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报道人胚胎肝细胞体外培养的方法及所培养肝细胞的生物学特性。用胰蛋白酶消化人胚胎肝组织小块,可获70%以上具有正常代谢活性的肝细胞。分离的肝细胞在DMEM培养基中生长良好,传代6次,历时5个月。将第2、3代细胞冻在于液氮中,3个月后复苏,60%的细胞仍具有活性,能贴壁生长。收集培养物上清液作白蛋白和甲胎蛋白(AFP)测定。结果显示:此种培养细胞具有分泌白蛋白和AFP的功能,随着培养时间的延长和传次代数的增加AFP含量逐渐减少。本研究为进一步探讨肝细胞的生物学特性及癌变机制提供了实验模型。 相似文献
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骨科病人术后疼痛的护理及对策 总被引:1,自引:0,他引:1
手术后反复疼痛导致机体抵抗力下降,尤其是手术后和长期卧床的患者,易发生多种并发症。通过对术后第1-3天病人观察,发现50%以上的病人术后即使用了止痛药,但仍有不同程度的疼痛。针对疼痛的原因采取相应的对策,可极大地提高患者生活质量。 相似文献
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摘要: 目的 观察谷氨酰胺 (Gln) 对小细胞肺癌 H446 细胞增殖和生存的影响, 并探究其机制。方法 应用 CCK-8 试剂盒检测 Gln (+) 组和 Gln (-) 组 H446 细胞在 0、 24、 48、 72、 96 h 的增殖情况, 筛选出最佳时间, 采用 Annexin V-FITC/PI 双染法、 CellTiter-Glo®发光法和流式细胞仪分别检测这 2 组细胞的存活比例、 三磷酸腺苷 (ATP)和活性氧 (ROS) 水平; 以 Gln (-) 组为对照组, 实验组中加入草酰乙酸 (OAA) 或 α-酮戊二酸二甲酯 (DM-αKG), 检测各组 H446 细胞的 ATP 水平、 增殖和存活情况; 以 Gln (-) 组为对照组, 实验组中加入 ROS 清除剂 N-乙酰-L-半胱氨酸 (NAC), 检测 2 组细胞的 ROS 水平、 增殖、 克隆和存活情况; 在 Gln (+) 条件下, 用 0、 2、 5、 10 μmol/L 谷氨酰胺酶抑制剂 BPTES 处理 H446 细胞, 通过克隆实验筛选最佳作用浓度, 在此浓度下检测 Gln (+) 组和 Gln (+) +BPTES 组细胞的 ATP、 ROS 水平和增殖水平。最后, 单独应用 BPTES 或 ROS 诱导剂过氧化氢 (H2O2 ) 和二者联合应用情况下检测细胞的存活比例。结果 相比 Gln (+) 组, Gln (-) 组 H446 细胞的增殖水平在 24、 48、 72、 96 h 均降低 (P<0.05), 72 h 降低最明显, 取 72 h 为最佳时间; Gln (-) 组细胞的存活比例和 ATP 水平低于 Gln (+) 组 (P<0.05), ROS 水平高于 Gln (+) 组; 相比 Gln (-) 组, Gln (-) +OAA 组和 Gln (-) +DM-αKG 组 H446 细胞的 ATP 和增殖未升高, 而存活比例升高(P<0.05); 相比 Gln (-) 组, Gln (-) +NAC 组 ROS 水平降低, 增殖、 克隆水平和存活比例均升高 (均 P<0.05)。克隆实验结果显示 10 μmol/L BPTES 为最佳浓度; 相比 Gln (+) 组, Gln (+) +BPTES 组细胞的 ATP 和增殖降低 (均 P<0.05), ROS 水平升高; 相比单独应用, BPTES+H2O2 组 H446 细胞存活比例明显降低。结论 Gln 缺乏可通过提高 ROS 水平抑制H446细胞的增殖和生存; BPTES 和H2O2对 H446 细胞有联合杀伤作用。 相似文献
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由于存在着种系,器官和细胞间的差异,发展用人靶细胞器官上皮细胞检测致癌物的方法是当前遗传学重要课题之一。我们用MCDB151加多种生长因子的无血清培养基,成功地培养人的多种上皮细胞。本文报道用体外培养人支气管上皮细胞,观察与人肺癌发生有关的几种因素诱导程序外DNA合成(UDS)及微核的效应。实验方法除在微核实验中加入了细胞松驰素B,用以产生双核细胞(代表分裂细胞)进行微核计数外,其它方法均按我们以前发表的方法进行。 相似文献
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绝大多数人类的肿瘤起源于上皮细胞。上皮细胞的培养对癌变机理及遗传毒理学的研究均具有重要的意义。我们采用MCDB151培养基加多种生长因子,已成功地培养 相似文献
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生长因子对人支气管上皮细胞和肺癌细胞生长的影响 总被引:5,自引:1,他引:4
MCDB151加多种生长因子的无血清培养基已成功用于培养成人和胎儿支气管上皮细胞及肺癌细胞(腺癌和鳞癌)。用该无血清培养基进行集落形成试验的结果表明,牛垂体提取物、胰岛素和氢化可的松可以促进人支气管上皮细胞及肺癌细胞的增殖,表皮生长因子和转铁蛋白却只刺激正常支气管上皮细胞的生长,而对本实验所检测的肺癌细胞无生长刺激作用。本研究所培养的大部分肺癌标本,在MCDB151完全培养基中加2%胎牛血清时,比不加血清时生长更快、更好。在MCDB151无血清培养基中,低浓度的钙有利于人支气管上皮细胞和肺癌细胞的生长。 相似文献
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靳芳 《中国超声诊断杂志》2000,(1)
患者,男,29岁,自幼活动后无明显紫绀及呼吸困难,喜爱篮球运动。身高1.82米,体重80公斤,因感冒收入院,体检心脏无明显增大,肺动脉瓣区听诊有Ⅰ—Ⅱ级收缩期杂音,但较柔和。超声检查,主动脉内径无明显增宽,左房、左室不扩大,右房无明显扩大,右心室较大,各瓣膜形态活动度良好,二尖瓣前叶活动曲线呈双峰,前后叶镜向运动,瓣膜回声无增粗、增强,开放正常。 相似文献