三百棒醇提物通过抗炎和凋亡作用减轻CIA大鼠的关节炎北大核心CSCD

探讨三百棒醇提物(Toddalia asiatica alcohol extract,TAAE)通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及其机制研究。首先建立CIA大鼠模型,然后每天口服TAAE和雷公藤多苷片(TGT),每周对后肢关节的肿胀程度进行评分。给药35 d后,苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞因子(TNF-α、IL-6)的水平;TUNEL法检测TAAE对大鼠滑膜组织细胞凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3及通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达水平;RT-qPCR检测Bax、Bcl-2、caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-1β及通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的mRNA水平。TAAE可减轻CIA大鼠关节肿胀程度,降低血清炎症因子水平,改善滑膜组织病理改变,促进滑膜组织细胞凋亡,抑制滑膜炎症。此外,RT-qPCR和Western blot实验结果显示TAAE上调促凋亡相关蛋白Bax水平,下调抑凋亡蛋白Bcl-2水平,激活caspase-3促进了滑膜组织细胞凋亡,TAAE还有效地下调了p-PI3K、p-Akt蛋白水平。该研究表明,TAAE对CIA大鼠的关节炎具有很好的治疗作用,并且对降低炎症反应具有很强的药理活性,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,促进滑膜细胞凋亡有关。总体而言,该研究为三百棒的抗炎机制的研究提供了新的线索,并为临床更好应用三百棒治疗炎症性及自身免疫性疾病提供理论依据。     

Effects of ethanolic extracts of Euonymus alatus on CCl4-induced hepatic fibrosis in mice based on JAK2/STAT3 signaling pathway and its mechanism北大核心CSCD

Aim To explore the mechanism of ethanolic extracts of euonymus alatus on CCl4-induced hepatic fibrosis in mice by regulating JAK2/STAT3 signaling pathway. Methods Sixty C57BL/6J mice were randomly divided into control group,model group,EAL,EAM),EAH,and Silybin(n=10). Except for the control group,mice in other groups were injected with 25% CCl4 of 1.6 mL·kg-1 to induce HF model. Moreover,the positive group was administered 12.6 mg·kg-1 Silybin by gavage once a day,and EAL,EAM,and EAH were administered 72,140 and 280 mg·kg-1 ethanolic extracts of euonymus alatus once by gavage once a day,and the intervention lasted for six weeks. After 6th week,mouse blood was collected,the body weight and liver weight were measured and liver mass index calculated,the liver appearance was observed,and ALT,AST,TNF-α,IL-6,IL-1β were detected in serum. The protein expression levels of collagen Ⅰ,α-SMA,and JAK2/STAT3 signaling pathway-related protein(JAK2,STAT3,p-JAK2,pSTAT3)in mouse liver tissues were detected. Results Compared with the model group,EAM and EAH significantly decreased liver mass index,and the ALT,AST,α-SMA,collagen I levels of serum. After treatment,the liver morphology and structure,cellular inflammatory infiltration,fiber changes and collagen deposition in euonymus alatus intervention group were dose-dependently better than those of the model group. Compared with the model group,the expression of TNF-α,IL-6 and IL-1β in EAM and EAH serum decreased significantly(P<0.05). Compared with the model group,the protein expression levels of JAK2,STAT3,p-JAK2,pSTAT3 in EAM and EAH mouse liver tissues decreased significantly(P<0.05). Conclusion Ethanolic extracts of euonymus alatus have an anti-CCl4-induced HF effect in mice,and its mechanism may be related to the regulation of the JAK2/STAT3 signaling pathway. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

基于自噬途径观察飞龙掌血醇提物对NSCLCA549细胞凋亡的影响

目的：观察飞龙掌血醇提物对NSCLCA549细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：体外培养A549细胞,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞增殖的情况,并计算A549细胞的存活率,筛选出药物的浓度。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法检测各组及加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组及加入3-MA后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP1)及PARP1、活化的死亡激动剂(t-Bid)及Bid、泛素结合蛋白p62的表达情况。结果：与空白组比较,干预24 h,0.25 g·L^-1飞龙掌血醇提物组细胞存活率明显下降(P<0.05),0.5、1、2、4 g·L^-1飞龙掌血醇提物组细胞存活率显著下降(P<0.01);48 h...     

大黄素抗类风湿关节炎的作用机制研究进展

类风湿关节炎是一种累及关节的自身免疫性疾病,临床表现为关节炎症、骨损伤和软骨破坏、关节功能障碍和畸形,以及关节外的器官损伤。近年来,天然药物治疗类风湿关节炎的研究取得了显著的成果,大黄素是中药大黄的主要活性成分之一,具有良好的抗炎和抗氧化等作用。筛选近年来实验方法科学、研究方向新颖的文献,总结大黄素抗类风湿关节炎的作用机制,发现大黄素可通过减轻炎症反应、促进软骨细胞的增殖分化、抑制软骨细胞凋亡、延缓软骨细胞外基质降解等途径显示出抗类风湿关节炎的潜力。     

柔肝降酶方含药血清抑制人肝星状细胞的活化及自噬

背景：自噬在肝纤维化中发挥重要作用,可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明,柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用,其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的：探讨柔肝降酶方含药血清对脂多糖诱导的人肝星状细胞活化及自噬的影响及其潜在的作用机制。方法：用脂多糖建立人肝星状细胞活化模型,分成不同的处理组：(1)空白组：人肝星状细胞+空白血清;(2)模型组：人肝星状细胞+空白血清+脂多糖;(3)柔肝降酶方低、中、高剂量含药血清组：人肝星状细胞+低、中、高剂量柔肝降酶方含药血清+脂多糖;(4)柔肝降酶方高剂量含药血清联合雷帕霉素组：高剂量组基础上+雷帕霉素;(5)柔肝降酶方高剂量含药血清联合PI3K抑制剂组：高剂量组基础上+LY294002。CCK-8法观察细胞增殖情况;采用单丹磺酰尸胺染色法观察细胞自噬情况;WesternBlot检测细胞通路蛋白(PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、人肝星状细胞活化标志蛋白(α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原纤维)表达水平的影...     

大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响

目的 基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法 采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、P62和Beclin-1的蛋白表达水平。结果 MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING和P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论 大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。     

儿茶素干预硬脂酰辅酶A去饱和酶-1表达抗小鼠肝纤维化损伤

目的 探讨儿茶素(catechin, CA)是否通过影响SCD1表达抗四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl₄)诱导的小鼠肝纤维化。方法 48只C57bl/6雄性小鼠被随机分为6组：正常组、CCl₄组、CA 100、200、400 mg·kg^-1组(CA-L/M/H)、水飞蓟宾组(200 mg·kg^-1)。腹腔注射CCl₄造模，共6周，前3周给小鼠灌胃CA和水飞蓟宾。处死后，观察肝大体形态、测量肝指数，通过HE染色、AST、ALT检测肝损，Masson染色检测胶原沉积及免疫组织化学检测α-SMA、collagenⅠ的表达观察肝纤维化程度，ELISA检测甘油三酯、油红O染色观察脂质累积，进而QPCR、Western blot检测CA对脂肪酸限速酶SCD1表达的影响并用分子对接技术检测CA与SCD1相互作用模式。结果 较正常组，CA明显降低ALT、AST、α-SMA、collagenⅠ、甘油三酯的含量，抑制了CCl₄引起的肝纤维化，减少脂...