小鼠动情各期子宫内膜的显微结构及动情期凋亡因子在生殖器官的表达

目的:探讨动情期小鼠卵巢、输卵管、子宫中Bcl-2、Bax、caspase-9的表达及定位。方法:取各期小鼠卵巢、输卵管和子宫,石蜡切片、H-E染色,显微镜观察;免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax、caspase-9在动情期小鼠的卵巢、输卵管、子宫中的表达。结果:动情各期子宫内膜结构各有特点,动情期及前后的子宫内膜厚度较厚,与动情间期比较差异有统计学意义;Bcl-2、Pax、caspase-9在动情期小鼠生殖器官均有强弱不等的表达。结论:本研究提供了小鼠动情各期子宫内膜的结构变化,明确了Bcl-2、Bax和caspase-9在动情期卵巢、输卵管、子宫中的定位和表达。     

基因重组腺病毒载体与慢病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞的对比北大核心

背景:腺病毒载体和慢病毒载体均是较好的组织工程基因载体,两者在介导骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞中的差异尚待探究。目的:比较腺病毒和慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2转染体外培养兔骨髓间充质干细胞的转导效率、持续时间及外源基因表达差异。方法:将第5代兔骨髓间充质干细胞分3组培养,A组以腺病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Ad-EGFP/BMP-2)转染细胞,B组以慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Lenti-EGFP/BMP-2)转染细胞,C组为未进行转染。转染24 h、48 h、72 h、1周、3周,检测EGFP基因表达;转染72 h后,免疫组织化学观察细胞骨形态发生蛋白2的表达;转染后72 h、1周、3周,Western blot检测骨形态发生蛋白2蛋白表达。结果与结论:(1)转染24 h后,A、B组可见EGFP表达,A组明显强于B组;转染48 h后,A、B组荧光进一步增强;转染72 h后,A组荧光强度近高峰,B组荧光持续增强。转染1周后,A组荧光强度开始下降,B组荧光强度仍然增强。转染3周后,A组荧光强度明显下降甚至消失,B组荧光强度有所下降,但仍然保持一定的表达。C组在各时间点均无EGFP表达;(2)A、B组胞浆均呈骨形态发生蛋白2阳性表达,C组呈阴性表达;(3)转染72 h后,A组骨形态发生蛋白2蛋白表达量强于B组;转染1周后,A组表达下降,B组表达增强并强于A组;转染3周后,A组表达微弱,B组持续表达且明显强于A组;(4)结果表明,相对腺病毒载体,慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2基因转染兔骨髓间充质干细胞在表达持续时间上具有一定的优势。     

两种手术体位内固定治疗股骨转子间骨折的疗效比较

目的 比较仰卧位及侧卧位下股骨近端防旋髓内钉(PFNA)治疗股骨转子间骨折的疗效。方法 将90例股骨转子间骨折患者按体位不同分为仰卧组(采用常规仰卧位下PFNA治疗，47例)和侧卧组(采用侧卧位下PFNA治疗，43例)。记录两组围手术期指标、术后恢复情况、术后并发症发生情况。采用Harris评分标准评价膝关节功能恢复情况。结果 患者均获得随访，时间6～24个月。手术时间、切口长度、术中出血量、术中透视次数侧卧组均短(少)于仰卧组(P<0.05)。术后骨折复位质量两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。骨折愈合时间、开始扶拐时间侧卧组均优于仰卧组(P<0.05)。术后并发症发生率、末次随访时Harris评分优良率两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PFNA治疗股骨转子间骨折时，体位的不同并不影响手术效果，但侧卧位可改善手术时间、术中出血量等围手术期指标，有利于骨折愈合。     

慢病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合脱钙松质骨修复兔股骨缺损的实验研究

目的研究慢病毒介导人骨形态发生蛋白(Human bone morphogenetic protein,hBMP-2)转染骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)植入脱钙松质骨后对兔股骨大段缺损的修复作用。方法体外对兔BMSCs分离、培养、传代及表型鉴定后,采用慢病毒介导hBMP-2转染兔BMSCs,然后采用Western Blot法检测hBMP-2基因的表达情况。兔股骨大段缺损模型制造成功后随机分为4组(n=6),A组左侧股骨大段缺损区单纯行钢板螺钉内固定;B、C、D组左侧股骨大段缺损区行钢板螺钉内固定后分别植入脱钙松质骨、BMSCs复合脱钙松质骨、慢病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合脱钙松质骨。结果慢病毒介导hBMP2转染后的BMSCs细胞内hBMP-2基因能持续高效表达目的蛋白。术后12周X线片显示,A、B、C组骨缺损修复未完成,D组左股骨缺损区骨痂开始塑形,骨缺损消失,髓腔再通,骨缺损修复完成。内固定取出后进行三维CT检查,A、B、C组左侧股骨缺损处再次发生骨折,D组并未再次发生骨折。结论慢病毒介导hBMP2转染后的兔BMSCs细胞内hBMP2目的基因能高效持续表达目的蛋白,能诱导兔BMSCs分化成骨从而促进兔股骨缺损的修复。