维吾尔族妇女宫颈癌及癌前病变组织中 EGR1和 ID4基因表达下调与 HPV 感染的关系

目的：探讨宫颈癌及癌前病变组织中基因下调表达调控与人乳头状瘤病毒（human papillomavirus, HPV）感染的依存关系,为建立 HPV 筛查预警的宫颈癌辅助诊断指标提供依据。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）Ⅱ～Ⅲ及宫颈炎患者的新鲜宫颈上皮组织标本共100例,提取组织 DNA 和 RNA,鉴定 HPV 阳性和型别,选择 HPV 阳性CSCC 和 CINⅡ～Ⅲ及 HPV 阴性宫颈炎组织 RNA,利用荧光定量 RT-PCR 方法鉴定早期生长反应基因-1（EGR1）、DNA 结合抑制因子4（ID4）、FBJ 鼠科骨肉瘤病毒原癌基因（FOS）和早期应急蛋白2（IER2）基因的转录表达水平。结果通过 HPV 阳性鉴定和分型,鉴别出 HPV16、18、45、31等8种 HPV 感染型别,宫颈癌、CIN 和宫颈炎组织的 HPV 阳性率分别为94．4％、75．0％和31．3％,其中 HPV16阳性率为66．6％、68．7％和31．3％;HPV 阳性的 CSCC 组织中 EGR1、ID4、FOS 和 IER2基因的 mRNA 表达水平低于 HPV 阳性的 CIN 和 HPV 阴性宫颈炎,且 CSCC 与 CIN 或 NC 比较差异均有统计学意义（P ＜0．05）,而 HPV 阳性的 CIN 组织中4种基因的表达水平均低于 HPV 阴性的宫颈炎组织,两者 EGR1和 ID4基因表达水平差异有统计学意义（P ＜0．05）;从 HPV16感染的角度分析,CSCC 或 CIN 与宫颈炎 EGR1和 ID4表达水平差异有统计学意义（P ＜0．05）,但是 CSCC 与 CIN 相比较,只有 EGR1基因表达水平差异有统计学意义（P ＜0．05）,而 ID4基因差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论宫颈癌及癌前病变与依赖于 HPV 感染的 EGR1和 ID4基因表达下调有关,其中 EGR1基因表达水平变化可能与癌前病变和 HPV16感染的关系更为密切,可能成为 HPV 筛查预警的宫颈癌辅助诊断指标,并为揭示 HPV感染的致病和致癌分子机制提供了重?     

DOG1在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨 DOG1在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其临床意义。方法：免疫组化 Envision 法对73例 GIST 和26例非 GIST 间叶源性肿瘤检测 DOG1的表达,分析 DOG1与 GIST 的各项临床病理参数之间的关系。结果：在73例 GIST 中 DOG1、CD117和 CD34的阳性率分别为91．78％、94．52％和91．78％,而在26例非GIST 中阳性率为11．54％、3．85％ 和23．08％,以上指标在两组间的表达有统计学差异（P ＝0．000）;DOG1检测 GIST 灵敏度和特异度分别为91．80％、88．50％,而 DOG1联合 CD117检测 GIST 灵敏度和特异度分别为98．60％和84．60％,灵敏度最高;DOG1的表达与 GIST 的性别、年龄、肿瘤的位置、肿瘤的大小、核分裂象和恶性潜能分级等临床病理因素无相关性（P ＞0．05）,同时 DOG1的表达与 GIST 的预后也无相关性（P ＞0．05）。结论：在 GIST 的诊断中 DOG1与 CD117一样是敏感而特异的指标,尤其是对 CD117阴性的 GIST 的诊断中,能够起很好的补充作用,但不能作为评价 GIST 预后的指标。     

宫颈癌及癌前病变的全基因组表达谱分析及下调表达候选基因鉴定

目的探讨维吾尔族妇女宫颈癌组织特异的下调表达基因谱,建立基于下调表达基因的宫颈癌早期诊断方法。方法收集维吾尔族妇女宫颈病变新鲜组织标本72例,其中宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcino-ma,CSCC)25例,宫颈内上皮瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)22例,正常宫颈组织(normal cervix,NC)25例。选择20例组织标本(CSCC 7例,CINⅢ6例,NC 7例),提取组织RNA,通过人类全基因组表达谱芯片及生物信息分析,筛选宫颈癌及癌前病变(CIN)特异性下调表达候选基因。通过对CSCC与正常对照(NC)组的基因差异表达谱进行比较分析,选取10种差异表达倍数较高的候选基因,利用72例宫颈病变组织RNA,对10种下调表达候选基因的表达水平进行半定量RT-PCR鉴定,确定宫颈癌及癌前病变与该基因表达水平变化的关系。结果以2倍及以上表达差异为量化标准,有下调表达候选基因112种。72例宫颈病变组织RNA的半定量RT-PCR筛查分析,发现在CSCC与正常对照组之间,FOSB、DNASE1L3、SCARA5、EGR1、ABI3BP、FOS、KLF4、RHOB、IER2和ID4等10种下调表达基因的差异均有统计学意义(P<0.05)。DNASE1L3、EGR1、FOS、KLF4和IER2等5种基因的表达水平差异在CIN与正常对照组之间有统计学意义(P<0.05),但是除了FOS基因外,其余4种基因表达在CSCC与CIN组之间无差异(P>0.05)。结论维吾尔族妇女宫颈癌发病进程可能与一系列基因的下调表达密切相关,而DNASE1L3、EGR1、FOS、KLF4和IER2等5种基因的表达水平变化可能成为宫颈癌早期预警指标。     

下齿槽神经阻滞麻醉引起暂时性面瘫机理及对策

资料及观察下齿槽神经阻滞麻醉可出现暂时性面瘫的不良反应。讨论由于注药过多产生压力，药液顺间隙通路进入腮腺筋膜内，麻醉面神经总干引起暂时性面瘫。对策做好解释工作，不需特殊处理。     

NADPH氧化酶Nox-4在DSS诱导的小鼠肠炎中的表达及作用

目的 研究Nox-4及抗氧化物在葡聚糖硫酸钠（dextran sulphate sodium,DSS）诱导的小鼠炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）模型中的表达水平,探讨氧化应激及NADPH氧化酶在IBD发病机制中的作用。方法 将16只SPF级雄昆明小鼠随机分为正常组和DSS组,每组8只,正常组正常饮水,DSS组饮用2.5% DSS溶液,7天建立小鼠肠炎模型。通过结肠长度、HE染色组织病理学评分、疾病活动指数（disease activity index,DAI）评估肠道炎症程度;免疫组织化学法检测结肠组织中Nox4蛋白含量,并分别采用实时定量PCR与生化方法检测组织中Nox-4的mRNA表达水平及血清浓度,评价机体氧化应激程度;利用实时定量PCR法分析小鼠肠道组织中Mn-SOD、GSH和CAT mRNA的表达情况,评价机体抗氧化功能;实时定量PCR法检测结肠组织中MCP-1、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平、ELISA法检测上述3种炎性因子血清浓度以反应机体炎症程度。结果 与正常组相比,DSS组小鼠体质量明显下降（P<0.01）,DAI评分明显增高（P=0.000）,结肠长度明显缩短（P<0.01）,肠道呈现中至重度炎症状态; DSS组结肠组织中Nox-4蛋白表达明显上调,Nox-4 mRNA含量显著升高（P=0.000）,血清Nox-4浓度在DSS组较正常组更高（P<0.01）;结肠组织中抗氧化物Mn-SOD、GSH和CAT mRNA的表达在DSS组中均明显增高（P=0.000）;比较机体炎症指标,DSS组小鼠血清中MCP-1、IL-1β、TNF-α浓度较正常组均呈不同程度上升（P均=0.000）,结肠组织中3种炎性因子的mRNA相对表达量较正常组显著升高（P均=0.000）。结论 Nox-4通过氧化应激途径参与了肠道黏膜炎性反应的进程,并可能在IBD的转归中发挥着更为重要的作用。     

慢性束缚应激对小鼠胃食管的影响

目的探讨心理应激在胃食管反流病(GERD)发生、发展中的作用,并为束缚应激模型的成功建立提供参考指标。 方法20只雄性SPF级昆明小鼠随机分2组(每组10只),即慢性束缚应激(CRS)组和正常对照(NC)组。CRS组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间2组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d。实验结束后通过葡萄糖耐量试验(GTT)、胰岛素耐受试验(ITT)、小鼠胃食管组织及血清,检测相关指标确认该模型建立成功与否,同时在光学显微镜下观察胃食管黏膜组织学改变。 结果CRS组小鼠体重增加量为(8.6±3.1)g,明显低于NC组小鼠(12.5±3.0)g,差异有统计学意义(P<0.05);胰岛素耐受试验(ITT)结果显示,CRS组小鼠出现胰岛素抵抗现象;ELISA实验显示CRS组小鼠HPA轴相关激素水平明显高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。CRS组小鼠胃食管黏膜可见充血、水肿及炎症细胞的浸润。 结论CRS可影响机体,引起GERD相关组织病理学变化。为阐述心理因素在GERD中的作用机制研究提供简单有效并且具有借鉴意义的实验基础。     

ESR1基因多态性与新疆胆石症相关性研究

目的 探讨雌激素受体1（estrogen receptor 1, ESR1）基因rs35396879多态性位点基因型与新疆维吾尔族、汉族胆石症之间的关系。方法 采用病例-对照研究方法,收集胆石症患者维吾尔族 87 例、汉族54例; 正常对照组维吾尔族56例,汉族45例,检测及比较其一般临床特征指标。同时采集外周静脉血,提取基因组DNA,运用Sequenom MassARRAY 单核苷酸多态性（SNP）基因型分析技术定量检测ESR1基因rs35396879 位点基因分型,分析基因型分布在维吾尔族、汉族胆石症组和健康对照组间的差异。结果 维吾尔族胆石症组低密度脂蛋白LDL显著高于对照组（P < 0.05）, 性别分布在汉族胆石症组和对照组之间差异有统计学意义（P < 0.05）,汉族人群胆石症组总胆固醇TC显著高于对照组（P < 0.05）;ESR1基因rs35396879 位点在维吾尔族胆石症患者中的基因型和等位基因分布频率与维吾尔族对照组和汉族胆石症组差异均有统计学意义（P < 0.05）。而汉族胆石症患者与汉族对照组、维吾尔族对照组和汉族对照组之间差异无统计学意义。结论 维吾尔族和汉族胆石症患者之间ESR1的rs35396879 位点基因型和等位基因频率分布有差异,这可能是两个民族具有不同胆结石临床表型的潜在分子机制。     

胰岛因子1在维吾尔族妇女子宫颈癌中的表达及相关研究

目的探讨胰岛因子1(ISL1)在维吾尔族妇女宫颈病变组织中的表达情况及其临床意义。方法采用半定量RT-PCR技术检测ISL1在维吾尔族妇女宫颈鳞癌(CSCC,15例)、宫颈上皮内瘤变(CINⅡ～Ⅲ,13例)和正常宫颈组织(12例)中的mRNA表达情况;采用免疫组织化学(S-P)法检测维吾尔族妇女CSCC(42例)、CINⅢ(23例)和正常宫颈组织(20例)中ISL1蛋白的表达情况。结果 CSCC组织中ISL1的mRNA表达水平(0.153 0±0.122 3)明显低于正常宫颈组织(0.271 3±0.763 3),差异有统计学意义(P<0.05),CINⅡ～Ⅲ组织中ISL1的mRNA转录表达水平(0.225 3±0.132 5)与CSCC及正常宫颈组织比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学分析结果显示,CSCC组织中的ISL1蛋白表达水平(16.67%)显著低于正常宫颈组织(55.00%),差异有统计学意义(P<0.01),CINⅢ组织中ISL1的表达水平(26.09%)与CSCC及正常宫颈组织比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ISL1蛋白和mRNA在维吾尔族妇女宫颈癌中呈低表达,对该基因进行检测有利于宫颈癌的早期诊断、早期筛查。