葡萄球菌肠毒素A基因的克隆、原核表达和鉴定

目的克隆葡萄球菌肠毒索A(SEA)基因,构建其原核表达系统,鉴定重组蛋白(rSEA)免疫原性。方法采用PCR技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株ATCC13565基因组DNA中扩增全长SEA基因片段,T-A克隆后测序,构建pET32a-SEA表达质粒,转化入E.coli BL21DE3宿主菌,通过IPTG诱导表达,分离、纯化及Western印迹法鉴定。结果PCR获得SEA基因片段,DNA测序结果与已报道的SEA基因序列(GenBank No:L22566,AP004828)一致,构建了pET32a-SEA表达质粒,并成功地诱导、纯化了rSEA蛋白,rSEA表达量约为细菌总蛋白的40%。结论成功克隆了SEA全长基因,构建了rSEA原核表达系统,为进一步研制SEA的单克隆抗体及诊断试剂盒奠定了基础。     

腹腔镜下子宫悬吊术治疗盆腔器官脱垂对患者生活质量的影响

目的 研究盆腔器官脱垂患者应用腹腔镜下子宫悬吊术对生活质量的影响。方法 回顾性分析2019年1月至2021年6月本院收治的104例盆腔器官脱垂患者，依据患者是否保留子宫意愿将其分为甲组（56例）、乙组（48例），其中甲组接受腹腔镜子宫悬吊术（LUS），乙组接受阴式全子宫切除术+骶韧带悬吊术。比较两组的手术效果、生活质量、并发症、复发率、再手术率。结果 经分析，两组治疗后的盆腔器官脱垂度分级、拔除尿管时间、并发症发生率、1年内再手术率相比无差异（P>0.05）；相比于乙组，甲组术中出血量少，手术用时及住院时间短，1年内复发率低（P<0.05）；治疗后，相比于乙组，甲组的盆底功能障碍问卷（PFDI-20）、全身状况改善问卷（PGI-I）、盆底障碍影响简易问卷-7(PFIQ-7)评分低，盆腔脏器脱垂/尿失禁性功能问卷（PISQ-12）评分高（P<0.05）。结论 LUS相比于阴式子宫全切术明显改善了手术效果，提高了生活质量，且1年内的复发率低，对于有保留子宫意愿的患者属于更优的选择。