通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及miR-210表达的影响北大核心CSCD

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达的影响。方法将70只♂Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,酶联免疫吸附测定VEGF-A和HIF-1α;大鼠缺血肢肌组织分别采用Western blot检测VEGF-A和VEGF-R2蛋白表达和RT-PCR检测VEGF-A基因表达。结果检测结果显示:与对照组比较,模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各用药组VEGF-A、VEGF-R2和mi R-210表达均明显升高(P<0.01),其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达,促进内皮细胞增殖、分化,促进新生血管形成。     

五紫三黄方对激素依赖性哮喘小鼠模型嗜酸性粒细胞趋化着化因子和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的影响研究

目的：观察五紫三黄方对激素依赖性哮喘小鼠模型嗜酸性粒细胞趋化活化因子和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的影响。方法：小鼠雌雄各半120只,随机分为空白组、模型组、泼尼松对照组及五紫三黄方低、中、高剂量组,每组20只。利用卵蛋白（OVA）复制小鼠哮喘模型,并进行激素干预治疗来制作激素依赖性哮喘小鼠模型,在撤减激素过程中,以五紫三黄方干预治疗,观察其对哮喘小鼠模型嗜酸性粒细胞趋化活化因子和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的影响。结果：五紫三黄方各组与醋酸泼尼松均能减少肺组织内ECP和eotaxin的含量（P〈0．01）,五紫三黄方减少肺组织内ECP和eotaxin的含量较醋酸泼尼松显著（P〈0．01）。结论：五紫三黄方具有很好的减轻气道炎症的作用。     

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路的影响研究

目的 探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路的影响。 方法 于2014年3月,选取无特定病原体（SPF级）雄性SD大鼠70只,10只为对照组;60只制作糖尿病足大鼠模型,然后随机分为模型组、西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组、通心络+外周血间充质干细胞移植组各10只。完成相应实验操作28 d后,检测并比较各组大鼠的外周血间充质干细胞及缺血下肢肌组织中的内皮糖蛋白（CD）105、细胞周期蛋白（cyclinD1）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、磷酸化糖原合成酶激酶-3β（p-GSK-3β）表达水平。结果 通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组、西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义（P＜0.05）;西洛他唑+外周血间充质干细胞移植组大鼠的干细胞数、积分光密度高于外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义（P＜0.05）。6个造模组大鼠缺血下肢肌组织中CD105、cyclinD1、p-Akt表达水平低于对照组,p-GSK-3β表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;5个用药组大鼠缺血下肢肌组织中CD105、cyclinD1、p-Akt表达水平高于模型组,p-GSK-3β表达水平低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）;通心络+外周血间充质干细胞移植组大鼠缺血下肢肌组织中CD105、cyclinD1、p-Akt表达水平高于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,p-GSK-3β表达水平低于西洛他唑组、通心络组、外周血间充质干细胞移植组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 通心络联合外周血间充质干细胞移植可以通过调节PI3K/Akt信号通路,促进内皮细胞增殖、分化,从而促进糖尿病足大鼠的新生血管形成。     

五紫三黄方对哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:观察紫三黄方对激素依赖性哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响。方法:小鼠雌雄各半120只,随机分为:空白组、模型组、泼尼松对照组、五紫三黄方低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组20只。利用卵蛋白(OVA)复制小鼠哮喘模型,并进行泼尼松干预治疗来制作激素依赖性哮喘小鼠模型,在撤减激素过程中,以五紫三黄方干预治疗,观察其对哮喘小鼠模型肺组织上皮细胞ICAM-1表达。结果:五紫三黄方和泼尼松比较,五紫三黄方能明显降低肺组织上皮细胞ICAM-1表达(P<0.01)。     

五紫三黄方对激素依赖性哮喘模型小鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴功能的影响

目的观察五紫三黄方对醋酸泼尼松片干预治疗的哮喘模型小鼠下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴功能的影响。方法将120只BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松片组和五紫三黄方低、中、高剂量组,每组20只。空白组小鼠用生理盐水腹腔注射和雾化,其余5组小鼠于第1、7、14天给予腹腔注射10μg卵蛋白+2mg氢氧化铝凝胶;第21天开始用1%卵蛋白雾化激发,每天1次,连续7天,其后每隔3天雾化1次,共雾化18次。每次雾化前醋酸泼尼松片组和五紫三黄方低、中、高剂量组小鼠均给予3.9 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,第42天开始按照每两天醋酸泼尼松0.325 mg/kg速度撤减激素用量,于第63天全部撤离;同时从第35天开始五紫三黄方低、中、高剂量组分别给予五紫三黄方配方颗粒1.994g/kg、3.988 g/kg、7.976 g/kg灌胃,模型组和空白组给予等体积的生理盐水;第64天采用放射免疫法测定各组小鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(COR)含量。结果模型组与空白组小鼠血浆COR、CRH和ACTH含量比较差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,醋酸泼尼松片组小鼠以上指标均降低(P0.05或P0.01);与醋酸泼尼松片组比较,五紫三黄方低、中、高剂量组以上指标均有升高(P0.05或P0.01),且五紫三黄方高剂量组的改善程度优于五紫三黄方低、中剂量组(P0.05或P0.01)。结论五紫三黄方能够改善醋酸泼尼松片干预治疗哮喘小鼠导致的HPA轴功能受损,且大剂量使用效果更佳。     

津力达颗粒联合通心络胶囊对2型糖尿病大鼠胰腺组织自噬的影响

目的:观察中药复方津力达颗粒联合通心络胶囊对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠胰岛β细胞超微结构损伤情况、胰岛β细胞功能及胰腺组织自噬相关蛋白Beclin-1,Atg7,p62表达的影响。方法:采用高脂喂养结合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)30 mg·kg-1ip建立T2DM大鼠模型,15只雄性SD大鼠设为正常组正常饲料喂养,75只雄性SD大鼠高脂饲料喂养6周后STZ腹腔注射,根据血糖随机分为:模型组,津力达组(JLD),通心络胶囊组(TXL),联合用药组(JT),吡格列酮组(PLZ),JLD组于模型成功后给予津力达颗粒(3.0 g·kg-1·d-1),TXL组于模型成功后给予通心络胶囊(0.4 g·kg-1·d-1),JT组于模型成功后给予津力达颗粒(3.0 g·kg-1·d-1)加通心络胶囊(0.4 g·kg-1·d-1),PLZ组于模型成功后给予吡格列酮(10 mg·kg-1·d-1),连续ig 6周后,检测空腹血糖及血清胰岛素以计算胰岛β细胞功能指数,电镜观察各组大鼠胰岛β细胞超微结构;Western blot方法检测胰腺组织Beclin-1,Atg7,p62蛋白的表达变化。结果:与正常组相比较,模型组大鼠胰岛β细胞损伤减轻,胰岛β细胞功能指数明显降低,胰腺组织Beclin-1,Atg7蛋白表达明显减少,p62蛋白表达明显增加(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠胰岛功能指数升高,Beclin-1,Atg7表达升高,p62蛋白表达减少(P0.01),与JLD,TXL组比较,JT组Beclin-1,Atg7表达升高,p62蛋白表达减少(P0.05)。结论:津力达颗粒联合通心络胶囊可以提高胰岛β细胞功能指数,其作用可能与促进胰岛自噬有关,而维持胰腺组织自噬水平可能是延缓糖尿病进展的有效措施。     

通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病大鼠下肢缺血的影响

目的观察通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血的疗效。方法采用高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(STZ)注射建立糖尿病大鼠模型,再结扎右下肢股动、静脉制造下肢缺血模型。100只造模成功大鼠随机分为模型组、通心络组、干细胞组、联合治疗组,每组20只,以同批次20只健康大鼠为正常组。通心络组和联合治疗组给予通心络超微粉0.4g/(kg·d)灌胃,连续治疗28天;干细胞组和联合治疗组于术后第3天在缺血下肢皮下肌层注射约0.4 ml细胞悬浊液(PB-MSCs1.0×106/ml),分8个位点,每个点注射0.05 ml;正常组、模型组和干细胞组大鼠以等体积的生理盐水灌胃,同点、同量肌肉注射无菌RPM1640培养液。分别于术前、术后、治疗7和28天行激光多普勒血流灌注成像检测计算双后肢血流差值,治疗28天后行下肢动脉造影检测下肢血流。结果与正常组同时间点比较,其余各组在术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值显著增高(P0.01);与模型组同时间点比较,各治疗组在治疗7、28天示时双后肢血流差值明显降低,并且联合治疗组在治疗28天时较通心络组和干细胞组降低明显(P0.05或P0.01)。与本组术前比较,各治疗组术后、治疗7天和28天时双后肢血流差值比显著升高(P0.01),但各治疗组治疗7天和28天时双后肢血流差值均较本组术后降低,并且治疗后28天降低更明显(P0.01)。动脉造影结果显示,模型组和各治疗组均有侧枝循环形成,毛细血管生成,且与已有的毛细血管相互连接形成毛细血管网,其中联合治疗组缺血侧下肢动脉最清晰。结论通心络超微粉联合外周血间充质干细胞移植能明显改善糖尿病大鼠下肢缺血状况,并且优于单纯干细胞移植。     

补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松对支气管哮喘气道炎症的影响

目的观察补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松对慢性持续期支气管哮喘患者气道炎症的影响。方法于立冬前后15 d选择70例慢性持续期支气管哮喘患者,将其随机分为对照组和治疗组。对照组予沙美特罗/丙酸氟替卡松(50μg/250μg)早晚各1吸,治疗组在对照组治疗的基础上给予补通膏早晚各10 m L口服,2组疗程均为3个月。观察2组治疗前后ACT评分情况,测定2组治疗前后FEV1、FVC及血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果治疗结束后及结束3个月后2组ACT评分均显著升高(P均<0.05),且治疗组高于对照组(P均<0.05)。2组治疗后FEV1、FVC及血清INF-γ水平均显著高于治疗前(P均<0.05),且治疗组显著高于对照组(P均<0.05);血清ECP、IL-4水平显著低于治疗前(P均<0.05),且治疗组显著低于对照组(P均<0.05)。结论补通膏联合沙美特罗/丙酸氟替卡松治疗慢性持续期支气管哮喘有协同作用,可有效的缓解症状,改善肺功能及气道炎症。     

桑苏饮对哮喘模型大鼠气道重塑及肺组织上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的：探讨桑苏饮对哮喘发作期大鼠的疗效及作用机制。方法：雄性Wistar大鼠90只按随机数字表法分为6组：空白组,桑苏饮高剂量组、中剂量组、低剂量组,定喘汤组,模型组,每组15只。哮喘模型参照文献方法复制,观察治疗前后大鼠一般生活状态、肺组织形态学变化,免疫组化法测定细胞间黏附分子-1（ICAM-1）。结果：治疗后大鼠一般生活状态、肺组织形态学变化各治疗组较模型组皆有显著性差异,尤以桑苏饮低剂量组及定喘汤组疗效较好。桑苏饮不同剂量组间比较,低剂量组较高、中剂量组肺组织上皮细胞ICAM-1表达明显下调,有非常显著性差异（P〈0.01）。结论：低剂量桑苏饮能减轻嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润,下调哮喘模型大鼠肺组织上皮细胞ICAM-1的表达,从而有效控制气道炎症,改善气道重塑。     

肾康制剂治疗糖尿病肾病的作用机制及临床研究进展

<正>糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN或diabetic kidney disease, DKD),是一种糖尿病所致的慢性肾脏病(CKD),主要临床表现为肾小球滤过率<60 ml·min^-1·1.73 m^-2和(或)尿白蛋白/肌酐比值≥30 mg/g并持续3个月以上^[1]。DN是糖尿病(DM)中最常见的微血管并发症之一,在全球范围内,DN是CKD的首要病因,是导致终末期肾病(ESRD)的第二原因,