EV71小鼠适应株制备及体内外感染特点

目的 用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具.方法 用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得到小鼠传代株.以一定浓度亲代株和传代株病毒分别接种RD、Vero、SY5Y、Caco-2四种细胞,定量方法检测各时间点不同毒株在四种细胞上的复制数量,CCK8方法测定各时间点细胞的存活率;同时,两毒株分别腹腔注射感染1日龄小鼠,定期安乐死动物,采集肺、小肠、骨骼肌、大脑四种器官组织,进行动物体内病毒半定量和定量分析,同时进行各器官组织病理学观察、免疫组织化学鉴定.结果 与亲代毒株相比较,小鼠传代株(EV71-MMP4)表现出更强的肌肉来源细胞嗜性与毒性;同时,两毒株腹腔注射感染1日龄小鼠后,EV71-MMP4感染的小鼠体重增长较正常小鼠体重增长缓慢;半定量和定量RT-PCR显示,在小鼠肌肉中的病毒载量于感染后1 d和5 d达到高峰.EV71-MMP4感染组感染率较高、病毒组织分布较广、感染持续性较好、病毒载量较高,高剂量病毒感染后小鼠小肠、心肌和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化.免疫组织化学显示感染后小鼠骨骼肌有EV71病毒特异分布.结论 阜阳EV71小鼠适应株表现出较亲代毒株更好的小鼠易感性、细胞毒性,所建立的动物模型可用于EV71病毒致病机制、感染特点的研究和病毒疫苗及药物的评价.     

阿托西班对激素替代周期解冻胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨在行激素替代周期冻融胚胎移植的患者中,阿托西班对移植前有子宫内膜异常蠕动波的患者妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析172例行激素替代周期冻融胚胎移植患者的临床资料,根据移植前日观察子宫内膜是否有异常蠕动,将有子宫内膜异常蠕动者归为A组(104例),并依据是否移植日使用阿托西班分为治疗组(A1,63例)和对照组(A2,41例),将没有子宫异常蠕动者归为B组(68例);分别比较各组的胚胎着床率、临床妊娠率、异位妊娠率及流产率。结果 A组和B组在一般资料及流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P0.05);A1组的胚胎着床率(41.18%)和临床妊娠率(46.03%)均明显高于A2组(27.42%,26.83%),差异均有统计学意义(P=0.046,P=0.049);B组的胚胎着床率及临床妊娠率(39.82%,45.59%)均明显高于A2组(27.42%,26.83%),差异也均有统计学意义(P=0.049,P=0.049)。结论子宫内膜的异常蠕动可能会影响激素替代周期冻融胚胎移植的妊娠结局,而移植前给予阿托西班治疗能有效抑制内膜的异常蠕动,改善子宫内膜容受性,提高着床率和临床妊娠率。     

7例非嵌合型Klinefelter综合征患者手淫取精结合ICSI技术的临床分析

目的探讨非嵌合型Klinefelter综合征患者的生育治疗措施。方法总结2016年5月1日-2018年1月1日于我院生殖医学中心7例非嵌合型Klinefelter综合征患者的临床资料,其精液离心后均检查发现少量精子,配合配偶同步促排卵,并结合卵泡内单精子注射技术(ICSI)进行IVF-ET助孕。结果其中3例患者配偶成功分娩健康婴儿,1例生化妊娠,3例未孕;结论少部分非嵌合型Klinefelter综合征患者手淫取精结合ICSI技术也可能生育健康后代。     

人肠道病毒71型亚单位疫苗的研制

目的利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价。方法在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝数和病理变化,对疫苗的保护效果进行评价。结果通过肽段融合的方法,得到五种备选疫苗,分别为VacA,VacB,VacC,VacD和VacE,这五种疫苗均具有一定的体外保护能力,并且VacB和VacC与正常人大脑组织无明显交叉反应。动物模型评价结果显示,VacB和VacE能赋予幼鼠抗病毒感染的保护效果。结论利用EV71的小鼠感染模型评价了针对EV71的亚单位联合疫苗,VacB和VacE的保护效果较好,此外,VacB与人脑组织间无明显交叉反应,可以作为潜在的无神经毒性的临床使用疫苗。     

黄体期降调节联合人工周期方案在冻融胚胎反复移植失败患者中的应用

目的探讨在黄体期用3.75mg GnRH-a降调节预处理对冻融胚胎移植(FET)反复移植失败患者的子宫内膜容受性及临床结局的影响。方法回顾性分析2015年5月至2017年5月在本生殖中心行人工周期方案FET助孕治疗且反复胚胎种植失败(曾移植次数≥2次且均失败,每次移植胚胎数均为2~3枚)的207例患者的临床资料,根据本次内膜准备方案中是否进行GnRH-a降调节预处理分为非降调节组(A组)118例及降调节组(B组)89例。比较两组患者的性激素水平、黄体酮注射日子宫内膜厚度和血流、黄体酮注射日LH水平、临床妊娠率和流产率。并从降调节预处理组中选取46例患者(其前次内膜准备方案均为非降调节的人工周期方案)进行自身对照分析。结果两组患者平均年龄、不孕年限、基础性激素水平、子宫内膜厚度、优胚率、早期流产率比较均无统计学差异(P0.05),但降调节组子宫内膜A型血流者比例[65.17%(58/89)]、临床妊娠率[55.06%(49/89)]均显著高于非降调节组[分别为38.98%(46/118)、38.98%(46/118)],而降调节组孕酮日LH水平显著低于非降调节组[(10.27±3.79)U/L vs.(1.89±0.78)U/L],差异均有统计学意义(P0.05);降调节组自身对照分析显示患者的内膜厚度、优胚率均无统计学差异(P0.05),但降调节预处理后的A型血流者比例[56.52%(26/46)]显著高于前次非降调节周期[32.61%(15/46)](P0.05)。结论与传统人工周期内膜准备方案比较,黄体期用3.75mg GnRH-a降调节预处理后可显著提高FET周期胚胎反复移植失败患者的子宫内膜容受性和临床妊娠率,而不增加流产率。     

阿托西班在GnRHa联合人工周期解冻移植方案中的应用

目的对使用Gn RHa预处理联合人工周期方案进行解冻移植的患者进行回顾性分析,探讨子宫内膜的异常蠕动对妊娠结局的影响,以及阿托西班对抑制内膜异常蠕动,改善子宫容受性,提高胚胎移植妊娠结局的效果;方法回顾性分析143例Gn RHa预处理联合人工周期方案行胚胎冷冻移植患者的资料,将移植前日超声观察有子宫内膜异常蠕动者归为A组(83例),根据移植日是否使用阿托西班分为治疗组(A1,42例)和未治疗的对照组(A2,41例),将移植前日没有子宫异常蠕动者归为B组(60例);分别比较A1、A2及A2、B组的胚胎着床率、临床妊娠率、异位妊娠率及流产率的差异。结果A组(A1,A2)和B组在一般资料及流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P0.05);而在有子宫内膜异常蠕动的A组中,治疗组(A1组)的胚胎着床率和临床妊娠率均明显高于对照组(A2组),差异均有统计学意义;B组的胚胎着床率及临床妊娠率均明显高于A2组,差异也均有统计学意义;结论子宫内膜异常蠕动可能会影响子宫内膜的容受性,使妊娠结局不良,而阿托西班可以抑制内膜的异常蠕动,提高胚胎着床率及临床妊娠率。     

HER-2基因及蛋白的检测在乳腺癌临床诊断中的价值

目的探讨用免疫组化（immunohistochemistry,IHC）和显色原位杂交技术（chromogenic in situ hybridization,CISH）检测乳腺癌HER-2蛋白表达和基因扩增在临床病理诊断及分子靶向治疗中的应用及意义。方法用免疫组化（IHC）和显色原位杂交技术（CISH）检测60例乳腺癌石蜡包埋组织标本中HER-2蛋白的表达及基因扩增情况,比较两种方法的结果以及与临床病理的关系。结果 HER-2蛋白过表达与HER-2基因扩增之间密切相关。结论两者综合结果的判定对乳腺癌患者的临床治疗有明确的指导意义,可用于临床赫塞汀（Herceptin）分子靶向治疗病例的筛选。