王庆甫教授基于三分法辨证论治腰部筋伤的经验

腰部筋伤包括腰部扭挫伤、第三腰椎横突综合征、腰椎间盘突出症、腰椎椎管狭窄症、梨状肌综合征等,是目前大众化、年轻化的多发疾病之一。常用的西药及手术疗法大多会产生一定的副作用,同时部分患者畏惧手术治疗,为此,探寻一种副作用小且效果更为突出的治疗思路尤为关键。王庆甫教授作为清宫正骨的传承人,基于四十年临床经验创立了“三分法”,将腰部筋伤分为“伤肉、伤筋、伤骨”3个阶段,诊断时不仅仅关注MRI、CT等诊断报告,也关注患者的主观感受及手下触诊的感受,将辨证论治思维运用于腰部筋伤的诊断中,诊断更为明确。治疗时每个阶段治疗方案不同,最终效果更为突出。本文就三分法展开介绍,并探讨三分法治疗腰部筋伤过程中的常见问题,以期提高腰部筋伤的治疗效果。     

应用PEG 6000探讨滑膜组织外泌体的提取与鉴定

目的:应用PEG 6000提取滑膜组织中外泌体并进行鉴定。方法:收集于北京中医药大学第三附属医院骨科行膝关节镜或关节置换手术过程中废弃的滑膜组织,用8%PEG 6000溶液对滑膜组织分泌的外泌体进行富集、提取,应用透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)、Western Blot对外泌体的形态、粒径大小以及标志蛋白CD9、CD63和Flotillin-1进行检测。结果:应用PEG 6000溶液可成功提取出富集类圆形、盘状囊泡的提取物,NTA鉴定显示粒径为(98.6±10.8)nm,Western Blot显示外泌体标志蛋白CD9、CD63和Flotillin-1均呈阳性高表达。结论:通过对提取物的形态、粒径大小以及标志蛋白分析证实PEG 6000从滑膜组织提取到的物质为外泌体,为以后研究滑膜组织外泌体的功能和机制提供了方法学基础。     

跌打万应膏治疗踝关节软组织损伤的实验研究

目的:探讨跌打万应膏治疗踝关节软组织损伤的作用机制。方法:选取雄性大鼠72只,称重,随机分为6组,每组12只,分别为空白组、模型对照组、跌打万应膏高、中、低剂量组、对照组(冰敷),空白组不用药,其他组按体重各自给药。釆用经典的重锤坠落法造模建立大鼠踝关节急性软组织损伤模型,观察各组大鼠第3天和第7天后血清炎性递质IL-1β、TNF-α的水平以及应用荧光聚合酶链式反应(PCR)及蛋白质免疫印迹技术(Western Blot)检测各组大鼠受损软组织TLRs/MyD88/NF-κB通路表达水平的变化。结果:跌打万应膏可降低外周血中的IL-1β、TNF-α炎症因子水平,并显著抑制TLRs/MyD88/NF-κB信号通路TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB基因及蛋白的激活和表达。结论:跌打万应膏外敷以中剂量疗效为佳,TLRs/MyD88/NF-κB信号通路可能是跌打万应膏的作用途径之一。     

基于网络药理学探讨桂芍配伍治疗骨关节炎的作用机制

目的运用网络药理学技术研究“桂枝—白芍”药对治疗骨关节炎的主要活性成分和靶点,进而探讨桂芍治疗骨关节炎的潜在作用机制。方法通过检测网络数据库平台(TTD、DrugBank和GeneCards)数据库构建骨关节炎疾病靶点;通过检测TCMSP、HIT数据库筛选桂枝—白芍药对活性成分及靶点。利用Cytoscape3.7.2软件构建活性成分—靶点网络图,并对靶点进行KEGG及GO富集分析。结果从“桂枝—白芍”药对中共筛选出17个有效成分,与骨关节炎相关作用靶点40个,KEGG与GO富集分析显示“桂枝—白芍”药对主要与癌症、免疫、炎症以及细胞衰老、凋亡等信号通路有关。结论本研究利用网络药理学的方法,初步揭示了“桂枝—白芍”药对对于骨关节炎的主要活性成分、治疗靶点及相关信号通路,为进一步深入研究其作用机制提供了参考。     

通络止痛凝胶制剂对KOA滑膜组织中p53/miR-502-5p/NF-κBp65的影响

目的:观察通络止痛凝胶制剂对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)滑膜组织中p53、miR-502-5p、NF-κBp65的影响,探讨通络止痛凝胶制剂治疗KOA的作用机制。方法:选取8周龄Wistar大鼠36只,体重200～220 g,平均208 g,采用随机数字表法分为正常组、模型组、中药组,每组12只。采用改良Hulth法建立KOA模型,造模4周后,中药组给予通络止痛凝胶制剂外擦,3次/天,共2周;正常组和模型组正常饲养、不干预。治疗结束后,观察各组标本形态学变化;采用qPCR检测滑膜组织miR-502-5p的变化,再分别采用qPCR、Western Blot法检测滑膜组织p53、NF-κBp65、IL-1β、TNF-α、MMP-13的含量。结果:(1)标本形态学观察结果,模型组关节软骨透明度下降、表面不平整,滑膜肥厚增生并有大量炎性细胞浸润,关节液质地较黏稠;中药组关节软骨透亮度下降不明显,关节面较平整,滑膜轻度增生并有少量炎性细胞浸润,关节液质地较清晰。(2)与正常组比较,模型组、中药组滑膜组织miR-502-5p含量升高(P0.05),p53的mRNA及蛋白表达下降(P0.05),NF-κBp65、IL-1β、TNF-α、MMP-13的mRNA及蛋白表达升高(P0.05)。(3)与模型组比较,中药组滑膜组织miR-502-5p含量降低(P0.05),p53的mRNA及蛋白表达升高(P0.05),NF-κBp65、IL-1β、TNF-α、MMP-13的mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。结论 :滑膜组织中p53、miR-502-5p、NFkBp65的表达与滑膜的增生及炎症反应密切相关,通络止痛凝胶制剂可能是通过调控滑膜组织中p53、miR-502-5p、NF-κBp65的表达,从而减轻KOA滑膜的增生及炎症反应。     

电针联合穴位注射治疗神经根型颈椎病疗效观察

目的:观察电针配合穴位注射腺苷钴胺改善神经根型颈椎病患者颈椎病临床评价量表评分(CASCA评分)及肘关节肌力的临床疗效。方法:选取2018年1月至2019年3月北京中医药大学第三附属医院收治的神经根型颈椎病患者70例作为研究对象,按照就诊的先后顺序随机分为观察组和对照组,每组35例。其中观察组采用穴位注射腺苷钴胺联合电针治疗,对照组采用电针治疗。对比治疗前后2组VAS评分,CASCA评分及上肢肘关节周围肌力变化,并进行统计学分析。结果:观察组总有效率为94.3%,对照组总有效率为80.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:2种治疗方法对本病患者的临床表现如疼痛、颈椎功能及上肢肌力等方面均有不同程度的改善,但穴位注射联合电针观察组疗效明显优于单纯电针观察组。     

β－catenin与NF－κB信号通路在膝骨关节炎滑膜炎症中的表达特点及意义

目的:探讨β-catenin与NF-κB信号通路在不同程度膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠滑膜组织中的表达情况。方法:选取SPF级雄性大鼠48只,体重(200±20) g,采用随机数字表法将大鼠分为造模组(32只)、假手术组(8只)和对照组(8只)。造模组采用Hulth法建立KOA模型大鼠,并分别于造模后第2、4、8、12周取材处死8只,模拟轻度、早期、中度、重度KOA模型大鼠;假手术组仅切开膝关节囊后缝合排除手术因素干扰;对照组不做任何处理。观察各组大鼠动物行为、滑膜增生与软骨退变情况,采用实时荧光PCR检测各组大鼠滑膜组织中NF-κB信号通路及β-catenin的表达。结果:成功建立KOA大鼠模型,取材过程中可见滑膜增生在轻度、早期KOA模型中表现明显,之后逐渐减少;而软骨退变在中度、重度KOA模型中表达明显,并随时间延长逐渐加重。PCR结果显示造模后4周组8.57±0.46、8周组4.23±0.09β-catenin水平高于对照组1.18±0.22 (P0.05);2周组12.04±4.02、4周组8.54±2.13 TLR-2水平高于对照组0.88±0.15 (P0.05);TLR-4则在2周组5.04±0.93、4周组3.29±0.58及8周组1.63±0.12中表达显著高于对照组1.12±0.11(P0.05),NF-κB在2周组10.15±2.04、4周组15.97±4.17、8周组7.69±1.48及12周组6.70±1.58中表达显著高于对照组1.26±0.27(P0.05);IL-1β在4周组2.79±0.25、8周组2.46±0.32中表达显著高于对照组1.00±0.00(P0.05)。结论:在RNA表达层面,β-catenin与NF-κB信号通路均参与了大鼠KOA模型的滑膜炎症反应,两者在其下游炎性因子IL-1β的表达及KOA退变中可能共同发挥调控作用。