人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立

目的 构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1( ),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1( )/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础.     

吉非替尼与化疗治疗老年肺腺癌的随机对照研究

目的:观察吉非替尼治疗老年肺腺癌的疗效及不良反应方法:93例老年(≥65岁)肺腺癌患者采用随机数字表法随机分为两组,试验组47例使用吉非替尼(250 mg,po,Qd)治疗至病情进展或出现严重不良反应:对照组46例予以铂类药物为基础的两药联合方案或单药化疗。结果:吉非替尼组和化疗组的疾病缓解率分别为34.0%(16/47)和23.9%(11/46);疾病控制率分别为72.3%(34/47)和67.4%(31/46);疾病进展时间分别为6.7个月和5.8个月;中位生存时间分别为8.3个月(6个月～18个月)和7.1个月(5.5个月～16个月);两组生存情况采用Kaplan-Meier生存曲线分析,Log-rank检验两组生存时间差异没有统计学意义。吉非替尼组的不良反应依次为:皮疹36例(76.6%),腹泻22例(46.8%),粒细胞减少4例(8.5%),趾、指甲皲裂3例(6.4%)肝功能异常3例(6.4%),脱发2例(4.3%),呕吐1例(2.1%),多为Ⅰ度～Ⅱ度。化疗组的不良反应依次为:粒细胞减少44例(95.7%),呕吐39例(84.8%),脱发29例(63.0%),血小板减少25例(54.3%),贫血20例(43.5%),肝功能异常7例(15.2%),腹泻3例(6.52%)。通过对吉非替尼组进行亚组分析可见,不同性别、吸烟史有无、不同ECOG评分以及既往化疗方案数患者的缓解率及疾病控制率差异均没有统计学意义。结论:吉非替尼治疗老年肺腺癌有较好的疗效及安全性。     

基因芯片筛选结肠癌伊立替康耐药相关基因

目的 应用基因芯片技术进行结肠癌伊立替康耐药相关基因表达谱差异分析.探讨伊立替康结肠癌耐药发生机制.方法 分别抽提人结肠癌细胞系SW480及其伊立替康耐药细胞系SW480/CPT总RNA,逆转录合成相应以Cy3标记的cRNA做探针,在Agilent基因芯片上杂交,Axon 4000B扫描仪扫描芯片荧光信号图像.Gene...     

表观遗传调控与胃癌

 胃癌的发生是机体内外环境因素共同影响的结果。研究表明,外界环境因素通过DNA甲基化和（或）去甲基化修饰,组蛋白修饰及小分子RNA等表观遗传学修饰途径调控细胞生长、发育过程中关键基因的表达变化,从而在胃癌的发生及发展过程中发挥重要作用。     

大脑胶质瘤病综合治疗1例报告

大脑胶质瘤病（gliomatosis cerebri,GC）是一种罕见的以神经胶质细胞弥漫侵袭性生长为特点中枢神经系统原发性肿瘤．其预后较差．平均中位生存时间为14．5个月。目前大脑胶质瘤暂无标准治疗方案．放化疗联合靶向治疗是治疗该病的有效方法。我科近期收治了一例大脑胶质瘤患者．经联合治疗后效果较好,现报道如下：1病例资料     

CyclinE-CDK2分子活性调节机制

Cyc linE-CDK2是细胞周期G1/S期的转折中的关键调控因子,其分子活性受各种细胞因子、磷酸化/去磷酸化修饰、泛素介导的蛋白降解途径及细胞周期依赖性蛋白激酶抑制物(cyc lin-dependent k inase in-h ib itor,CK Is)等多种方式构成的精细调控网络调节。其活性失调将导致细胞增殖紊乱甚至肿瘤的发生。认识Cyc linE-CDK2分子活性调节机制有助于理解它在肿瘤形成中的作用。     

幽门螺杆菌感染与老年早期胃癌病程及IL-6、TGF-β1、TNF-α因子的相关性

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与老年早期胃癌患者的病程及胃癌相关细胞因子白细胞介素(IL)-6、转化生长因子(TGF)-β1和肿瘤坏死因子(TNF)-α释放的关系。方法收集胃癌患者59例,均接受~(13)C呼气法检测Hp感染情况,依据Hp感染情况分为阳性与阴性两组,分析Hp感染对两组胃癌病程变化及胃癌相关细胞因子IL-6、TGF-β1、TNF-α的影响。结果 Hp感染以男性患者居多(t=4.32,P<0.05),Hp感染对胃癌分期的影响差异有统计学意义(t=5.77,P<0.05),感染阳性者凹陷型病例居多,Hp感染对老年早期胃癌的病理分型无明显影响(P>0.05),Hp阳性感染患者IL-6(t=6.15,P<0.05)及TGF-β1(t=8.27,P<0.05)均高于阴性组患者。结论老年早期胃癌患者应尽早接受Hp筛查,Hp感染对胃癌病程有影响,阳性感染者应尽早接受抑菌治疗,以有效排除其对胃癌病程的影响。     

肿瘤M2型丙酮酸激酶对肺癌诊断价值的临床研究

目的探讨肺癌患者血浆肿瘤M2型丙酮酸激酶（TU M2-PK）水平变化对其诊断的临床意义。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测40例肺癌患者（肺癌组）、40例良性肺部疾病患者（良性肺部疾病组）和40例正常人（正常对照组）血浆TU M2-PK水平,并与癌胚抗原（CEA）进行比较分析。结果癌组患者血浆TU M2-PK和血清CEA与良性肺部疾病组和正常对照组比较差异有统计学意义（TU M2-PK：18.6 U/mL比9.6和8.5 U/mL;CEA：12.02μg/L比2.4和2.6μg/L;P均〈0.05）。随病程加重,肺癌患者血浆TU M2-PK阳性率逐渐升高,肺癌Ⅲ、Ⅳ期患者血浆TU M2-PK和血清CEA阳性率（78.1%与75.0%）明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（50.0%与50.0%,P均〈0.05）。单独检测血浆TU M2-PK对肺癌的敏感性为72.5%,特异性为90.2%,联合CEA检测敏感度为81.3%,特异性为93.4%。结论 TU M2-PK对诊断肺癌有较高的临床价值,联合CEA检测可提高肺癌的敏感性。     

酵母双杂交筛选原癌基因proto-Dbl的上游调控分子

目的：探讨VL domain对Dbl癌基因活性的调控机制。方法：本文通过酵母双杂交的方法,以proto-Dbl的VL domain为诱饵蛋白对人胎脑文库进行筛选。结果：研究共获得7个能与VL domain相互作用的蛋白。结论：Proto-Dbl VL domain相互作用蛋白的发现将为揭示proto-Dbl的功能奠定基础。     

MCHR2在CHO细胞中的稳定表达及其信号通路分析

目的构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3·1(+),经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,经RT-PCR和Western blot鉴定后,通过测定细胞内cAMP、Ca2+浓度的改变分析MCHR2的信号转导通路。结果成功构建了pcDNA3·1-MCHR2真核表达载体并稳定转入CHO细胞,建立了稳定转染细胞系,成功地表达目的基因,MCH作用于MCHR2后不影响细胞内cAMP生成,可促使细胞内钙库释放Ca2+,进而使胞内Ca2+浓度出现明显而短暂的升高,提示MCHR2的信号转导通路主要是与Gq蛋白偶联。结论人MCHR2的稳定表达和信号转导通路分析为进一步体外研究MCHR2的功能提供了良好的实验基础。