别用于ESBL和AmpC酶的表型检测。结果：217株绿脓杆菌中，对临床常用抗生素敏感性较好是美乐培南、哌拉西彬他唑巴坦、亚胺培南、哌拉西林、头孢吡肟、丁胺卡那等，其敏感率分别为94．5％（205／217）、90．0％（195／217）、86．6％（188／217）、84．8％（184／217）、84．3％（183／217）、82．9％（180／217）；绿脓杆菌中ESBL和AmpC酶的总检出率是9．2％（20／217），其中ESBL和AmpC酶分别占60．O％（12／20）和40．0％（8／20）；产酶菌与不产酶菌对氨曲南、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、哌拉西林、哌拉西彬他唑巴坦的耐药率差异显著，产酶菌的耐药率明显高于不产酶菌（P均〈0．05）；产酶菌主要来自痰和尿标本（分别占65．O％和35．O％），以ICU病房最多见（占60．0％）。结论：本地区绿脓杆菌感染的治疗中美乐培南、哌拉西彬他唑巴坦、亚胺培南、头孢吡肟、丁胺卡那等仍是较好的选择；绿脓杆菌中ESBL和AmpC酶有一定的产生率。二者构成比相近；绿脓杆菌的耐药与其产生的β-内酰胺酶有关；产酶菌主要来自痰和尿标本，以ICU病房最多见。     

临床生化重要检验项目溶血干扰的定量化研究

【目的】探讨标本溶血对重要生化项目检验结果的影响,并引进溶血指数对影响程度进行量化,并探讨其临床实践应用。【方法】参考美国临床实验室标准化委员会制定的评价方案EP7-P文件标准程序,取22例正常人新鲜无溶血、无黄疸、无脂浊的血清及其红细胞,配对后配制成不同浓度的溶血模型,检测血红蛋白浓度与溶血指数之间的关系和溶血对生化检测项目影响的大小。【结果】血红蛋白浓度与溶血指数在临床标本溶血范围内呈良好的线性关系,Y(溶血指数)=104.1X(血红蛋白浓度)-3.3,R2=0.9901。从22例标本的不同溶血程度对检测项目结果的影响,溶血对LDH、CK-MB、HBDH、AST、UA、TBIL产生正干扰,对P、CK、ALP产生负干扰。溶血指数与溶血变化的LDH、HBDH、P、CK-MB成显著相关(相关系数R2分别为0.9572、0.9667、0.9683和0.9739)。【结论】溶血指数可作为标本是否合格的客观指标,避免主观判断的误差;可校正易受体外溶血影响的LDH、HBDH、UA和AST结果;溶血对CK-MB和P的影响有待进一步研究。     

人脂肪干细胞的分离培养与生物学特性

背景:高效、稳定地获得大量较高纯度的人脂肪干细胞,是其在组织工程学及再生医学中广泛应用的基础和前提。目的:探索体外培养脂肪干细胞的适宜条件,从而提高其增殖能力。方法:采用胶原酶消化的方法,从人腹部皮下块状脂肪中分离出脂肪干细胞,经贴壁筛选法纯化细胞、低糖培养基体外培养扩增。Giesam染色后观察细胞形态;绘制细胞生长曲线并进行细胞周期分析,观察分析传代后染色体核型改变;选取第3代脂肪干细胞做流式细胞鉴定、EdU细胞增殖能力检测以及克隆形成实验。结果与结论:分离培养的原代脂肪干细胞形态不一,经传代后的细胞形态趋于长梭形,排列紧密呈漩涡状生长。细胞生长曲线呈S形,细胞周期分析及EdU掺入法结果显示体外培养的脂肪干细胞具有较强的增殖能力。经染色体核型分析结果提示,体外培养不会引起脂肪干细胞的核型改变。第3代脂肪干细胞经流式细胞仪检测CD29,CD44,CD90,CD105均呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性;克隆形成率为8.8%;在一定的诱导条件下,脂肪干细胞能够向脂肪细胞及成骨细胞分化。结果说明采用胶原酶消化法可成功分离培养人脂肪干细胞,且具有较强的增殖能力。     

应用双胎羊水多能干细胞建立诱导分化的内对照模型

目的 快速重编程羊水细胞为多能干细胞,建立诱导分化研究的内对照模型.方法 应用逆转录病毒介导4种基因(Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4)诱导双胎羊水细胞,筛选羊水诱导性多能干细胞(human amniotic fluid-derived cells induced pluripotent stem cells,hAFDCs-iPSCs),对其进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定.结果 双胎hAFDC-iPSCs能维持自我更新状态,在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因,具有体内外分化潜能,在体外长期培养能维持正常核型.结论 双胎hAFDCs-iPSCs遗传背景相一致,可以为iPSCs的诱导分化研究提供很好的内对照模型,并为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源.     

以4种基因诱导产前诊断绒毛细胞建立诱导性多能干细胞

背景：诱导性多能干细胞因具有多能性特征,可以诱导分化为特定的细胞,包括神经细胞、造血细胞等。 目的：建立产前诊断绒毛细胞来源的诱导性多能干细胞。 方法：运用反转录病毒介导4种基因hOct4、hSox2、hc-Myc、hKlf4诱导产前诊断绒毛细胞,对建立的诱导性多能干细胞进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定。 结果与结论：建立的诱导性多能干细胞能维持自我更新状态,在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因,具有体内、外分化潜能;在体外长期培养能维持正常核型。说明4种全能性基因转入绒毛细胞可获得具有多能性的诱导性多能干细胞,这为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源,为产前诊断疾病机制研究提供很好的细胞模型。     

18三体及假肥大型肌营养不良成纤维细胞系的建立

目的:建立18三体及假肥大型肌营养不良胎儿皮肤成纤维细胞系。方法:3名在我院进行羊水染色体诊断或基因诊断,诊断为异常的胎儿。获得知情同意后,取1小块皮肤,进行成纤维细胞培养及鉴定。结果:对皮肤进行分离、培养,成功建立了3株疾病皮肤成纤维细胞系,包括1株18三体、2株假肥大型肌营养不良,并进行了传代、冻存、复苏及鉴定。在传代培养过程中核型稳定,STR基因检测对这些细胞系进行个体识别。结论:本研究在体外建立了稳定的18三体及假肥大型肌营养不良胎儿皮肤成纤维细胞系,为进一步研究相关疾病提供充足的细胞来源。