阿托伐他汀对高糖诱导的系膜细胞凋亡的影响

目的探讨不同浓度阿托伐他汀对大鼠系膜细胞凋亡的影响。方法体外培养大鼠永生系膜细胞,分为5组:对照(C)组;高糖(30mmol/L)(H)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-7 mmol/L)(H+A1)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-6 mmol/L)(H+A2)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-5 mmol/L)(H+A3)组。采用Annexin V-FITC和PI双染法检测细胞凋亡。采用caspase-3活性检测试剂盒检测系膜细胞caspase-3活性。结果与C组相比,H组系膜细胞凋亡率明显增加,caspase-3活性明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。与H组相比,高糖加不同浓度阿托伐他汀组细胞凋亡率明显降低,caspase-3活性明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且呈浓度依赖。结论阿托伐他汀可以通过caspase途径抑制醛固酮诱导的大鼠系膜细胞凋亡。     

安体舒通联合西拉普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用的研究

目的: 探讨安体舒通和西拉普利联合使用对糖尿病大鼠肾脏的保护机制。方法: Wistar 大鼠随机分为5组:对照组(N组);模型组(D组);安体舒通组(S组);西拉普利组(C组);联合给药组(S+C组)。采用链脲佐菌素(STZ)注射于单肾切除大鼠的腹腔中建立糖尿病肾脏损害大鼠模型。4周后观察大鼠的24 h尿微量白蛋白及血清肌酐清除率。免疫组化法检测肾切片中核因子-κB(NF-κB)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达。用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肾组织中血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT-1R)的表达。结果: 各给药组均可抑制糖尿病大鼠24 h尿微量白蛋白的增加、血清肌酐清除率的降低及肾组织病理结构损害,联合组优于单独给药组。各给药组均可抑制肾组织NF-κB及PAI-1的表达,以联合组最明显。各给药组均可使AT-1R mRNA的表达减少,以联合组最明显。结论: 安体舒通与西拉普利联合用药对糖尿病肾脏保护作用优于单独用药,其部分机制可能是通过抑制NF-κB 及PAI-1的活化、减少AT-1R表达而实现的。     

促红细胞生成素通过调节未折叠蛋白反应减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞凋亡

 目的：探讨促红细胞生成素（EPO）能否通过调节未折叠蛋白反应减轻顺铂(CP)诱导的肾小管上皮细胞凋亡。方法：健康雄性SD大鼠随机分为3组（每组12只）,包括正常对照组（control 组）、CP组和CP+重组人EPO组（CP+rHuEPO组）。顺铂或生理盐水注射96 h后处死SD 大鼠,留取血液和肾脏组织,检测血尿素氮（BUN）和血清肌酐（SCr）水平,PAS染色光镜观察肾脏形态结构变化;TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡;采用Western blotting法、免疫组化及激光共聚焦技术检测EPO受体(EPOR)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达。结果：与control组比较,CP组与CP+rHuEPO组大鼠BUN及SCr水平均显著升高（P＜0.05）,TUNEL染色显示凋亡细胞阳性率显著上升（P＜0.05）,EPOR及GRP78蛋白表达显著上调（P＜0.05）;PAS染色光镜示CP组肾脏组织结构出现明显损伤性变化;与CP组比较,CP+rHuEPO组SCr水平显著降低（P＜0.05）,凋亡细胞阳性率显著下降（P＜0.05）,EPOR及GRP78蛋白表达下调（P＜0.05）,肾脏病理损伤减轻。结论：EPO可以减轻顺铂引起的肾损害,其机制可能与调节未折叠蛋白反应减轻肾小管上皮细胞凋亡相关。     

醛固酮在腹膜透析大鼠腹膜纤维化中的作用

目的:研究醛固酮在腹膜透析大鼠腹膜纤维化中的作用,以及醛固酮受体拮抗剂是否能够减轻腹膜纤维化。方法:通过腹腔注射脂多糖(第1、3、5、7天,0.6 mg/kg)+透析液(每天腹腔注射4.25%含糖透析液100 m L/kg)建立伴有腹膜纤维化的腹膜透析大鼠模型。同时给予醛固酮受体拮抗剂(螺内酯,100 mg·kg-1·d-1)灌胃。4周后取大鼠腹膜行病理和免疫组化检测,同时采用real-time PCR和Western blot法检测醛固酮合成酶(CYP11B2)、11β-羟基类固醇脱氢酶2型(11β-HSD2)、盐皮质激素受体(MCR)和炎症因子的表达情况。结果:成功建立伴有腹膜纤维化的腹膜透析大鼠模型,发现腹膜间皮细胞受损,形态改变,胶原纤维沉积,腹膜增厚,腹膜和腹透液中巨噬细胞浸润增多。与正常大鼠相比,腹膜上MCR、11β-HSD2和CYP11B2表达增高,醛固酮含量增多。同时腹膜上NF-κB/MCP-1表达增加。而给予螺内酯治疗后腹膜纤维化减轻,NF-κB/MCP-1表达减少。结论:局部产生的醛固酮可能通过NF-κB/MCP-1途径参与腹膜纤维化过程。醛固酮受体拮抗剂螺内酯能够减轻腹膜透析大鼠的腹膜纤维化程度。     

醛固酮对高糖状态下肾小球系膜细胞血管紧张素Ⅱ受体基因表达的影响

血管紧张素Ⅱ能通过其1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)途径活化NF-κB[1].诱导单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达[2],导致炎性反应.而醛固酮(ALD)是否也有类似的作用,尚未阐明.由于ALD能通过作用于肾脏固有细胞参与肾脏的损伤.因此,本实验通过研究ALD对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞(RMC)上AT1aR和AT2R基因表达的影响,探讨ALD在糖尿病肾病(DN)中的作用机制.     

低钙透析液对血液透析患者生活质量的影响

目的探讨低钙透析液（LCD）对维持性血液透析（MHD）患者生活质量（OOL）的影响。方法将30例血清矫正钙≥2．37mmol／L的MHD患者依据血甲状旁腺激素（iPTH）水平分为3组,均使用LCD透析3个月,比较3组患者使用LCD透析前后SF-36问卷评分值及血清钙、磷、钙磷乘积、iFrrH、骨钙素（BGP）水平。结果①透析后与透析前相比,Ⅰ组患者SF-36总分、生理健康总分（PCS）、生理功能、躯体职能（RP）、躯体疼痛（BP）及情感状况评分增高（P〈0．05）,总体健康、生命活力、社会功能及精神健康无差异;Ⅱ组患者PCS、RP和BP评分降低（P〈0．05）,余指标无差异;Ⅲ组各指标评分均无差异（P〉0．05）。②与透析前相比,Ⅰ、Ⅱ组患者透析后血清钙和钙磷乘积均降低（P〈0．05）,iPTH和BGP水平均升高（P〈0．05）;Ⅲ组无变化。结论LCD短期应用能显著提高无动力型骨病患者生活质量,尤其减轻躯体疼痛,长期使用可能影响患者生理健康从而对QOL产生负影响,LCD对MHD患者心理健康无明显改善。     

生理浓度钙透析液对伴低甲状旁腺素水平血液透析患者矿物质及骨代谢的影响

目的观察生理浓度钙透析液对伴低甲状旁腺素水平血液透析患者矿物质及骨代谢的影响。方法将48例血清iPTH(65～150pg/ml)伴校正钙水平≥2.37mmol/L患者按使用透析液钙浓度不同随机分为:透析液钙浓度1.50mmol/L(DCa-1.50)与1.25mmol/L(DCa-1.25)两组;两组内按是否口服骨化三醇随机分为两亚组:口服骨化三醇(+Calcitriol)与非口服骨化三醇(-Calcitriol)组;治疗6个月。每3个月检测透前血清Ca,P,iPTH,ALP及BGP指标。结果观察结束时,DCa-1.5-Calcitriol,DCa-1.25+Calcitriol及DCa-1.25-Calcitriol组血清iPTH及BGP水平升高(P<0.05);DCa-1.25+Calcitriol及DCa-1.25-Calcitriol组血清Ca水平降低(P<0.05),Ca×P水平降低(P<0.05);DCa-1.5+Calcitriol组血清较同期DCa-1.25-Calcitriol组水平Ca水平增高(P<0.05);透前血清iPTH与BGP水平呈正相关(r=0.181,P<0.05)。结论生理浓度钙透析液能够减轻高钙负荷,持续有效刺激甲状旁腺素分泌及改善受抑制的骨代谢。联合骨化三醇及定期监测上述指标,可以安全有效的维持甲状旁腺素在适当水平不引发骨质疏松。     

盐酸法舒地尔通过活化Akt与抑制PTEN减轻顺铂导致的肾小管上皮细胞凋亡

 目的: 探讨盐酸法舒地尔(fasudil)能否通过活化Akt并抑制PTEN减轻顺铂(CP)导致的肾小管上皮细胞凋亡。方法: 健康雄性SD大鼠随机分为3组(每组12只),包括正常对照(control)组、CP组及CP+fasudil组。生理盐水或顺铂腹腔注射96 h后处死SD 大鼠,留取血液和肾脏组织,检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(sCr)水平。PAS染色光镜观察肾脏形态结构的变化;TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡;分别采用Western blotting法和/或免疫组化技术检测Rho蛋白激酶1(ROCK1)、PTEN、Akt 蛋白表达变化及磷酸化Akt(p-Akt)水平。结果: 与control组比较,CP组与CP+fasudil组大鼠的BUN及sCr水平、凋亡细胞阳性率、ROCK1及PTEN蛋白表达均显著升高(P<0.05),而p-Akt表达则显著减少(P<0.05);PAS染色光镜示CP组肾脏组织结构出现明显损伤性变化;与CP组比较,CP+fasudil组的sCr水平、凋亡细胞阳性率、ROCK1及PTEN蛋白表达均显著下调(P<0.05),而p-Akt水平则显著增高(P<0.05);此外,肾脏病理损伤减轻。 结论: 盐酸法舒地尔可以减轻顺铂引起肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与活化Akt及抑制PTEN蛋白表达相关。     

醛固酮对肾小球系膜细胞上血管紧张素Ⅱ受体表达的影响

目的：研究醛固酮(ALD)对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞（RMCs）上血管紧张素Ⅱ1a、1b 和 2 型受体(AT-1aR、 AT-1bR 和 AT-2R)表达的影响及意义。方法:以不同浓度的 ALD (10-8-10-6 mol/L)或 10-7 mol/L 螺内酯(醛固酮受体拮抗剂,SPI)或 10-7 mol/L 氯沙坦（血管紧张素Ⅱ 1 型受体拮抗剂,Los）或10-9 mol/L PD123319(血管紧张素Ⅱ 2 型受体拮抗剂,PD)刺激高糖(30 mmol)状态下培养的 RMCs, MTT 法检测 RMCs 的增殖,半定量 RT-PCR 法检测细胞上 AT-1aR、AT-1bR 和 AT-2R mRNA 的表达,ELISA法检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达。结果: ALD(10-8-10-6 mol/ L)刺激高糖状态下 RMCs 12 h 后, AT-1aR、AT-1bR 和 AT-2R mRNA 表达显著上调,分别为高糖对照组的 1.62-1.77倍、9.61-9.89倍、7.26-7.35倍（P<0.01）。 ALD 受体拮抗剂 SPI 能拮抗 ALD 上调 AT-1aR、 AT-1bR 表达的作用;而 AT-2R mRNA 表达轻度增加（P<0.05）。ALD 刺激高糖状态下 RMCs 12 h 后 AT-1aR/AT-1bR 显著下降（P<0.01）,SPI 能拮抗 ALD的这种作用。ALD 刺激高糖状态下RMCs 12 h 后,MCP-1表达增加（P<0.01）,SPI/Los/PD 能拮抗 ALD 的作用。结论: ALD 能通过上调高糖状态下 RMCs 上 AT-1aR、 AT-1bR 和 AT-2R 基因表达, 改变 AT-1R 亚型的比例,诱导 MCP-1 过度表达,参与炎症反应。