干细胞微囊对大鼠Leydig细胞急性氧化应激损伤的保护机制研究

目的:揭示干细胞微囊改善Leydig细胞急性氧化应激损伤的机制。方法:实验组采用单侧睾丸切除的SD大鼠5例建立睾丸缺血-再灌注损伤模型,经尾静脉注射干细胞微囊进行干预。对照组采用单侧睾丸切除的SD大鼠5例经尾静脉注射等量PBS。再灌注2 h后HE染色检测睾丸组织中中性粒细胞浸润程度,TUNEL和caspase 3免疫组化染色检测Leydig细胞凋亡,Ki67免疫组化染色检测Leydig细胞增殖。结果:实验组大鼠睾丸间质血管中中性粒细胞黏附明显少于对照组,且TUNEL及caspase 3免疫组化结果显示Leydig细胞的凋亡数量明显少于对照组,Ki67免疫组化结果显示实验组Leydig细胞增殖数量多于对照组。结论:干细胞微囊可减少中性粒细胞在急性期的黏附,通过减少活性氧自由基的来源改善Leydig细胞的急性氧化应激损伤。     

低浓度胶原酶差速消化法分离纯化小鼠Leydig细胞的研究

目的 建立简单快速获得Leydig细胞的分离纯化新方法.方法 分阶段应用低浓度胶原酶,采用差速消化法分离纯化小鼠睾丸内的Leydig细胞.将不同阶段获得的细胞分别培养,观察其原代生长情况.采用免疫荧光染色,观察培养的Leydig细胞内的标志性酶--3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)和17α羟化酶(CYP17A1)的表达情况.结果 使用低浓度胶原酶短时间重复三次消化,以第二次消化获得的Leydig细胞纯度最高69.6%±4.16%,增殖能力最强.培养7 d后纯度增高至90%.原代培养的各个阶段均可检测到睾酮合成酶谱的表达.结论 应用低浓度胶原酶差速消化法可以获得大量高活力的Leydig细胞,原代培养效果理想,细胞功能保存完好.     

双镜联合治疗儿童复杂上尿路结石的可行性分析

目的探讨双镜联合治疗儿童复杂性上尿路结石的可行性和安全性。方法回顾性收集2017年1月至2020年1月于上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心接受治疗的9例复杂性上尿路结石患儿作为研究对象,其中5例为输尿管末端狭窄合并肾结石,1例为右肾重复畸形下半肾积水合并结石,1例为双侧输尿管结石伴右肾重度积水,1例为肾盂输尿管连接部狭窄合并下盏结石,1例为鹿角状结石。手术方式包括腹腔镜联合输尿管软镜或经皮肾镜、经皮肾镜联合输尿管软镜2种。结果9例患儿中男童7例,女童2例,平均年龄(45±47)个月,中位年龄27个月。所有患儿均成功完成手术,平均手术时间(138±37)min,中位手术时间134 min,无明显手术并发症。5例输尿管末端狭窄合并肾结石患儿结石成分均为草酸钙,术后随访期间未见结石复发。1例重复肾下半肾积水患儿结石成分为草酸钙,术后随访期间未见结石复发。1例双侧输尿管结石伴右肾重度积水患儿结石成分为尿酸,目前该患儿尚未拔除DJ管。1例肾盂输尿管连接部狭窄合并肾下盏结石的患儿结石成分为碳酸磷灰石和一水草酸钙,随访至今未见复发。1例鹿角状结石成分为草酸钙,术后随访1年结石复发。结论双镜联合治疗方法可安全有效地处理儿童复杂性上尿路结石。     

排尿性尿路超声造影对儿童原发性膀胱输尿管反流的诊断价值

目的 探讨排尿性尿路超声造影(contrast-enhanced voiding urosonography,CeVUS)对儿童原发性膀胱输尿管反流(vesicoureteral reflux,VUR)的诊断价值.方法 回顾性分析上海儿童医学中心2018年12月至2020年6月116例[232个肾盂-输尿管单位(pye...     

球囊扩张术治疗原发性梗阻型巨输尿管的可行性研究

目的总结采用球囊扩张术治疗的原发性梗阻型巨输尿管患儿资料, 探讨该治疗方法的安全性及可行性。方法回顾性收集2018年9月至2022年1月在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心泌尿外科行球囊扩张术治疗的原发性梗阻型巨输尿管患儿术前及术后随访资料, 包括年龄、性别、肾盂前后径、输尿管最宽径、分肾功能等数据。采取自身前后对照的方法对疗效进行分析。结果本院共收治41例原发性梗阻型巨输尿管患儿, 共42侧输尿管实施球囊扩张术。2例拔除DJ管后仍有反复腹痛, 改行输尿管再植术治愈;1例球囊扩张失败, 术后未予进一步治疗, 随访至今已33个月, 肾积水症状无缓解;1例行扩张术中输尿管破裂, 经输尿管再植术治愈。其余37例(38侧输尿管)均手术成功并获随访, 患儿年龄(32.9±35.7)个月, 随访时间(17.2±9.5)个月, 术前分肾功能(48%±10%);肾盂前后径术前为(17.8±14.7)mm, 术后为(9.7±8.9)mm, 差异有统计学意义(P<0.01);输尿管最宽径术前为(13.4±2.9)mm, 术后为(7.5±6.9)mm, 差异有统计学意义(P<0.01)。结论...     

维生素D及其受体与肾盂输尿管连接部狭窄相关性的初步研究

目的初步分析维生素D及其受体与肾盂输尿管连接部狭窄(ureteropelvic junction obstruction,UPJO)发生的相关性。方法选择2016年3月1日至2016年10月31日上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心小儿泌尿外科收治的因UPJO行离断式肾盂输尿管成形术的患儿为UPJO组(n=10),因肾脏肿瘤行肾与输尿管切除术的患儿为对照组(n=8)。收集两组术前血标本检测维生素D三项(25-羟维生素D 2、25-羟维生素D 3及总25-羟维生素D的含量)。取两组术中标本采用ELISA法,检测维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、转化生子因子(transforming growth factor-β,TGF-β)及钙黏蛋白E的含量。结果两组术前血标本中25-羟维生素D 2、25-羟维生素D 3及体内总25-羟维生素D的含量均无统计学差异(P>0.05)。UPJO组VDR、TGF-β、钙黏蛋白E的平均值分别为(771.6±70.57)ng/每克总蛋白,(131.0±10.33)ng/每克总蛋白及(125.5±10.98)ng/每克总蛋白;对照组分别为(2128±251.8)ng/每克总蛋白,(82.3±6.834)ng/每克总蛋白及(386.6±78.71)ng/每克总蛋白。两组UPJ标本中VDR、TGF-β、钙黏蛋白E水平的差异有统计学意义(P<0.05)。结论UPJO组VDR表达量显著低于对照组,提示VDR可能与UPJO发生相关,初步推测其机制可能是肾盂输尿管连接部VDR表达量减少引起TGF-β表达量明显升高,使得肾盂输尿管连接部的组织纤维化加重,进而导致或加重UPJO。     

条件培养液诱导人脐带间充质干细胞分化为Leydig细胞的实验研究

目的:探讨睾丸Leydig细胞(LC)来源的条件培养液诱导人脐带间充质干细胞(Hu MSCs)分化为LC的可行性。方法:用贴壁法和酶消化法分别分离培养Hu MSCs和LC。用LC来源的条件培养液诱导Hu MSCs,诱导前的Hu MSCs作为对照。培养3、7、10 d后,对干细胞进行RT-PCR检测LHR、St AR和3β-HSD的mRNA表达;培养2周后,对诱导后的干细胞进行CYP11A1、CYP17A1和3β-HSD免疫荧光检测;培养4周后,Western印迹检测3β-HSD。结果:干细胞诱导3、7、10 d后,RT-PCR发现LHR、St AR及3β-HSD表达阳性;诱导2周后,免疫荧光检测发现CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD表达阳性;诱导4周后,Western印迹检测发现3β-HSD表达阳性。对照组各项检测均为阴性。结论:在LC来源的条件培养液诱导下,Hu MSCs具有向合成类固醇激素的细胞分化的可能,并最终可能分化为LC。     

低氧促进人脐带间充质干细胞外囊泡生成

目的探讨低氧对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)及其细胞外囊泡(EVs)生成的影响, 初步阐述其调控机制。方法分离培养原代hUCMSCs, 将其分为常氧组和低氧组, 分别在常氧(21%O2)和低氧(5%O2)培养箱中培养, 用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖, 提取hUCMSCs生成的EVs, 利用透射电子显微镜(TEM)和纳米颗粒示踪分析(NTA)进行鉴定, 蛋白质印迹法(Western blot)检测EVs膜标志蛋白CD9和CD63表达, 转录组高通量测序分析低氧对hUCMSCs表达谱的影响, Western blot分析细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)和磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、以及磷酸化40×103大小的富含脯氨酸的Akt底物(p-PRAS40)的表达水平。两组间采用t检验进行统计分析。结果低氧处理hUCMSCs 24 h后, CCK-8结果显示低氧组吸光度值(2.151±0.116)高于常氧组(1.929±0.145), 差异有统计学意义(t=2.659, P<0.05);NTA检测结果显示低氧组EVs颗粒浓...