人乳腺癌细胞RECK基因的表达及检测

目的:研究人乳腺癌细胞株RECK基因的表达,阐明RECK基因表达水平与乳腺癌细胞侵袭力的关系。方法:采用transwell法,测定HBL-100,MCF-7和MDA-MB-435S三株人乳腺(癌)细胞的体外侵袭能力,同时应用免疫细胞化学技术,Westernblotting和RT-PCR技术分别检测三株细胞株MMP-2,MMP-9和RECK基因蛋白表达水平,及RECK基因mRNA转录丰度。结果:三株细胞中,MDA-MB-435S侵袭力最高(425.20±54.09),HBL-100最低(101.00±63.88),MCF-7居中,为(239.00±91.39),三组细胞的侵袭力比较差异均有显著性(P<0.01)。RECK基因在HBL-100细胞株中蛋白表达水平最高(免疫细胞化学值:3188.24±894.86;Westernblotting值:3.32±0.25),在MDA-MB-435S细胞株中不表达,MCF-7为(免疫细胞化学值:1058.92±336.53,P<0.01;Westernblotting值:2.23±0.59,P<0.05)。且在免疫细胞化学中,RECK基因的蛋白表达与MMP-2,MMP-9的表达水平成负相关。RECK基因在HBL-100细胞株中mRNA水平最高(2.32±0.02),在MDA-MB-435S细胞株中不表达(P<0.001)。结论:RECK基因表达水平与乳腺癌细胞体外侵袭力及MMP-2,MMP-9的表达水平成明显负相关。     

配戴OK镜致右眼绿脓杆菌性角膜炎1例护理

OK镜又叫ORTHO-K角膜接触镜,是一种能通过对角膜进行矫形,达到治疗近视目的的硬性角膜接触镜。近年来,随着OK镜在我国的推广应用,因配戴OK镜而引起结膜炎、角膜炎等并发症日益增多,而绿脓杆菌性角膜溃疡是其中最严重的一种,现报道如下:     

吸痰管的改良方法

吸痰是临床工作中常用的一项护理操作,对于呼吸道感染或阻塞者,吸痰是保持呼吸道通畅的重要治疗方法。为了进一步提高吸痰质量,减少吸痰次数,我们根据几年的工作经验,对常规吸痰管进行了改良,研制了一种多孔吸痰管。经临床应用证明,改进后的吸痰管使用效果良好,现介绍如下:1 制作方法 根据患者情况,选取型号适当的常规乳胶吸痰管1根,将前端剪去,确保剪口边缘光滑;然后,在距离吸痰管前端6cm的管壁上,用小剪刀剪4个吸入孔,4孔相互交错120°,每个吸入孔     

氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(IK·ATP)的影响

目的:探讨氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(IK·ATP)的影响.方法:取房缺或室缺修补术患者的右心耳组织,置于100%氧饱和的无钙心肌细胞保护液中,30 min内送至实验室.将标本剪成1 mm3的小块,用二步酶解法分离出单个心房肌细胞.采用膜片钳全细胞记录方法,观察两种浓度氯胺酮对人单个心房肌细胞IK·ATP的影响.结果:在电极内液含ATP(0.3 mmol·L-1)的条件下,记录到一束外向K+电流.该电流可被KATP通道特异阻滞药格列苯脲(10μmol·L-1)抑制,表明此电流为IK·ATP在指令电位为+20mV时,用含低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP受到抑制,抑制率为11.1%(n=3,P＜0.01).用含高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)的细胞外液灌流时,IK·ATP被大量激活,增加率为57.6%(n=3,P＜0.01).结论:低浓度氯胺酮(0.01 mmol·L-1)对人心房肌细胞IK·ATP具有抑制作用;高浓度氯胺酮(0.1 mmol·L-1)对IK·ATP则有激活作用.     

羧甲基壳聚糖对大鼠单一心房肌细胞超速激活延迟整流钾电流的作用

目的　探讨羧甲基壳聚糖 (CMCS)对心血管作用的机制。方法　利用膜片钳全细胞记录方式 ,双脉冲方波刺激 ,首先给一个时程为 2 0 0ms ,保持电位 - 6 0mV ,去极化到 +30mV的条件脉冲 ,间隔 2 0ms后 ,再给予波宽 12 0 0ms的方波刺激 ,保持电位- 6 0mV ,刺激电压从 - 40mV～ +5 0mV ,步阶电压10mV。结果　CMCS抑制IKur,当其浓度为 1和 2g·L- 1时 ,指令电位 +5 0mV的电流值分别由给药前的 ( 1.8± 0 .7)和 ( 2 .0± 0 .6 )nA下降到 ( 1.6± 0 .6 )(n =12 ,P <0 .0 1)和 ( 1.5± 0 .5 )nA (n =7,P <0 .0 1)。其他指令电位下的IKur的改变也符合此趋势。增加刺激频率及指令电压IKur的变化均不显著 ,提示CMCS对IKur的抑制作用不具有电压依赖性和频率依赖性。结论　CMCS可抑制大鼠单一心房肌细胞IKur。     

氯胺酮对大鼠气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流的影响

氯胺酮是常用的强效静脉麻醉药，具有很强的气管舒张作用，其舒张气管平滑肌的机制与抑制迷走神经神经反射、促进内源性儿茶酚胺释放、激动气管平滑肌细胞β受体及抑制气管平滑肌细胞L-型钙通道，降低细胞内钙离子浓度有关。ATP敏感钾通道（KATP通道）广泛存在于多种组织细胞中，气管平滑肌的KATP通道对维持细胞膜电位和产生复极或超极化电流起重要作用。有研究表明在动物哮喘模型中KATP通道开放剂可以降低气道高反应性，缓解气道痉挛。氯胺酮对气管平滑肌细胞KATP通道的作用目前尚无定论。本研究旨在观察氯胺酮对大鼠气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流（IKATP）的影响。     

早期糖尿病大鼠背根节COX-2 mRNA和血中PGE2的变化

目的研究早期糖尿病背根节(DRG)中COX-2mRNA及血中PGE2的变化,进一步探讨糖尿病神经血管并发症的发病机制。方法大鼠单次注射链佐霉素60mg·kg-1制作糖尿病模型;用RTPCR技术半定量测定DRG中COX2mRNA;用放射免疫法检测血中PGE2的浓度。结果在早期糖尿病,DRG中COX2mRNA与βactinmRNA比值为0.44±0.02(1周),0.83±0.03(3周),其余对照组,4周和8周组未检出;血中PGE2的浓度分别为453.3±172.8(1周),2500±592.14(3周),380±112.3(4周)和740±173.2(8周)pg·ml-1,其中对照组未检出。结论糖尿病早期DRG中即有COX2mRNA及血中PGE2的改变,DRG中COX2mRNA的改变可能部分影响血中PGE2浓度。     

氯胺酮对哮喘大鼠气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的　研究氯胺酮对哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞ATP敏感钾电流 (IKATP)的作用。方法　急性分离哮喘大鼠气管 ,利用膜片钳制技术全细胞记录法观察氯胺酮对哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞IKATP的作用。结果　氯胺酮开放气管平滑肌细胞ATP敏感钾通道 (KATP通道 ) ,且具有剂量依赖关系。指令电位在 + 50mV时 ,4种浓度氯胺酮 (1×10 - 7,1× 10 - 6 ,1× 10 - 5 ,1× 10 - 4mol·L- 1)可使IKATP 由53 72± 15 60 pA/pF增加到给药后的 63 86± 19 3 3 pA/pF(n =8,P <0 0 5) ,69 98± 18 44pA/pF(P <0 0 1) ,75 64±19 64pA/ pF (P <0 0 1)和 78 3 7± 19 40pA/ pF (P <0 0 1)。其开放率分别为 118 73 %± 2 2 0 1% (P <0 0 5) ,13 5 18%± 2 7 79% (P <0 0 5) ,14 7 0 7%± 3 3 2 5% (P <0 0 5)和 153 62 %± 3 7 59% (P <0 0 5)。其它指令电位下的IKATP改变也符合此趋势。结论　氯胺酮剂量依赖性的开放哮喘大鼠单一气管平滑肌细胞ATP敏感钾通道 ,这可能是其舒张气管平滑肌的机制之一     

N-甲基小檗胺对人心房肌细胞瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流的作用(英文)

目的　动物实验表明N 甲基小檗胺 (NMB)通过抑制豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾电流和钙电流来发挥抗心律失常和抗心肌缺血作用 ,故进一步研究NMB对人心肌细胞电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式研究NMB对人心房肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)和延迟整流钾电流 (IK)的作用。结果　指令电位为 +60mV时 ,NMB 0 .1 ,1 ,1 0 μmol·L-1 分别使Ito幅值下降 (1 6± 4) % ,(2 5±4) %和 (49± 3) % ,使IK 幅值下降 (42± 6) % ,(47±7) %和(65± 3) %。结论　NMB对人心房肌细胞Ito和IK 均有抑制作用。     

异丙酚对人心房肌细胞ATP敏感性钾电流的影响

为观测不同浓度的异丙酚对人离体心房肌单一细胞ATP敏感性钾电流(IKATP)的影响。取行先天性心脏病手术时切取的右心耳组织．迅速置于100％氧饱和的无钙心肌细胞冷保护液中。将心肌标本剪成小块后用二步酶解法分离出单个心房肌细胞．利用全细胞记录技术观察异丙酚对单一心房肌细胞IKATP的作用。结果表明．在电极内液含0．3mmol&;#183;L^-1ATP条件下．可记录到一外向K^+电流．该电流能被KATP通道特异性阻滞药格列苯脲(10μmol&;#183;L^-1)所抑制．表明此电流为IKATP。用含两种浓度(3&;#215;10^-5mol&;#183;L^-1和3&;#215;10μmol&;#183;L^-1)异丙酚的细胞外液灌流。结果显示异丙酚使IKATP所增加的百分率分别为给药前的27％和42．4％。结论：异丙酚可通过对人心房肌细胞的IKATP浓度依赖性的激活作用，使动作电位时程缩短而产生对心肌的抑制作用.