脐血CD34~+细胞体外短期培养扩增研究

为寻找更有效的体外扩增脐血CD34 + 细胞的造血细胞因子组合 ,采集健康产妇脐带血 ,用免疫磁珠法分选CD34 + 细胞。采用SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种具有早期作用的细胞因子的不同组合进行脐血CD34 + 细胞短期无血清液体培养 ,观察培养前后有核细胞、CD34 + 细胞、CD34 + /CD38- 细胞、CFU GEMM、CFU GM和BFU E数量的变化。结果在 3种不同的细胞因子组合中 ,同时应用SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种细胞因子培养 7d的扩增效果最好。突出的发现是在这种条件下CD34 + /CD38- 细胞亚群达到平均 1 97.9倍的扩增效果。提示 :SCF、FLT3 L、TPO和IL 34种细胞因子是脐血CD34 + 细胞体外扩增理想的细胞因子组合     

自体外周血纯化CD34+细胞移植治疗进展型多发性硬化

目的 评价自体外周血纯化CD34+细胞移植治疗进展型多发性硬化(PMS)的安全性和疗效.方法 2002-09―2006-03期间15例PMS患者在首都医科大学宣武医院接受了自体外周血纯化CD34+细胞移植.单独使用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员造血干细胞,全部回输采集物进行CD34+细胞纯化.预处理采用BEAM(卡氮芥、依托泊甙、阿糖胞苷、马法兰)方案.中位随访期为21(3～45)个月,移植前后应用扩充神经功能残疾量表(EDSS)、年平均发病次数进行疗效评价. 结果分选后中位CD34+细胞纯度为93.2 (78.6～97.7)%,中位回收率为67.0(22.4～79.8)%,相当于减少了4个对数级的T细胞.无移植相关死亡,造血重建时间与其自体外周造血干细胞移植(APBSCT)相当,未出现严重的毒性反应及并发症.患者移植后12个月EDSS评分(3.95±2.55)较移植前(5.64±0.71)降低(P＜0.05),年平均发病次数移植后(0.45±0.82)较移植前(1.31±0.71)减少(P＜0.05).移植后45个月疾病无活动者生存率为(47.01±17.87)%,EDSS评分无进展者(包括稳定和改善)生存率为(57.69±20.24)%. 结论自体外周血纯化CD34+细胞移植治疗PMS安全有效.     

肌间沟臂丛和颈深联合阻滞在肩部及锁骨手术中的临床应用

我院从１９９７年１１月～１９９９年４月,应用肌间沟臂丛和颈丝（深）联合阻滞应用于肩部及锁骨手术４２例,效果较好,小结如下：１　临床资料本组４２例中男性３２例,女性１０例,年龄分布１４～１６岁,手术类别如下：单纯锁骨骨折２２例,粉碎性锁骨骨折５例,陈旧性锁骨骨折或合并其它损伤５例;肩关节脱位开放复位克氏针内固定术３例,肩关节脱位开放复位克氏针内固定术加喙突移植术４例,肩关节脱位闭合复位３例,手术时间最长２３０ｍｉｎ,最短１０ｍｉｎ。２　麻醉方法２．１　穿刺点定位２．１．１　臂丛定位　患者仰卧,头稍…     

术前血小板/淋巴细胞比值与胰十二指肠切除术后静脉血栓栓塞症的发生及预后的关系

目的 探讨术前血小板/淋巴细胞比值（PLR）与胰十二指肠切除（PD）术后静脉血栓栓塞症（VTE）的发生及预后的关系。方法 回顾性分析2014年1月至2018年12月在新疆医科大学附属第一、第五医院行PD术的206例患者资料,比较VTE组及非VTE组患者在术前资料、手术因素、血常规、PLR方面的差异,绘制术前PLR预测术后VTE的受试者工作特征（ROC）曲线。根据PLR临界值进一步将VTE组分为高PLR亚组和低PLR亚组,分析两亚组在VTE血栓形成部位、术后生存时间方面有无差异。结果 PD术后发生VTE组（63例）和非VTE组（143例）在PLR上具有统计学差异（t=5.324,P<0.001）。PLR预测术后VTE的ROC曲线下面积（AUC）为0.853（95%CI 0.784~0.928）,敏感性为90.3%,特异性为75.0%,PLR临界值为244.54。高PLR亚组（n=30）术后双侧静脉血栓（BVT）12例、肺栓塞（PTE）13例,低PLR亚组（n=33）BVT 5例、PTE 6例,两亚组存在统计学差异（BVT：χ²=4.925,P=0.026;PTE：χ²=4.720,P=0.030）。高PLR亚组术后中位生存时间11个月（95%CI 10.238~11.762）,低PLR亚组为12个月（95%CI 10.530~13.470）,差异有统计学意义（χ²=5.909,P=0.015）。结论 术前PLR是PD术后发生VTE的独立危险因素,PLR值越大,术后发生静脉栓塞的风险越高,患者术后生存时间越短。根据术前PLR值早期干预具有VTE高风险的患者,可以延长患者PD术后生存时间。     

热变性对血细胞流式细胞术分析结果的影响

目的 初步探讨热变性对外周血细胞在流式细胞术分析结果中的影响,从而提高流式-荧光原位杂交（Flow-FISH）技术的应用.方法 收集5例非骨髓造血干细胞疾病患者肝素抗凝外周血标本,以CD45-Alexa Fluor（R）647标记细胞表面抗原,高温变性后,采用流式细胞术分析热变性前后外周血有核细胞的散射光信号和荧光信号变化.结果 热变性后,外周血粒细胞的侧向散射光明显缩小;单核细胞不易通过散射光被区分和设门.所有细胞CD45表达强度均减弱,以淋巴细胞为著;通过侧向散射光和CD45设门虽能大致区分各群细胞,但不及未热变性细胞清晰.结论 热变性后,外周血细胞在流式细胞术中的散射光信号和荧光信号均发生了变化,按照常规FSC/SSC和CD45/SSC方法设门进行细胞亚群分析的结果不精确,利用系列特异性荧光抗体标记是一种有前景的方法.     

TNF-α对肠屏障功能的影响及机制

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肠屏障功能的影响及机制。方法 体外培养Caco-2细胞,细胞稳定生长后随机分为四组,对照组给予完全培养基培养,低剂量组给予TNF-α 100μg/L,中剂量组给予TNF-α 120μg/L,高剂量组给予TNF-α 140μg/L,培养6 h后,收集细胞、上清及蛋白等。用倒置显微镜观察各组Caco-2细胞形态变化;用CCK-8法检测各组Caco-2细胞的增殖抑制情况;用RT-qPCR法检测各组细胞MUC2 mRNA表达;用Western blotting法检测各组细胞通路蛋白JNK1和MKK4表达。结果 不同剂量TNF-α刺激6 h后,细胞形态发生变化且细胞间紧密连接逐渐消失,细胞活力明显下降,各组差异有统计学意义(P均<0.05)。对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞活力(A₄₅₀)分别为1.071±0.021、0.767±0.028、0.487±0.021、0.249±0.005;与对照组相比,低剂量组、中剂量组和高剂量组Caco-2细胞活力下降(P均<0.05);低剂量、中剂量和高剂量组两两比较差异均有...     

自体造血干细胞移植治疗合并乙型肝炎病毒感染的弥漫大B细胞淋巴瘤患者的有效性和安全性分析

目的 探讨自体造血干细胞移植(auto-HSCT)治疗合并乙型肝炎病毒(HBV)感染的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的有效性、安全性和生存获益。方法 回顾性分析2008年8月至2020年8月于北京大学肿瘤医院接受auto-HSCT治疗的39例初治合并HBV感染的DLBCL患者资料,采用Kaplan-Meier生存曲线进行生存分析。结果 全组患者移植前后的完全缓解率分别为56.41%和71.79%,移植后3年无进展生存率及总生存率分别为38.46%和58.97%,39例患者均获得造血重建。结论 auto-HSCT用于治疗合并HBV感染的DLBCL是安全有效的,可明显改善患者预后。     

食管癌组织微卫星DNA序列不稳定性和杂合性缺失及预后的研究

目的探讨微卫星DNA序列不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）与人食管癌发生、临床病理特征及预后的关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对30例人食管癌中MSI及LOH阳性情况进行研究,术后随访5年,了解预后。结果D3S1067位点MSI发生检出频率较高,为26.7%;D18S58位点MSI阳性率为20%。MSI的发生在食管小细胞癌中较食管鳞癌为高（P〉0.05）;MSI、LOH与肿瘤的病理分级、PTNM分期、有无区域淋巴结转移和浸润深度无关（P〉0.05）。结论食管癌在3p和18q染色体位点均存在微卫星不稳定现象;D3S1067和D18S58二个位点上MSI与食管癌的临床病理类型均相关;研究未发现这两个位点MSI、LOH与食管癌的临床分期、细胞分化程度、癌组织浸润深度和有无区域淋巴结转移等参数相关;3p位点基因的改变在食管鳞癌发生过程中具有较重要意义。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者糖、脂代谢紊乱的研究

目的通过观察OSAHS患者血清内脂素、血糖、甘油三酯水平的变化,探讨糖脂代谢紊乱与0sAHS的相关性。方法选择OsAHS患者45例,轻度OSAHS患者组20例,中重度0sAHS患者组25例。选择正常对照组20例。采取酶联免疫吸附法（ELISA）测定空腹血清内脂素的浓度,常规检测血糖、甘油三酯。结果轻度及中重度OSAHS组与正常对照组比较,血清内脂素水平均升高（F=38．59,P〈0．01）;中重度OsAHS组与轻度OSAHS组比较,血清内脂素水平升高（t=2．93,P〈0．01）。轻度OSAHS组与正常对照组比较,甘油三酯水平升高（t=2．97,P〈0．01）。血糖升高不明显（t=1．58,P〉O．05）;中重度0sAHS组与正常对照组比较,甘油三酯、血糖水平均升高（t=4．26,3．01,P值均〈0．01）。中重度0sAHs组与轻度0sAHS组比较,甘油三酯、血糖水平升高（t=3．12,2．93,P值均〈O．01）。血清内脂素与反映睡眠呼吸严重程度的指标有相关性（r=0．83,0．615,0．715,0．642,0．710,P值均〈O．01）。结论0sAHS患者存在血清内脂素、血糖、甘油三酯水平的异常,且与OSAHS的病情严重程度相关,说明0SAHS与糖脂代谢紊乱具有相关性。     

肿瘤坏死因子-α、白介素-8在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者及其合并冠心病发病中的作用

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是不稳定型心绞痛、心肌梗死等动脉粥样硬化性疾病独立危险因素.但其机制尚不清楚.本文观察OSAHS患者及其合并冠心病(CHD)患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-8水平的变化,探讨细胞因子在OSAHS及其合并CHD发生发展中作用.