cDNA微阵列和抑制消减杂交技术筛选胃癌下调功能基因组的研究

目的 筛选胃癌下调基因组，发现新的胃癌下调基因。方法 采用cDNA微阵列技术，检测5例胃癌与相对应正常胃粘膜间mRNA表达差异基因，筛选胃癌下调基因组。采用抑制消减杂交技术，建立5人份正常胃粘膜mRNA抑制消减杂交胃癌mRNA的差异表达文库，用聚合酶链反应及差异表达克隆菌转膜反向杂交判定其消减效率。随机挑选阳性克隆测序，寻找胃癌下调新基因，并经逆转录-聚合酶链反应证实。结果 筛选到60个胃癌下调基因，其中包括抑癌基因，凋亡相关基因，DNA复制、转录、翻译相关基因，细胞周期相关基因，细胞迁移相关基因等。克隆到两个胃癌下调的新基因片段。结论 得到60个胃癌下调基因，它们共同作用与胃癌的发生、发展、转移密切相关。成功建立了用于筛选胃癌下调新基因的抑制消减杂交cDNA文库，发现了两个新的胃癌下调基因片段．