非清髓性和清髓性异基因造血干细胞移植后淋巴细胞重建的比较

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是治疗恶性血液病的有效手段。传统的清髓性allo-HSCT采用最大限量的放化疗预处理方案，以期彻底根除肿瘤细胞和摧毁宿主的免疫系统，但伴随着与剂量相关的不良反应和死亡率明显增高。近年来，以氟达拉滨为主的非清髓性预处理方案，应用了强烈、短暂的免疫抑制剂，减少了药物相关的不良反应，造血恢复快，与移植相关并发症和病死率明显降低。我们研究了非清髓性和清髓性两种预处理方案对移植后免疫功能的影响。     

非清髓性异基因造血干细胞移植后CD45RA+细胞的监测及其意义

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)已成为治疗恶性血液病的有效手段,但移植后仍有些患者出现疾病的复发。allo-HSCT后外周血中T淋巴细胞表型和功能的恢复在免疫监视中起着重要作用。我们监测了20例非清髓性异基因造血干细胞移植(NST)患者移植后外周血中CD45RA 细胞的变化,现报告如下。对象与方法一、研究对象20例均为2000年10月至2003年7月在本院接受HLA相合的同胞间外周血异基因造血干细胞移植的患者,其中男性12例,女性8例,年龄18~56岁,中位数35岁。20例的原发病,7例为急性粒细胞白血病(AML),2例为急性淋巴细胞白血病(ALL),11例为…     

初诊外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值对多发性骨髓瘤患者预后的影响

目的 探讨初诊外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对多发性骨髓瘤(MM)患者生存的影响.方法 回顾性分析2007年1月至2015年12月南京医科大学附属无锡人民医院收治的195例MM患者临床资料,根据入院时的NLR分为低NLR组(NLR<3)和高NLR组(NLR≥3),分析初诊时NLR与患者临床指标、治疗效果和总体生存期的关系.结果 高NLR组61例,低NLR组134例.与低NLR组相比,高NLR组肌酐、血清钙偏高(均P<0.05).低NLR组初始诱导治疗后完全缓解率为32.1％(43/134),高于高NLR组的16.4％(10/61),两组差异有统计学意义(χ2=5.218,P=0.022);低NLR组中位生存时间为38个月,长于高NLR组的27个月,两组差异有统计学意义(P=0.022).单因素及多因素回归分析结果显示,NLR≥3是影响MM患者预后的危险因素之一(P=0.024),但不是独立危险因素(P=0.064).结论 MM患者的NLR与肌酐、血清钙相关,可以用来评估患者总体生存期以及诱导治疗缓解情况.     

异基因造血干细胞移植后免疫功能重建

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患者的免疫功能受到严重损伤,移植后免疫功能低下主要表现在①免疫个体发生学过程再现的削弱;②缺乏长期稳定的供体免疫功能的转移;③移植物抗宿主病(GVHD)对免疫功能的影响;④胸腺功能的降低.临床实践证实,清髓性治疗后患者的免疫功能处于麻痹状态可以持续1年之久.     

硼替佐米对白血病细胞株HEL抑制作用的初步探讨

 目的　探讨硼替佐米单独或联合化疗药物对急性白血病细胞株HEL生长的影响及其机制。方法　MTT法检测药物对HEL的生长抑制效应,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡,Western blotting检测凋亡及细胞周期相关蛋白表达。结果　硼替佐米对HEL细胞的生长抑制作用呈浓度依赖关系,其半数抑制浓度（IC50）为7.15 nmol／L;硼替佐米联合化疗药物明显增强抑制HEL细胞生长;流式细胞术检测可见时间依赖性的G2／M周期阻滞;Western blotting检测显示bcl-2表达下降,bax、p27表达增高,联合用药时具有相加效应,但不管是单独或联合用药,p53蛋白的表达均无明显改变。结论　硼替佐米可能是一种有效治疗急性白血病的药物,与柔红霉素联合应用有更强的抑制肿瘤细胞生长和诱导其凋亡的作用,其机制可能与bcl-2,bax及p27蛋白的调节有关,是非p53依赖性的。     

难治与复发急性白血病MDR1和WT1与临床多药耐药的关系

目的：探讨ＭＤＲ１和ＷＴ１两种基因在临床耐药中的作用及相互关系。方法；用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例急性白血病（ＡＬ）患者骨髓和１０名正常人外周血单个核细胞中ＭＤＲ１基因和ＷＴ１基因的表达。结果 两者在初始敏感组分别为１４．８１％和１３．３３％，在难治复发组分别为６０％和５５．５７％，两组差别均有显著性（Ｐ均〈０．０１），ＭＤＲ１和ＷＴ１的相关性，γｓ＝０．２８０，Ｐ〉０．２。结     

STR多态性在骨髓移植监测中的初步研究

目的：建立常染色体STR位点检测骨髓移植后嵌合状态的PCR检测方法，为白血病患者骨髓移植疗效观测提供可靠方法。方法：Chelex-100法提取16例白血病患者移植前和移植后14d-10个月外周血DNA，PCR扩增8个STR位点，PAGE电泳，银染分析其多态性。结果：①16个供患者在8个STR检验中有2-6个位点多态性不一致，可满足临床检验的需要。②本法早于临床复发20d发现2例嵌合状态的变化，表现为患者原有成分增多。③发现1例新等位基因形成。结论：①PCR-STR分析是骨髓移植后供者是否植入的精确标志，有提前预警作用。②嵌合状态的变化可表现为患者原有成分增多和新等位基因形成。     

非清髓性异基因造血干细胞移植后早期自然杀伤细胞的重建

 目的　研究非清髓性异基因造血干细胞移植（NAST）后早期自然杀伤（NK）细胞的重建情况。方法　分别用流式细胞术直接免疫荧光法、T细胞活化实验、四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法检测10例NAST后白血病患者及10位健康对照者细胞表面标志及体外免疫功能。结果　移植后28～35 d,患者外周血CD+3、CD+4细胞比例降低,分别为（2.03±15.60）%和（22.69±12.29）%,CD+8细胞比例正常或增高,平均为（29.26±8.99）%;T细胞对有丝分裂原反应减低,其增殖反应刺激指数为94.60±44.87;NK细胞比例在正常范围或增高,为（18.77±9.11）%;NK细胞表面IL-2R表达阳性率增高,平均为（3.71±2.23）%,和正常对照组的（2.05±0.94）%相比差异有统计学意义（t＝2.116,P＝0.044）;部分患者NK细胞活性明显增强,移植组与健康对照组分别为（25.30±12.39）%和（16.60±3.53）%（t＝2.135,P＝0.047）。结论　NK细胞在NAST后早期即恢复,当特异性免疫功能仍低下时,它可能在机体抗感染和抗肿瘤中发挥着重要作用。     

非清髓异基因造血干细胞移植后免疫重建的初步研究

我们观察了 5例白血病患者行非清髓异基因造血干细胞移植 (NAST)后免疫重建的情况 ,现报道如下。对象和方法1　研究对象　 5例均为本院 2 0 0 0年 1 2月～ 2 0 0 1年 6月行NAST的白血病患者 ,1 0名不吸烟的健康成人作为对照组。患者的一般资料见表 1。预处理方案 :氟达拉滨 (Flud) 30mg·m-2 ·d-1 ,移植前第 9天 (- 9天 )～ - 5天或环磷酰胺 (CTX)30mg·kg-1 ·d-1 ,- 4～ - 3天 ;白消安 (BU) 2mg·kg-1 ·d-1 ,- 8～ - 5天 ;抗胸腺细胞球蛋白 (ATG) 1 0mg·kg-1 ·d-1 ,- 7～ - 4天。环孢菌素A(CsA) 2mg·kg-1 ·d-1 ,- 1天开始用…     

粒细胞集落刺激因子调节T淋巴细胞免疫功能的实验研究

目的研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对T淋巴细胞免疫功能的调节作用。方法以15例健康供者为对象,在其应用G-CSF前后,用流式细胞仪(FCM)检测外周血T淋巴细胞表面免疫标记、Annexin V及细胞内细胞因子的表达,用淋巴细胞转化试验检测T淋巴细胞的增殖反应。结果供者用G-CSF后,CIM^ 、CD8^ 细胞数无明显变化,CIM^ 、CD8^ 细胞内IFN-γ表达降低,IL-4表达增高;T细胞对丝裂原的增殖反应降低。Th1和Th2细胞表面Annexin V的表达无显著性差异。结论G-CSF制了丝裂原刺激T细胞的功能,使供者T细胞向Th2型细胞转化,细胞凋亡不是Th1／Th2转化的机制。