邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡的作用研究

目的 研究邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)是否诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡并影响其增殖。方法 取对数增长期的人卵巢颗粒细胞系KGN细胞，给予不同浓度(0、100、200、400、800、1 600μmol/L)MEHP处理24 h。通过普通光镜观察不同浓度MEHP处理后KGN细胞形态的改变；用CCK-8检测MEHP对细胞活力和增殖能力的影响；采用蛋白免疫印迹(WB)观察铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4、SLC7A11、FTH1)在KGN细胞中的表达情况；使用细胞铁含量检测试剂盒、丙二醛(MDA)含量检测试剂盒、活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)分别检测对照组和400μmol/L MEHP处理组细胞的铁含量、MDA、ROS和超氧化物阴离子水平。结果 (1)光镜观察显示，400μmol/L及以上MEHP处理使KGN细胞皱缩变圆，形态异常。(2)CCK-8结果显示400μmol/L及以上MEHP处理抑制细胞增殖，且具有剂量依赖性(P<0.05)。(3)100、200μmol/L MEHP处理组KGN细胞铁死亡相关蛋白表达无...     

高雄激素通过诱导细胞焦亡影响卵巢颗粒细胞增殖

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)中高雄激素对卵巢颗粒细胞焦亡、增殖的影响。方法 3周龄的ICR小鼠随机分为对照组(5只)和PCOS组(5只),PCOS组小鼠连续注射脱氢表雄酮(DHEA,6 mg/100 g体重) 21 d,对照组小鼠则注射等体积不含DHEA的芝麻油。通过HE染色观察两组小鼠卵巢形态的变化；运用实时定量PCR和蛋白免疫印迹(WB)观察炎症及焦亡相关基因和蛋白在小鼠卵巢中的表达情况。通过睾酮(10μmol/L)诱导KGN细胞建立高雄诱导的PCOS体外细胞模型，对照组为不添加睾酮的培养基处理的KGN细胞，PCR法检测对照组和睾酮组细胞中炎症(NLRP3、NF-κB、IL-1β)及焦亡(ASC、Caspase-1)相关基因的表达情况，运用WB和免疫荧光技术观察焦亡相关蛋白(Caspase-1、N-GSDMD/GSDMD)的表达情况，CCK8实验和LDH释放实验观察睾酮对KGN细胞生长的影响。结果 HE染色显示PCOS组小鼠卵巢未成熟小卵泡及闭锁卵泡明显增多，提示PCOS模型构建成功。实时定量PCR结果显示，PCOS小鼠卵巢组织中NLRP3、NF-κB、IL-1β、ASC和...